1
(English)
EN
Issue Date: 2018-03
Product Instructions
Salmonella Express System
Product Description and Intended Use
The 3M™ Petrilm™ Salmonella Express (SALX) System is used for the rapid qualitative detection and biochemical
conrmation of Salmonella species in enriched food and food process environmental samples. The 3M Petrilm SALX
System consists of the 3M™ Salmonella Enrichment Base, the 3M™ Salmonella Enrichment Supplement, the 3M™
Petrilm™ Salmonella Express (SALX) Plate, and the 3M™ Petrilm™ Salmonella Express (SALX) Conrmation Disk,
which are all packaged separately.
The 3M Petrilm SALX Plate is a sample ready-to-use chromogenic culture medium system that contains a cold-water-
soluble gelling agent and is selective and dierential for Salmonella, providing a presumptive result. The 3M Petrilm
SALX Conrmation Disk contains a biochemical substrate that facilitates the biochemical conrmation of Salmonella
organisms.
The 3M Petrilm SALX Plate is used with or without the 3M Petrilm SALX Conrmation Disk. The 3M Petrilm SALX
Conrmation Disk may be used only in conjunction with the 3M Petrilm SALX Plate.
The 3M Petrilm SALX System is intended for use in a laboratory environment by professionals trained in laboratory
techniques. 3M has not documented the use of this product in industries other than food. For example, 3M has
not documented this product for testing water, pharmaceutical, cosmetic, clinical or veterinary samples. The 3M
Petrilm SALX System has not been evaluated with all possible food products, food processes and food processing
environments, testing protocols or with all possible strains of bacteria and may not detect all Salmonella strains. 3M has
not validated the 3M Petrilm SALX System using composite samples.
As with all test methods, the enrichment medium formulation can inuence the results. The 3M Petrilm SALX Plate has
only been evaluated for use with the 3M Salmonella Enrichment Base, the 3M Salmonella Enrichment Supplement, and
Rappaport-Vassiliadis R10 (R-V R10) Broth (typical formulation of R-V R10 broth follows below):
Typical Formula
Magnesium chloride (anhydrous) 13.4 grams
Sodium chloride 7.2 grams
Casein peptone 4.54 grams
Monopotassium phosphate 1.45 grams
Malachite green 0.036 grams
Demineralized water 1000.0 mL
pH 5.1 ± 0.2 @ 25°C
Adjust pH as required to meet performance standards.
3M Petrilm SALX Plate and 3M Petrilm SALX Conrmation Disk components are decontaminated though not
sterilized. 3M Food Safety is certied to International Organization for Standardization (ISO) 9001 for design and
manufacturing. 3M Petrilm SALX Plate and 3M Petrilm SALX Conrmation Disk have not been evaluated with all
possible food products, food processes, testing protocols or with all possible microorganism strains.
Safety
The user should read, understand, and follow all safety information in the instructions for the 3M Petrilm SALX System.
Retain the safety instructions for future reference.
WARNING: Indicates a hazardous situation, which, if not avoided, could result in death or serious injury and/or
property damage.
NOTICE: Indicates a potentially hazardous situation, which, if not avoided, could result in property damage.
2
(English)
EN
W WARNING
Do not use the 3M Petrilm SALX System in the diagnosis of conditions in humans or animals.
3M Petrilm SALX System will not specically dierentiate some lactose positive Salmonella sp. (primarily S.
arizonae and S. diarizonae) from other lactose positive organisms. Lactose positive Salmonella strains will appear
as non-Salmonella (blue colonies, green colonies, blue to green colonies, and/or black colonies with or without a
yellow zone and/or associated gas bubble). It has been stated that these strains account for less than 1% of the total
Salmonella serotypes
1
.
The user must train its personnel in current proper testing techniques: for example, Good Laboratory Practices
2
or
ISO 17025
3
or ISO 7218
4
.
To reduce the risks associated with a false negative result leading to the release of contaminated product and/or the
possibility of false positive results requiring a retest:
• Upon each plate use, verify hydrated 3M Petrilm Salmonella Express Plate for any gel discoloration.
• Do not use 3M Petrilm Salmonella Express Plate that show discoloration.
• Always use the 3M Petrilm SALX System before the expiration date.
• Use the 3M Petrilm SALX System with food samples and food process environmental samples that have been
validated either by the user or by a third party.
• Use the 3M Petrilm SALX System only with surfaces, neutralizing buers, and protocols that have been validated
either by the user or by a third party.
• Store the 3M Petrilm SALX System as indicated on the package and in the product instructions.
• Follow the procedures and perform the tests exactly as stated in the product instructions.
• Always use a permanent, ultra ne tip marker to circle the characteristic presumptive Salmonella colonies on the
top lm before placing the 3M Petrilm SALX Conrmation Disk onto the gel.
To reduce the risks associated with exposure to chemicals and biohazards:
• Perform pathogen testing in a properly equipped laboratory under the control of trained personnel.
• Always follow standard good laboratory safety practices (GLP)
2
, including proper containment procedures, wearing
appropriate protective apparel and eye protection while handling testing materials and test samples.
• Avoid direct contact with the contents of the enrichment medium and inoculated plates.
• Dispose of enrichment media and inoculated plates according to all applicable government, regulatory regulations
and applicable laboratory procedures.
• Wear appropriate protective apparel while handling the 3M Petrilm SALX Plate as some of the components may be
considered allergenic and irritants to some individuals.
To reduce the risks associated with environmental contamination:
• Follow current industry standards and local regulations for disposal of contaminated waste.
NOTICE
3M Petrilm SALX System does not dierentiate any one Salmonella strain from another.
Consult the Safety Data Sheet for additional information.
For information on documentation of product performance, visit our website at www.3M.com/foodsafety or contact
your local 3M representative or distributor.
User Responsibility
Users are responsible for familiarizing themselves with product instructions and information. Visit our website at
www.3M.com/foodsafety, or contact your local 3M representative or distributor for more information.
When selecting a test method, it is important to recognize that external factors such as sampling methods, testing
protocols, sample preparation, handling, and laboratory technique may inuence results.
It is the user’s responsibility in selecting any test method or product to evaluate a sucient number of samples with the
appropriate matrices and microbial challenges to satisfy the user that the chosen test method meets the user’s criteria.
It is also the user’s responsibility to determine that any test methods and results meet its customers’ and suppliers’
requirements.
As with any test method, results obtained from use of any 3M Food Safety product do not constitute a guarantee of the
quality of the matrices or processes tested.
3
(English)
EN
Limitation of Warranties / Limited Remedy
EXCEPT AS EXPRESSLY STATED IN A LIMITED WARRANTY SECTION OF INDIVIDUAL PRODUCT PACKAGING, 3M
DISCLAIMS ALL EXPRESS AND IMPLIED WARRANTIES, INCLUDING BUT NOT LIMITED TO, ANY WARRANTIES OF
MERCHANTABILITY OR FITNESS FOR A PARTICULAR USE. If any 3M Food Safety Product is defective, 3M or its
authorized distributor will, at its option, replace or refund the purchase price of the product. These are your exclusive
remedies. You must promptly notify 3M within sixty days of discovery of any suspected defects in a product and return
it to 3M. Please call Customer Service (1-800-328-1671 in the U.S.) or your ocial 3M Food Safety representative for a
Returned Goods Authorization.
