Thermo Fisher Scientific BOVIGAM PC-HP Stimulating Antigen Instrucciones de operación

Marca
Thermo Fisher Scientific
Modelo
BOVIGAM PC-HP Stimulating Antigen
Tipo
Instrucciones de operación
Sólo para uso veterinario. Sólo para uso In Vitro.
INSTRUCCIONES DE USO
BOVIGAM™ PC-HP Stimulating Antigen
Para el diagnóstico laboratorio de la tuberculosis en animales mediante la prueba interferón gamma bovina
Número de Catálogo 7600105
N.º de Pub. MAN0017014 Rev. A.0
NO ES PARA PRUEBAS CUTÁNEAS
¡ADVERTENCIA! Lea las hojas de datos de seguridad (SDS) y siga las instrucciones de manipulación. Lleve el equipo de protección individual
(EPI) adecuado (gafas, ropa, guantes). Las hojas de datos de seguridad (SDS) se encuentran disponibles en thermofisher.com/support.
¡ADVERTENCIA! POSIBLE RIESGO BIOLÓGICO.
Lea la información sobre seguridad frente a los riesgos biológicos en la página de este producto
en thermofisher.com. Lleve el equipo de protección individual (EPI) adecuado (gafas, ropa, y guantes).
Introducción
Applied Biosystems™ BOVIGAM™ PC-HP Stimulating Antigen es un antígeno de estimulación que contiene péptidos sintéticos. BOVIGAM™ PC-HP
Stimulating Antigen se basa en una composición de péptidos derivada exclusivamente de ESAT-6 y CFP-10, RV3615c, OmpA y dos antígenos adicionales. La
solución reconstituida no contiene ningún conservante.
Instrucciones generales
Es fundamental que todas las muestras de sangre recogidas para la prueba BOVIGAM™ 2G TB Kit se tomen de un lugar limpio en un tubo que contenga
heparina como anticoagulante. Invierta suavemente los tubos varias veces para asegurar la mezcla completa de la sangre y la heparina. Las muestras de
sangre deben transportarse al laboratorio de pruebas a temperatura ambiente (22±3°C, evite las temperaturas extremas) y deben usarse en la prueba el
BOVIGAM™ 2G TB Kit en las 30 horas posteriores a la recogida.
¡IMPORTANTE! La sangre no debe almacenarse en el frigorífico.
Principio del ensayo
BOVIGAM™ 2G TB Kit es una prueba rápida, basada en sangre de
inmunidad mediada por células (IMC) para el diagnóstico de la tuberculosis
bovina en ganado bovino y otros rumiantes.
BOVIGAM™ PC-HP Stimulating Antigen se mezcla con los linfocitos en
sangre y se incuba durante la noche. Después, el plasma sanguíneo se recoge
de la parte superior de los cultivos y se analiza en busca de la producción de
interferón-γ (IFN-γ) usando el BOVIGAM™ 2G TB Kit.
Precauciones generales
Seguridad en laboratorio
Se deben seguir estrictamente las normas nacionales de seguridad.
Procedimiento del ensayo
Para la estimulación en formato 96 pocillos (recomendado)
Un vial de BOVIGAM™ PC-HP Stimulating Antigen liofilizado se
reconstituye con 3 mL de agua desionizada o destilada.
Asegúrese de efectuar la resolubilización completa. BOVIGAM™ PC-HP
Stimulating Antigen reconstituido se puede alícuotas y almacenar a −80ºC
durante varios meses, pero debe estar a temperatura ambiente (22±3°C) y
mezclar completamente antes de utilizarlo de nuevo.
Mezcle uniformemente la muestra de sangre antes de usar.
Para analizar, añada 250 µL alícuotas de sangre en recipientes de cultivo
(dependiendo de la configuración de la estimulación que esté planificando:
BOVIGAM™ PC-HP Stimulating Antigen, NIL, PWM). Si se necesita más
plasma en el IEE BOVIGAM™ 2G TB Kit posterior, se puede configurar la
estimulación duplicada.
Para una alícuota, agregue 25 µL de BOVIGAM™ PC-HP Stimulating
Antigen y mezcle completamente. Para otras alícuotas añada 25 µL de PBS
estéril para una y 25 µL de mitógeno de fitolaca (PWM) para otra (si se usa
el control de PWM). Debe seguir los procedimientos asépticos usando un
aparato de pipeteo estéril.