Limitation of 3M Liability
3M WILL NOT BE LIABLE FOR ANY LOSS OR DAMAGES, WHETHER DIRECT, INDIRECT, SPECIAL, INCIDENTAL OR
CONSEQUENTIAL DAMAGES, INCLUDING BUT NOT LIMITED TO LOST PROFITS. In no event shall 3M’s liability under
any legal theory exceed the purchase price of the product alleged to be defective.
Storage
Plate storage
Upon receipt, store unopened 3M Petrilm SALX Plate pouches at 2 to 8ºC. They are sensitive to both moisture and
light. Just prior to use, allow unopened pouches to come to room temperature (20 - 25°C / <60% RH) before opening.
Return unused 3M Petrilm SALX Plates to pouch. To prevent exposure to moisture, store opened 3M Petrilm SALX
Plate pouches in a sealed bag, protected from light, at -20 to -10°C for no longer than 4 weeks.
Conrmation Disk storage
3M Petrilm SALX Conrmation Disks are individually packaged within a foil pouch. They are sensitive to both moisture
and light. Store unopened pouches of 3M Petrilm SALX Conrmation Disks at 2 to 8ºC. Remove only those individually
packaged 3M Petrilm SALX Conrmation Disks that will be used immediately and store the remaining 3M Petrilm
SALX Conrmation Disks in the foil pouch by folding the end of the pouch over and applying adhesive tape. To prevent
exposure to moisture, do not refrigerate opened 3M Petrilm SALX Conrmation Disk pouches. Store resealed
pouches in a cool (20-25°C) dry place (less than 60% RH) for no longer than 4 weeks or placed resealed pouches in a
re-sealable storage bag and store at -20 to -10°C for no longer than 5 months.
Do not use 3M Petrilm SALX Plates that show discoloration after hydration. Do not use 3M Petrilm SALX
Conrmation Disks that show discoloration. Expiration date and lot number are noted on each package of 3M Petrilm
SALX Plates and 3M Petrilm SALX Conrmation Disks. The lot number is also noted on individual plates and on
individual conrmation disk packages.
Disposal
After use, 3M Petrilm SALX Plates and 3M Petrilm SALX Conrmation Disks may contain microorganisms that may
be a potential biohazard. Follow current industry standards and local regulations for disposal of contaminated waste.
Consult the Safety Data Sheet for additional information.
Instructions for Use
Follow all instructions carefully. Failure to do so may lead to inaccurate results.
Wear appropriate protective apparel and follow standard good laboratory safety practices (GLP)
2
.
Sample Enrichment
Foods
Tables 1 and 2 present guidance for test matrix samples. It is the user’s responsibility to validate alternate sampling
protocols (e.g., compositing) or dilution ratios to ensure this test method meets the user’s criteria.
For Low Microbial Load Foods:
Low microbial load foods have a total aerobic colony count of ≤ 10
4
colony forming units/gram. Examples include:
pasteurized, cooked, or processed foods.
1. Pre-warm 3M Salmonella Enrichment Base with the added 3M Salmonella Enrichment Supplement to 41.5 ± 1.0°C
(see Tables 1 and 2).
2. Aseptically combine the enrichment medium and sample. For all meat and highly particulate samples, the use of
stomacher lter bags is recommended. Homogenize thoroughly for 2 minutes. Incubate at 41.5 ± 1.0°C for 18-24
hours (see Tables 1 and 2).
4
(English)
EN
For High Microbial Load Foods:
High microbial load foods have a total aerobic colony count of > 10
4
colony forming units/gram and require the use of
Rappaport-Vassiliadis R10 (R-V R10) Broth. Examples include: raw, unprocessed foods.
1. Pre-warm 3M Salmonella Enrichment Base with the added 3M Salmonella Enrichment Supplement to 41.5 ± 1.0°C
(see Tables 1 and 2).
2. Aseptically combine the enrichment medium and sample. For all meat and highly particulate samples, the use of
stomacher lter bags is recommended. Homogenize thoroughly for 2 minutes. Incubate at 41.5 ± 1.0°C for 18-24
hours (see Tables 1 and 2).
3. After primary enrichment incubation, transfer 0.1 mL of the primary enrichment into 10.0 mL Rappaport-Vassiliadis
R10 (R-V R10) Broth. Incubate at 41.5 ± 1.0°C for 8-24 hours.
Environmental samples
For sample collection, use a biocide-free cellulose sponge hydrated with Dey-Engley (D/E) Neutralizing Broth. Following
user established procedures, remove any remaining D/E Neutralizing Broth residue from the sampled surface.
The recommended size of the sampling area to verify the presence or absence of the pathogen on the surface is 100 cm
2
(10 cm x 10 cm or 4 in. x 4 in.)
5
. When sampling with a sponge, cover the entire area going in two directions (left to right
then up and down).
1. Pre-warm 3M Salmonella Enrichment Base with the added 3M Salmonella Enrichment Supplement to 41.5 ± 1.0°C
(see Tables 1 and 2).
2. Aseptically combine the enrichment medium and sample. Mix thoroughly. Incubate at 41.5 ± 1.0°C for 18-24 hours.
3. If the environmental sample has a high microbial load (total aerobic colony count of > 10
4
colony forming
units/sample), then after primary enrichment incubation, transfer 0.1 mL of the primary enrichment into 10.0 mL
Rappaport-Vassiliadis R10 (R-V R10) Broth. Incubate at 41.5 ± 1.0°C for 8-24 hours.
4. If the environmental sample has a low microbial load (total aerobic colony count of ≤ 10
4
colony forming
units/sample), then step 3 can be skipped.
AOAC® Ocial Method of Analysis
SM
(OMA) 2014.01
AOAC® Performance Tested
SM
(PTM) Certicate #061301
In AOAC Research Institute OMA
SM
and PTM
SM
studies, the 3M Petrilm SALX System was found to be an eective
method for the detection of Salmonella. The matrices tested in these studies are shown in Table 1. The limit of detection
of the 3M Petrilm SALX System method is 1-5 colony forming units per validated test portion size (in Table 1).
5
(English)
EN
Table 1: Sample Enrichment Protocols according to AOAC OMA
SM
2014.01 and AOAC PTM
SM
Certicate #061301
Test
Matrix
High
Microbial
Load
Sample
Size
Primary Enrichment Secondary Enrichment
Enrichment
Volume
(mL)
Temperature
(±1.0°C)
Enrichment
Time (hour)
Enrichment
Medium
Temperature
(±1.0°C)
Enrichment
Time (hour)
Raw
ground
beef, raw
ground
pork, raw
ground
chicken
✓ 25 g 225
41.5 18-24
R-V R10
Broth:
0.1 mL into
10.0 mL
41.5 8-24
Frozen,
uncooked
shrimp
✓ 25 g 225
R-V R10
Broth:
0.1 mL into
10.0 mL
41.5 8-24
Pasteur-
ized liquid
whole egg
100 g 900
Not required for low microbial load
foods.
Dry dog
food
375 g 3375
Not required for low microbial load
foods.
Fresh,
bunched
spinach
✓ 25 g 225
R-V R10
Broth:
0.1 mL into
10.0 mL
41.5 24
Environ-
mental –
stainless
steel
surface
(100 cm
2
sample
size)
1
Sponge
225
Not required for low microbial load
samples.
Cooked
chicken
nuggets
25 g 225
6
(English)
EN
For other matrices:
Table 2: Sample Enrichment Protocols
Test
Matrix
High
Microbial
Load
Sample
Size
Primary Enrichment Secondary Enrichment
Enrichment
Volume
(mL)
Temperature
(±1.0°C)
Enrichment
Time (hour)
Enrichment
Medium
Temperature
(±1.0°C)
Enrichment
Time (hour)
Foods:
Raw
Meat,
Poultry,
Seafood
and Fish
✓ 25 g 225
41.5
18-24
R-V R10
Broth:
0.1 mL into
10.0 mL
41.5 8-24
Animal
Feed
375 g 3375
Not required for low microbial load
foods.
Foods:
Produce
✓ 25 g 225
R-V R10
Broth:
0.1 mL into
10.0 mL
41.5 8-24
Environ-
mental
*
1
Sponge
225
Not required for low microbial load
samples.
Other
Foods
*
Follow appropriate
reference method
for sample size and
enrichment volume
* Some environmental and other food samples may have a high microbial load and require the use of R-V R10 secondary
enrichment.
Plate Hydration
1. Use prescribed sterile diluents to hydrate the 3M Petrilm SALX Plates:
Buttereld’s Phosphate Diluent, distilled water, or reverse osmosis water.
2. Place the 3M Petrilm SALX Plate on a at, level surface (gure A).
3. Lift the top lm and with the pipette perpendicular dispense 2.0 mL ± 0.1 mL of sterile diluent onto the center of
bottom lm (gure B). Do not close the top lm before dispensing the entire 2.0 mL volume.
4. Gently roll down the top lm onto the diluent to prevent trapping air bubbles (gure C).
5. Place the 3M™ Petrilm™ Flat Spreader (Catalog #6425) on the center of the plate. Press gently on the center of
the spreader to distribute the diluent evenly. Spread the diluent over the entire 3M Petrilm SALX Plate growth area
before the gel is formed. Do not slide the spreader across the lm (gure D).
6. Remove the spreader and do not disturb the 3M Petrilm SALX Plate for at least 1 minute.
7. Place 3M Petrilm SALX Plate on a at surface for at least 1 hour at room temperature (20-25°C / <60% RH),
protected from light, to allow the gel to form. Hydrated 3M Petrilm SALX Plates can be stored at room temperature
(20-25°C / <60% RH) protected from light, for up to 8 hours before use. If hydrated 3M Petrilm SALX Plates will
not be used within 8 hours, store them in a sealed plastic bag. Protect 3M Petrilm SALX Plates from light and store
at -20 to -10°C for up to 5 days.
8. After 3M Petrilm SALX Plates are removed from storage, allow them to warm to room temperature before use.
Plate Inoculation
1. Remove the enrichment medium from the incubator and agitate contents by hand.
2. Use a sterile 10 µL loop (3 mm diameter) to withdraw each sample. Use a smooth loop (one that does not have
jagged edges and is not distorted) to prevent the gel surface from breaking.
3. Open the 3M Petrilm SALX Plate and streak onto the gel (gure E). Perform a single streak to obtain isolated
colonies (Figure 1).
7
(English)
EN
This artwork has been
created as requested by 3M.
3M is responsible for the
artwork AS APPROVED and
assumes full responsibility
for its correctness.
Requester: Susan Barker
Creator: deZinnia
File Name: 14517_streak pattern_FS.ai
Structure #: Illustration
Supersedes: NA
Date: 10/16/12
Scale:
1 Inch
Inicio
Final
Figure 1: Streaking pattern on the 3M Petrilm SALX Plate
4. Roll down the top lm to close the 3M Petrilm SALX Plate.
5. Using a gloved hand (while practicing good laboratory practices to avoid cross contamination and/or direct contact
with the plate), gently apply a sweeping motion with even pressure onto the top lm to remove any air bubbles in the
inoculation area (gure F).
Plate Incubation
Incubate plates at 41.5 ± 1.0°C for 24 hours ± 2 hours in a horizontal position with the colored side up in stacks of no
more than 20 plates.
Interpretation
1. Remove the 3M Petrilm SALX Plates from the incubator and proceed with visually reading the results.
2. Using indirect back lighting may enhance reading of colony color, discrete yellow zones, and gas bubbles
associated with a colony.
3. For interpretation, visually examine the isolated colonies. See Table 3. Do not count artifact bubbles that may be
present.
4. Presumptive positive Salmonella species are red to brown colonies with a yellow zone or associated gas bubble, or
both (gure G). An associated gas bubble is dened as being located within one colony diameter distance from the
colony (see Table 3 below).
Table 3: Interpretation for Presumptive Positive Salmonella species
Colony Color Colony Metabolism
Result
Red
Dark
Red
Brown
Yellow
zone
Gas bubble
✓ ✓ Presumptive +
✓ ✓ Presumptive +
✓ ✓ ✓ Presumptive +
✓ ✓ Presumptive +
✓ ✓ Presumptive +
✓ ✓ ✓ Presumptive +
✓ ✓ Presumptive +
✓ ✓ Presumptive +
✓ ✓ ✓ Presumptive +
Non-Salmonella species (gure H):
• Blue colonies, green colonies, blue to green colonies, and/or black colonies with or without a yellow zone and/or
associated gas bubble are non-Salmonella organisms.
• Red, dark red, and brown colonies with no yellow zone and no associated gas are non-Salmonella organisms.
• Red, dark red, and brown colonies with a magenta zone are non-Salmonella organisms.
8
(English)
EN
If presumptive positive Salmonella colonies are not present, then Salmonella organisms were not detected in the matrix.
Presumptive Salmonella species:
If presumptive positive Salmonella colonies are present, then perform the following steps and continue to the
Biochemical Conrmation step:
a. On the 3M Petrilm SALX Plate top lm, circle a minimum of ve isolated presumptive positive Salmonella
colonies (if present) using a permanent, ultra ne tip marker (gure I).
b. Biochemically conrm all Salmonella presumptive positive results using the 3M Petrilm SALX Conrmation
Disk. See the Biochemical Conrmation section.
c. If the 3M Petrilm SALX Plates cannot be analyzed within 1 hour of removal from the incubator, rst circle the
presumptive Salmonella colonies on the top lm by using a permanent, ultra ne tip marker and then place
the plates in a sealed plastic bag for later analysis. Protect 3M Petrilm SALX Plates from light and store at -20
to -10°C for no longer than 72 hours. Allow plates to warm to room temperature (20-25°C / <60% RH) before
adding the disk to the plate.
WARNING: To reduce the risks associated with a false-negative result leading to the release of contaminated
product and the possibility of false positive results requiring a retest, always use a permanent, ultra ne tip marker
to circle the characteristic presumptive Salmonella colonies on the top lm of the 3M Petrilm SALX Plate before
appropriate storage of the plate and/or before placing the 3M Petrilm SALX Conrmation Disk onto the gel.