Interpretación
1. Calcular la media de los valores de absorción del antígeno NIL y del
BOVIGAM™ PC-HP Stimulating Antigen para cada muestra.
2. Comparar la media de los valores de absorción de las muestras de
antígeno NIL y del BOVIGAM™ PC-HP Stimulating Antigen para cada
animal.
Positivo
=
DO PC-HP
−
≥
0.1
Negativo
=
DO PC-HP
−
<
0.1
3. El plasma sanguíneo recogido del ganado, con un valor DO mayor de
0.100 superior al antígeno NIL indica la presencia de una infección por
Mycobacterium bovis.
Estimulación con PWM (control de estimulación)
1. Calcular la media del valor de absorción del antígeno NIL y PWM para
cada muestra.
2. Comparar la media de los valores de absorción de las muestras del
antígeno NIL y el PWM para cada animal.
DO PWM − Antígeno Nil ≥ 0.5
Las muestras de sangre que muestran un valor de DO medio mayor que 0.5
después de la estimulación con mitógeno de fitolaca (PWM) en el análisis
IEE (después de la sustracción del valor DO NIL), contienen linfocitos
vitales.
Las muestras medidas con valores más bajos pueden indicar que la
vitalidad de los linfocitos se redujo durante el transporte o manipulación
inadecuada.
Además, las muestras de PWM de animales estresados o
inmunosuprimidos o animales en mal estado pueden mostrar valores de
DO medios por debajo de 0.5. Las muestras que no alcanzan el punto de
corte no deben analizarse.
PRECAUCIÓN
La inmunosupresión causada por un tratamiento reciente con
dexametasona o por parto puede reducir la respuesta a los antígenos
micobacterianos. Los animales que hayan recibido una inyección de
dexametasona la semana anterior o que hayan parido durante las 4
semanas anteriores deben repetir el ensayo para reducir la posibilidad de
un resultado falso negativo.
Al igual que cualquier ensayo biológico, éste puede dar un resultado falso
positivo o falso negativo debido a las condiciones locales. Un ensayo debe
interpretarse en el contexto de toda la información clínica, histórica y
epidemiológica relevante al(los) animal(es) analizado(s). En ciertas
circunstancias, puede necesitarse más ensayos de confirmación.
La responsabilidad de la interpretación del ensayo y las posteriores
decisiones sobre la cría de los animales recaen solamente en el usuario y en
cualquier veterinario asesor y los consejeros o autoridades sanitarias
correspondientes.
Thermo Fisher Scientific no acepta ninguna responsabilidad por pérdida o
daños, comoquiera que fueran causados, que tengan lugar a partir de la
interpretación de los resultados del ensayo.
Repetición de la prueba
La repetición de la prueba puede realizarse en cualquier momento después
de la última prueba.
Almacenamiento
Guardar, protegido de la luz, a un mínimo de −20ºC, mejor por debajo de
−80ºC (liofilizado). BOVIGAM™ PC-HP Stimulating Antigen reconstituido
y alícuotas debe guardarse congelado a −80±5°C.
Modo de emisión
BOVIGAM™ PC-HP Stimulating Antigen está disponible en viales de 3 mL.
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2 octubre 2020
Asistencia al cliente y soporte técnico
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Visite thermofisher.com/support para conocer lo último en servicios y
asistencia, incluyendo lo siguiente:
• Números de teléfono de contacto de todo el mundo
• Pedidos y soporte web
• Guías de usuario, manuales y protocolos
• Certificados de análisis
• Fichas técnicas de seguridad (Safety Data Sheets, SDS; también
conocidas como MSDS)
NOTA: Para conocer las SDS de los reactivos y productos químicos de
otros fabricantes, póngase en contacto con el fabricante.
Garantía limitada del producto
Life Technologies Corporation y/o su(s) filiale(s) garantizan sus productos
tal y como se establece en los términos y condiciones generales de venta de
Life Technologies, que se pueden encontrar en el sitio web de
Life Technologies www.thermofisher.com/us/en/home/global/
terms-and-conditions. Si tiene alguna duda, póngase en contacto con
Life Technologies en thermofisher.com/support.
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