Biochemical Conrmation
1. Perform good laboratory practices to avoid cross contamination and/or direct contact with the 3M Petrilm SALX
Plate and/or 3M Petrilm SALX Conrmation Disk.
2. Remove an individually packaged 3M Petrilm SALX Conrmation Disk from its pouch and allow it to come to
room temperature (20-25°C / <60% RH). Then remove the 3M Petrilm SALX Conrmation Disk from its individual
package by peeling the package to expose the 3M Petrilm SALX Conrmation Disk’s tab, grasping the tab, and
removing the 3M Petrilm SALX Conrmation Disk.
3. Lift the top lm (with the already circled presumptive Salmonella colonies) of the 3M Petrilm SALX Plate and insert
the 3M Petrilm SALX Conrmation Disk by rolling it onto the gel to avoid entrapping air bubbles (gure J). Close
the 3M Petrilm SALX Plate.
4. Using a gloved hand, gently apply a sweeping motion with even pressure onto the top lm to remove any air bubbles
in the inoculation area and assure good contact between the gel and the 3M Petrilm SALX Conrmation Disk
(gure K).
5. Incubate the 3M Petrilm SALX System (plate and disk) at 41.5 ± 1.0°C for 4 - 5 hours in a horizontal position, right
side up, no higher than 20 plates.
6. Remove the 3M Petrilm SALX System from the incubator and proceed with reading the results.
Only read the circled presumptive Salmonella colonies (See Table 4):
Table 4: Interpretation of 3M Petrilm SALX System:
Colony Color Biochemical
Conrmation Result
Green to Blue Blue to Dark Blue Black
✓
Biochemically
Conrmed +
✓
Biochemically
Conrmed +
✓
Biochemically
Conrmed +
Biochemically conrmed positive results:
• Colonies that are green to blue, blue to dark blue, or black or have a blue precipitate around them are biochemically
conrmed positive for Salmonella species.
Biochemically conrmed negative results:
• Colonies that remain the same red, dark red or brown color without a blue precipitate are negative for Salmonella
species.
9
(English)
EN
7. Colonies may be subcultured for further identication. When subculturing, wear appropriate protective apparel and
follow standard good laboratory safety practices (GLP)
2
.
a. Lift the top lm and aseptically remove the colony either from the gel or the 3M Petrilm SALX Conrmation
Disk. If a 3M Petrilm SALX Conrmation Disk is covering the gel, aseptically peel the disk away and then
aseptically remove the colony from the gel.
b. Streak the colony per appropriate reference method
6, 7, 8
.
8. If the colonies cannot be subcultured within 1 hour of plate removal from the incubator, then store the 3M Petrilm
SALX Plates for later analysis by placing in a sealed plastic bag at -20 to -10°C for no longer than 72 hours in the
dark. Allow 3M Petrilm SALX Plates to warm to room temperature (20-25°C / <60% RH) before continuing
subculturing for identication.
9. After the test is complete, dispose of the 3M Petrilm SALX Plates and 3M Petrilm SALX Conrmation Disks in
accordance with current industry standards and/or local regulations.
For further information refer to the 3M™ Petrilm™ Salmonella Express System “Interpretation Guide.” If you have
questions about specic applications or procedures, please visit our website at www.3M.com/foodsafety or contact
your local 3M representative or distributor.
References
1. McDonough P.L, et al. (2000). Diagnostic and Public Health Dilemma of Lactose-Fermenting Salmonella enterica
Serotype Typhimurium in Cattle in the Northeastern United States. J. Clin. Microbiol. 38:1221-1226.
2. U.S. Food and Drug Administration. Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58. Good Laboratory Practice for
Nonclinical Laboratory Studies.
3. ISO/IEC 17025:2017. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
4. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stus – General requirements and guidance for microbiological
examinations.
5. ISO 18593:2004. Microbiology of food and animal feeding stus – Horizontal methods for sampling techniques
from surfaces using contact plates and swabs.
6. US Food and Drug Administration Bacteriological Analytical Manual. Chapter 5 Salmonella.
7. US Department of Agriculture (USDA) Microbiology Laboratory Guidebook 4.09. Isolation and Identication of
Salmonella from Meat, Poultry, Pasteurized Egg, and Siluriformes (Fish) Products and Carcass and Environmental
Sponges.
8. ISO 6579-1:2017. Microbiology of the food chain – Horizontal method for the detection, enumeration and serotyping
of Salmonella – Part 1: Detection of Salmonella spp.
Refer to the current versions of the standard methods listed above.
Explanation of Symbols
www.3M.com/foodsafety/symbols
3M Health Care
2510 Conway Ave
St. Paul, MN 55144 USA
www.3M.com/foodsafety
© 2018, 3M. All rights reserved.
3M and Petrilm are trademarks of 3M. Used under license in Canada.
34-8722-5979-0
3
3M Food Safety
3M United States
3M Center
Bldg. 275-5W-05
St. Paul, MN 55144-1000
USA
1-800-328-6553
3M Canada
Post Oce Box 5757
London, Ontario N6A 4T1
Canada
1-800-563-2921
3M Latin America
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Bldg. 275-5W-05
St. Paul, MN 55144-1000
USA
1-954-340-8263
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3M Deutschland GmbH
Carl-Schurz-Strasse 1
D41453 Neuss/Germany
+49-2131-14-3000
3M United Kingdom PLC
Morley Street, Loughborough
Leicestershire
LE11 1EP
United Kingdom
+(44) 1509 611 611
3M Österreich GmbH
Euro Plaza
Gebaude J, A-1120 Wien
Kranichberggasse 4
Austria
+(43) 1 86 686-0
3M Asia Pacic
No 1, Yishun Avenue 7
Singapore, 768923
65-64508869
3M Japan
3M Health Care Limited
6-7-29, Kita-Shinagawa
Shinagawa-ku, Tokyo
141-8684 Japan
81-570-011-321
3M Australia
Bldg A, 1 Rivett Road
North Ryde, NSW 2113
Australia
61 1300 363 878
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(Español)
ES
Fecha de emisión: 2018-03
Instrucciones del Producto
Sistema Salmonella Express
Descripción del producto y uso previsto
El Sistema 3M™ Petrilm™ Salmonella Express (SALX) se utiliza para la detección cualitativa rápida y la conrmación
bioquímica de especies de Salmonella en muestras ambientales de alimentos enriquecidos y del proceso de
alimentación. El Sistema 3M Petrilm SALX consiste en la Base enriquecida de 3M™ Salmonella, el Suplemento
enriquecido de 3M™ Salmonella, la Placa 3M™ Petrilm™ Salmonella Express (SALX) y el Disco de Conrmación
3M™ Petrilm™ Salmonella Express (SALX), que están todos envasados por separado.
La Placa 3M Petrilm SALX es un sistema de medio de cultivo cromogénico de muestra lista para usar que contiene un
agente gelicante soluble en agua fría y es selectivo y diferencial para la Salmonella, lo que proporciona un resultado
presunto. El Disco de Conrmación 3M Petrilm SALX contiene un sustrato bioquímico que facilita la conrmación
biológica de organismos de Salmonella.
La Placa 3M Petrilm SALX se utiliza con o sin el Disco de Conrmación 3M Petrilm SALX. El Disco de Conrmación
3M Petrilm SALX se puede utilizar solo en conjunto con la Placa 3M Petrilm SALX.
El Sistema 3M Petrilm SALX está previsto para el uso en laboratorios por profesionales capacitados en el empleo de
técnicas de laboratorio. 3M no documentó el uso de este producto en otras industrias que no sean la alimentaria. Por
ejemplo, 3M no documentó este producto para el análisis de muestras de agua, farmacéuticas, cosméticas, clínicas o
veterinarias. El Sistema 3M Petrilm SALX no ha sido evaluado con todos los posibles productos alimenticios, procesos
alimenticios y entornos de procesamiento de alimentos, protocolos de prueba ni con todas las cepas de bacterias
posibles, y puede que no detecte todas las cepas de Salmonella. 3M no ha validado el Sistema 3M Petrilm SALX
utilizando muestras compuestas.
Como con todos los métodos de prueba, la formulación del medio de enriquecimiento puede inuir en los resultados.
La Placa 3M Petrilm SALX solo ha sido evaluada para utilizar con la Base de enriquecimiento 3M Salmonella, el
Suplemento de enriquecimiento 3M Salmonella y con el caldo Rappaport-Vassiliadis R10 (R-V R10) (la formulación típica
del caldo R-V R10 que aparece a continuación):
Fórmula típica
Cloruro magnésico (anhidro) 13,4gramos
Cloruro de sodio 7,2gramos
Peptona caseína 4,54gramos
Fosfato monopotasio 1,45gramos
Verde de malaquita 0,036gramos
Agua desmineralizada 1000,0 mL
pH 5,1 ± 0,2 @ 25°C
Ajuste el PH según sea necesario para reunir los estándares de rendimiento.
Los componentes de la Placa 3M Petrilm SALX y el Disco de Conrmación 3M Petrilm SALX están descontaminados,
aunque no esterilizados. 3M Food Safety cuenta con certicación de la Organización Internacional para la
Estandarización (ISO) 9001 de diseño y fabricación. La Placa 3M Petrilm SALX y el Disco de Conrmación 3M Petrilm
SALX no han sido evaluados con todos los productos alimenticios, procesos alimenticios, protocolos de prueba posibles,
ni con todas las posibles cepas de microorganismos.
Seguridad
El usuario debe leer, comprender y respetar toda la información de seguridad que se incluye en las instrucciones del
Sistema 3M Petrilm SALX. Guarde las instrucciones de seguridad para consultas futuras.
ADVERTENCIA: Indica una situación peligrosa que, si no se evita, podría ocasionar la muerte o lesiones graves,
y/o daños materiales.
ATENCIÓN: Indica una situación potencialmente peligrosa que, si no se evita, podría ocasionar
daños materiales.
2
(Español)
ES
W ADVERTENCIA
No utilice el Sistema 3M Petrilm SALX para diagnosticar enfermedades de humanos o animales.
El Sistema 3M Petrilm SALX no diferenciará de manera especíca algunos casos de Salmonella sp. lactosa positiva
(principalmente S. arizonae y S. diarizonae) de otros organismos de lactosa positiva. Las cepas de Salmonella lactosa
positiva aparecerán como no-Salmonella (colonias azules, colonias verdes, colonias azules a verdes o colonias
negras con o sin zonas amarillas o burbujas de gas asociadas). Se ha establecido que estas cepas signican menos
del 1% del total de los estereotipos de Salmonella
1
.
El usuario debe capacitar a su personal en las técnicas de evaluación adecuadas, por ejemplo, las Buenas Prácticas
de Laboratorio
2
o ISO 17025
3
o ISO 7218
4
.
Para reducir los riesgos asociados con un resultado falso negativo que provoque la liberación de productos
contaminados o la posibilidad de resultados falsos positivos que necesiten una nueva prueba:
• Luego del uso de cada placa, controle que la Placa 3M Petrilm Salmonella Express hidratada en busca de alguna
decoloración del gel.
• No utilice la Placa 3M Petrilm Salmonella Express con alguna decoloración.
• Utilice siempre el Sistema 3M Petrilm SALX antes de la fecha de vencimiento.
• Utilice el Sistema 3M Petrilm SALX con muestras de alimentos y muestras ambientales del proceso alimenticio que
hayan sido validadas por el usuario o por un tercero.
• Utilice el Sistema 3M Petrilm SALX solo con supercies, soluciones amortiguadoras neutralizantes y protocolos
que hayan sido validados por el usuario o por un tercero.
• Almacene el Sistema 3M Petrilm SALX como se indica en el embalaje y en las instrucciones del producto.
• Siga los procedimientos y realice las pruebas exactamente como se indica en las instrucciones del producto.
• Utilice siempre un marcador permanente de punta ultrana para encerrar las colonias de Salmonella presuntas
características en la supercie de la película colocando antes el Disco de Conrmación 3M Petrilm SALX sobre
el gel.
Para reducir los riesgos asociados con la exposición a productos químicos y riesgos biológicos:
• Realice las pruebas de patógenos en un laboratorio debidamente equipado, bajo la supervisión de
personal capacitado.
• Siempre proceda de acuerdo con las prácticas estándar de seguridad del laboratorio (GLP)
2
, lo que incluye usar
procedimientos de contención correctos, ropa de protección adecuada y protección para los ojos al manipular los
materiales de prueba y las muestras de la prueba.
• Evite el contacto directo con los contenidos del medio enriquecido y las placas inoculadas.
• Deseche el medio enriquecido y las placas inoculadas según todas las normativas regulatorias y gubernamentales,
y usando los procedimientos de laboratorio correspondientes.
• Utilice ropa de protección adecuada al manipular la Placa 3M Petrilm SALX, ya que algunos de los componentes
pueden ser alergénicos e irritantes para algunas personas.
Para reducir los riesgos relacionados con la contaminación ambiental:
• Proceda de acuerdo con las normas de la industria y la normativa local actuales para el desecho de
residuos contaminados.
ATENCIÓN
El Sistema 3M Petrilm SALX no diferencia ninguna cepa de Salmonella de otra.
Consulte la Hoja de Datos de Seguridad para obtener más información.
Si desea obtener información sobre la documentación del desempeño del producto, visite nuestro sitio web en
www.3M.com/foodsafety o comuníquese con su representante o distribuidor local de 3M.
Responsabilidad del usuario
Los usuarios son responsables de familiarizarse con las instrucciones e información del producto. Visite nuestro sitio
web en www.3M.com/foodsafety o póngase en contacto con su representante o distribuidor local de 3M para obtener
más información.
Al seleccionar un método de prueba, es importante reconocer que factores externos tales como los métodos de
muestreo, los protocolos de prueba, la preparación de la muestra, la manipulación y la técnica de laboratorio pueden
afectar los resultados.
3
(Español)
ES
Al seleccionar cualquier método de prueba o producto, es responsabilidad del usuario evaluar un número suciente de
muestras con retos microbianos y matrices apropiadas para satisfacer al usuario en cuanto a que el método de prueba
cumple con los criterios necesarios.
Además, es responsabilidad del usuario determinar que cualquier método de prueba y sus resultados cumplen con los
requisitos de sus clientes y proveedores.
Como sucede con cualquier método de prueba, los resultados obtenidos del uso de cualquier producto de
3M Food Safety no constituyen una garantía de calidad de las matrices ni de los procesos analizados.
Limitación de garantía/Recurso limitado
SALVO LO EXPRESAMENTE ESTIPULADO EN UNA SECCIÓN DE GARANTÍA LIMITADA O EN EL EMBALAJE DE
UN PRODUCTO ESPECÍFICO, 3M RENUNCIA A TODAS LAS GARANTÍAS EXPRESAS Y TÁCITAS INCLUIDA, ENTRE
OTRAS, CUALQUIER GARANTÍA DE COMERCIABILIDAD O IDONEIDAD PARA UN USO EN PARTICULAR. Si un
producto de 3M Food Safety es defectuoso, 3M o su distribuidor autorizado reemplazará el producto o reembolsará
el precio de compra del producto, a su elección. Estos son sus recursos exclusivos. Deberá noticar inmediatamente a
3M en un lapso de sesenta días a partir del descubrimiento de cualquier sospecha de defecto en un producto y devolver
dicho producto a 3M. Llame a Atención al Cliente (1-800-328-1671 en los EE.UU.) o a su representante ocial de
3M Food Safety para obtener una Autorización de devolución de productos.
Limitación de responsabilidad de 3M
3M NO SERÁ RESPONSABLE DE NINGUNA PÉRDIDA O DAÑO, YA SEA DIRECTO, INDIRECTO, ESPECIAL,
DAÑOS ACCIDENTALES O CONSECUENCIAS, INCLUIDOS ENTRE OTROS, LA PÉRDIDA DE BENEFICIOS. En
ningún caso la responsabilidad de 3M conforme a ninguna teoría legal excederá el precio de compra del producto
supuestamente defectuoso.
Almacenamiento
Almacenamiento de la placa
Luego de la recepción, almacene las bolsas de Placa 3M Petrilm SALX cerradas en un ambiente de 2 a 8ºC. Son
sensibles a la humedad y la luz. Antes de usarlas, deje que las bolsas cerradas alcancen la temperatura ambiente antes
de abrirlas (20°C-25°C/<60% de humedad relativa). Vuelva a colocar las Placas 3M Petrilm SALX que no haya
usado en la bolsa. Para evitar la exposición a la humedad, almacene las bolsas de Placa 3M Petrilm SALX abiertas en
una bolsa sellada, protegida contra la luz, en un ambiente de -20°C a -10°C durante no más de 4semanas.
Almacenamiento del Disco de conrmación
Los Discos de Conrmación 3M Petrilm SALX están embalados por separado dentro de una bolsa de aluminio. Son
sensibles a la humedad y la luz. Almacene las bolsas cerradas de los Discos de Conrmación 3M Petrilm SALX en un
ambiente de 2ºC a 8ºC. Saque solo los Discos de Conrmación 3M Petrilm SALX embalados por separado que se
utilizarán inmediatamente y almacene los Discos de Conrmación 3M Petrilm SALX restantes en la bolsa de aluminio
doblando el extremo de la bosa y colocando cinta adhesiva. Para evitar la exposición a la humedad, no refrigere las
bolsas abiertas del Disco de Conrmación 3M Petrilm SALX. Almacene las bolsas reselladas en un lugar frío
(20°C-25°C) y seco (menos del 60% de humedad relativa) durante no más de 4semanas o coloque las bolsas
reselladas en una bolsa de almacenamiento resellable y almacene en un ambiente de -20°C a -10°C durante no más de
5meses.
No use las Placas 3M Petrilm SALX que presenten decoloración después de la hidratación. No use los Discos de
Conrmación 3M Petrilm SALX que presenten decoloración. La fecha de vencimiento y el número de lote guran en
cada paquete de Placas 3M Petrilm SALX y Discos de Conrmación 3M Petrilm SALX. El número de lote también se
anota en las placas individuales y en los paquetes de discos de conrmación individuales.
Desecho
Después del uso, las Placas 3M Petrilm SALX y los Discos de Conrmación 3M Petrilm SALX que pueden representar
un posible riesgo biológico. Proceda de acuerdo con las normas de la industria y la normativa local actuales para el
desecho de residuos contaminados. Consulte la Hoja de Datos de Seguridad para obtener más información.
Instrucciones de uso
Siga todas las instrucciones atentamente. De lo contrario, los resultados obtenidos podrían llegar a ser incorrectos.
Use la ropa de protección adecuada y respete las buenas prácticas de seguridad de laboratorio (GLP) estándares
2
.
4
(Español)
ES
Enriquecimiento de la muestra
Alimentos
Las tablas 1 y 2 ofrecen orientación para las muestras matrices de prueba. Es responsabilidad del usuario validar
protocolos de muestreo (p.ej., composición) o proporciones de dilución alternativos para garantizar que este método de
prueba satisface los criterios del usuario.
Para los alimentos de baja carga microbiana:
Los alimentos de baja carga microbiana tienen un recuento total de colonias de bacterias aerobias de f≤10
4
que forma
unidades/gramos. Los ejemplos incluyen alimentos pasteurizados, cocidos o procesados.
1. Base enriquecida 3M Salmonella precalentada con Suplemento enriquecido 3M Salmonella de 41,5 ± 1,0°C
(Consulte las Tablas 1 y 2).
2. Combine el medio de enriquecimiento y la muestra de forma aséptica. Para todas las muestras con alto contenido
de partículas y carne, se recomienda utilizar bolsas con ltro Stomacher. Homogenice bien durante 2minutos.
Encube a 41,5°C ± 1,0°C durante 18-24horas (consulte las Tablas 1 y 2).
Para los alimentos de alta carga microbiana:
Los alimentos de alta carga microbiana tienen un recuento total de colonias de bacterias aerobias de >10
4
colonias
que forman unidades/gramos y requiere el uso de caldo Rappaport-Vassiliadis R10 (R-V R10). Los ejemplos incluyen
alimentos crudos, no procesados.
1. Base enriquecida 3M Salmonella precalentada con Suplemento enriquecido 3M Salmonella de 41,5 ± 1,0°C
(Consulte las Tablas 1 y 2).
2. Combine el medio de enriquecimiento y la muestra de forma aséptica. Para todas las muestras con alto contenido
de partículas y carne, se recomienda utilizar bolsas con ltro Stomacher. Homogenice bien durante 2minutos.
Encube a 41,5°C ± 1,0°C durante 18-24horas (consulte las Tablas 1 y 2).
3. Después de la primera incubación enriquecida, transera 0,1mL del enriquecimiento principal a 10,0mL de caldo
Rappaport-Vassiliadis R10 (R-V R10). Incube a una temperatura de 41,5°C±1,0°C durante 8-24horas.
Muestras ambientales
Para la recolección de muestras, utilice una esponja de celulosa libre de biocidas hidratada con el caldo neutralizante
Dey-Engley (D/E). Siguiendo los procedimientos establecidos para el usuario, quite cualquier residuo de caldo
neutralizante D/E restante de la supercie muestreada.
El tamaño recomendado del área de muestra para vericar la presencia o ausencia del patógeno en la supercie es de
100cm
2
(10cm x 10cm o 4in. x 4in.)
5
. Cuando se extraiga la muestra con una esponja, cubra toda el área moviéndose
en dos direcciones (de izquierda a derecha y luego de arriba a abajo).
1. Base enriquecida 3M Salmonella precalentada con Suplemento enriquecido 3M Salmonella de 41,5 ± 1,0°C
(Consulte las Tablas 1 y 2).
2. Combine el medio de enriquecimiento y la muestra de forma aséptica. Mezcle bien. Incube a una temperatura de
41,5°C±1,0°C durante 18-24horas.
3. Si la muestra ambiental contiene una carga microbiana alta (conteo total de colonias de bacterias aerobias de
>10
4
colonias que forman unidades/muestra), después de la primera incubación enriquecida, transera 0,1mL del
enriquecimiento principal a 10,0mL de caldo Rappaport-Vassiliadis R10 (R-V R10). Incube a una temperatura de
41,5°C±1,0°C durante 8-24horas.
4. Si la muestra ambiental contiene una carga microbiana baja (conteo total de colonias de bacterias aerobias de
≤10
4
colonias que forman unidades/muestras), se puede saltear el paso3.
5
(Español)
ES
AOAC® Ocial Method of Analysis
SM
(OMA) 2014.01
AOAC® Performance Tested
SM
(PTM) Certicado 061301
En los estudios de AOAC Research Institute OMA
SM
y PTM
SM
, se descubrió que el Sistema 3M Petrilm SALX era un
método efectivo para la detección de Salmonella. Las matrices evaluadas en estos estudios se muestran en la Tabla 1. El
límite de detección del método del Sistema 3M Petrilm SALX es de 1-5 colonias que forman unidades por tamaño de
parte de prueba validada (en la Tabla1).
Tabla1: Protocolos de Enriquecimiento de la muestra según AOAC OMA
SM
2014.01 y AOAC PTM
SM
Certicado 061301
Matriz
de prueba
Alta
cara
micro-
biana
Tamaño
de la
muestra
Enriquecimiento primario Enriquecimiento secundario
Volumen de
enriqueci-
miento (mL)
Temperatura
(±1,0°C)
Tiempo de
enriqueci-
miento
(horas)
Medio de
enriqueci-
miento
Tempe-
ratura
(±1,0°C)
Tiempo de
enriqueci-
miento
(horas)
Carne de res
molida cruda,
carne de
cerdo molida
cruda, carne
de pollo
molida cruda
✓ 25g 225
41,5 18-24
Caldo
R-V R10:
0,1 mL en
10,0mL
41,5 8-24
Camarones
congelados,
sin cocinar
✓ 25g 225
Caldo
R-V R10:
0,1 mL en
10,0mL
41,5 8-24
Huevo entero
líquido
pasteurizado
100g 900
No se requiere para los alimentos de
baja carca microbiana.
Comida seca
para perros
375g 3375
No se requiere para los alimentos de
baja carca microbiana.
Racimo de
espinaca
fresca
✓ 25g 225
Caldo
R-V R10:
0,1 mL en
10,0mL
41,5 24
Ambiental:
supercie
de acero
inoxidable
(tamaño de
la muestra
100cm
2
)
1esponja 225
No se requiere para las muestras de
baja carga microbiana.
Pollo
empanizado
cocido
25g 225
6
(Español)
ES
Para otras matrices:
Tabla2: Protocolos Enriquecimiento de la muestra
Matriz
de prueba
Alta
cara
micro-
biana
Tamaño
de la
muestra
Enriquecimiento primario Enriquecimiento secundario
Volumen de
enriqueci-
miento (mL)
Temperatura
(±1,0°C)
Tiempo de
enriqueci-
miento
(horas)
Medio de
enriqueci-
miento
Temperatura
(±1,0°C)
Tiempo de
enriqueci-
miento
(horas)
Alimentos:
Carne
cruda,
carne
de ave,
mariscos
y pescado
✓ 25g 225
41,5
18-24
Caldo
R-V R10:
0,1mL en
10,0mL
41,5 8-24
Alimento
para
animales
375 g 3375
No se requiere para los alimentos de baja
carca microbiana.
Alimentos:
Producto
✓ 25g 225
Caldo
R-V R10:
0,1mL en
10,0mL
41,5 8-24
Ambiental * 1esponja 225
No se requiere para las muestras de baja
carga microbiana.
Otros
alimentos
*
Siga el método de
referencia adecuado
para el tamaño de la
muestra y el volumen
de enriquecimiento
* Algunas muestras ambientales y de otros alimentos pueden tener una carga microbiana alta y requieren del uso de
enriquecimiento secundario R-V R10.
Hidratación de placas
1. Use los diluyentes estériles prescritos para hidratar las Placas 3M Petrilm SALX:
Diluyente fosfato de Buttereld, agua destillada o agua por ósmosis inversa.
2. Coloque la Placa 3M Petrilm SALX sobre una supercie nivelada y plana (guraA).
3. Levante la película superior y, con la pipeta en posición perpendicular, distribuya 2,0mL ± 0,1mL de diluyente
estéril en el centro de la película inferior (guraB). No cierre la película superior antes de dispensar el volumen total
de 2,0mL.
4. Desenrolle suavemente la película superior sobre el diluyente para evitar que se formen burbujas de aire (guraC).
5. Coloque el 3M™ Petrilm™ Difusor Plano (N.º de catálogo 6425) en el centro de la Placa. Presione ligeramente
el centro del difusor para distribuir el diluyente de manera uniforme. Esparza el diluyente por toda el área de
crecimiento de la Placa 3M Petrilm SALX antes de que se forme el gel. No deslice el difusor a través de la
película (guraD).
6. Quite el difusor y no interrumpa la Placa 3M Petrilm SALX durante, al menos, 1minuto.
7. Coloque la Placa 3M Petrilm SALX en una supercie plana durante, al menos, 1hora a temperatura ambiente
(20°C-25°C / <60% de humedad relativa), protegida contra la luz, para dejar que se forme el gel. Las Placas
3M Petrilm SALX hidratadas se pueden almacenar a temperatura ambiente (20°C-25°C / <60% de
humedad relativa) protegidas contra la luz durante hasta 8horas antes del uso. Si las Placas 3M Petrilm SALX
hidratadas no se usarán dentro de las 8horas, almacénelas en una bolsa plástica sellada. Proteja las Placas
3M Petrilm SALX contra la luz y almacénelas en un ambiente de -20°C a -10°C durante hasta 5días.
8. Después de que se quiten las Placas 3M Petrilm SALX del almacenamiento, deje que alcancen la temperatura
ambiente antes del uso.
7
(Español)
ES
Inoculación de placas
1. Quite el medio de enriquecimiento de la incubadora y agite los contenidos a mano.
2. Use un asa esterilizada de 10µL (3mm de diámetro) para retirar cada muestra. Use un asa lisa (una que no tenga
bordes irregulares o torcidos) para evitar que se quiebre la supercie del gel.
3. Abra la Placa 3M Petrilm SALX y páselo por el gel (guraE). Realice una pasada única para obtener colonias
aisladas (gura1).
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Requester: Susan Barker
Creator: deZinnia
File Name: 14517_streak pattern_FS.ai
Structure #: Illustration
Supersedes: NA
Date: 10/16/12
Scale:
1 Inch
Inicio
Final
Figura1: Patrón de rayado en la Placa 3M Petrilm SALX
4. Desenrolle la película superior para cerrar la Placa 3M Petrilm SALX.
5. Usando la mano con guante (mientras ejercita buenas prácticas de laboratorio para evitar la contaminación cruzada
o el contacto directo con la placa), aplique suavemente un movimiento amplio con presión uniforme sobre la
película superior para eliminar cualquier burbuja de aire de la zona de inoculación (guraF).
Incubación de placas
Incube las Placas a 41,5 ± 1,0°C durante 24horas ± 2horas en posición horizontal, con la parte coloreada hacia arriba,
en pilas de hasta 20 placas.
Interpretación
1. Saque las Placas 3M Petrilm SALX de la incubadora y proceda con la lectura visual de los resultados.
2. Usar luz interior indirecta puede mejorar la lectura del color de la colonia, las zonas amarillas discretas y las
burbujas de gas relacionadas con una colonia.
3. Para la interpretación, examine visualmente las colonias aisladas. Consulte la Tabla 3. No cuente las burbujas del
artefacto que puedan estar presentes.
4. Las especies de Salmonella presuntamente positivas son colonias de rojo a marrón con una zona amarilla o
burbujas de gas asociadas, o con ambas características (guraG). Una burbuja de gas asociada se dene así por
estar ubicada dentro de la distancia del diámetro de una colonia desde la colonia (consulte la Tabla3 que aparece
a continuación).
8
(Español)
ES
Tabla3: Interpretación de especies de Salmonella presuntamente positivas
Color de la colonia
Metabolismo de
la colonia
Resultado
Rojo
Rojo
oscuro
Marrón
Zona
amarilla
Burbuja
de gas
✓ ✓ Presuntamente +
✓ ✓ Presuntamente +
✓ ✓ ✓ Presuntamente +
✓ ✓ Presuntamente +
✓ ✓ Presuntamente +
✓ ✓ ✓ Presuntamente +
✓ ✓ Presuntamente +
✓ ✓ Presuntamente +
✓ ✓ ✓ Presuntamente +
Especies de no-Salmonella (guraH):
• Las colonias azules, verdes, azules a verdes o negras con o sin una zona amarilla o con burbujas de gas asociadas se
consideran organismos de no-Salmonella.
• Las colonias rojas, rojo oscuro y marrones sin zona amarilla y sin gas asociado se consideran organismos
de no-Salmonella.
• Las colonias rojas, rojo oscuro y marrones con una zona magenta se consideran organismos de no-Salmonella.
Si no hay presentes colonias de Salmonella presuntamente positiva, los organismos de Salmonella no se detectaron en
la matriz.
Especies de Salmonella presunta:
Si hay presentes colonias de Salmonella presuntamente positiva, realice los siguientes pasos y continúe hasta el paso de
Conrmación bioquímica:
a. En la película superior de la Placa 3M Petrilm SALX, encierre un mínimo de cinco colonias de Salmonella
presuntamente positiva (si están presentes) usando un marcador permanente de punta ultrana (guraI).
b. Conrme bioquímicamente todos los resultados de Salmonella presuntamente positiva usando el Disco de
Conrmación 3M Petrilm SALX. Consulte la sección de Conrmación bioquímica.
c. Si las Placas 3M Petrilm SALX no se pueden analizar dentro de 1hora de la extracción de la incubadora,
encierre primero las colonias de almonella presuntas sobre la película superior usando un marcador
permanente de punta ultrana y luego coloque las placas en una bolsa plástica sellada para un análisis
posterior. Proteja las Placas 3M Petrilm SALX contra la luz y almacénelas en un ambiente de -20°C a -10°C
durante no más de 72horas. Deje que las placas alcancen la temperatura ambiente (20°C-25°C / <60% de
humedad relativa).
ADVERTENCIA: Para reducir los riesgos asociados con un resultado falso negativo que provoque la liberación de
productos contaminados y la posibilidad de resultados falsos positivos que requieran una nueva prueba, siempre use
un marcador permanente de punta ultrana para encerrar las colonias de Salmonella presunta características en la
película superior de la Placa 3M Petrilm SALX antes del almacenamiento adecuado de la placa o antes de colocar el
Disco de Conrmación 3M Petrilm SALX sobre el gel.
Conrmación bioquímica
1. Ejercite buenas prácticas de laboratorio para evitar la contaminación cruzada o el contacto directo con la
Placa 3M Petrilm SALX o el Disco de Conrmación 3M Petrilm SALX.
2. Saque de la bolsa un Disco de Conrmación 3M Petrilm SALX embalado por separado y deje que alcance la
temperatura ambiente (20°C-25°C / <60% de humedad relativa). Para sacar el Disco de Conrmación
3M Petrilm SALX de su envoltorio individual, desprenda el envoltorio para exponer la solapa del Disco de
Conrmación 3M Petrilm SALX, sujete la solapa y quite el Disco de Conrmación 3M Petrilm SALX.
9
(Español)
ES
3. Levante la película superior (con las colonias de Salmonella presunta ya encerradas) de la Placa 3M Petrilm SALX
e inserte el Disco de Conrmación 3M Petrilm SALX estirándolo sobre el gel para evitar atrapar burbujas de aire
(guraJ). Cierre la Placa 3M Petrilm SALX.
4. Usando la mano con guante, aplique suavemente un movimiento amplio con presión uniforme sobre la película
superior para eliminar cualquier burbuja de aire del área de inoculación y asegure un buen contacto entre el gel y el
Disco de Conrmación 3M Petrilm SALX (guraK).
5. Incube el Sistema 3M Petrilm SALX a 41,5°C ± 1.0°C durante 4 a 5horas en posición horizontal, hacia arriba,
en pilas de no más de 20placas.
6. Quite el Sistema 3M Petrilm SALX de la incubadora y proceda con la lectura de los resultados.
Solo lea las colonias de Salmonella presuntas que se encerraron (consulte la Tabla4):
Tabla4: Interpretación del Sistema 3M Petrilm SALX:
Color de la colonia Resultado de
conrmación
bioquímica
Verde a azul Azul a azul oscuro Negro
✓
Conrmado
bioquímicamente +
✓
Conrmado
bioquímicamente +
✓
Conrmado
bioquímicamente +
Resultados positivos conrmados bioquímicamente:
• Las colonias de color verde a azul, azul a azul oscuro o negras, o que tienen un azul precipitado a su alrededor son
conrmadas bioquímicamente conrmadas como positivas para las especies de Salmonella.
Resultados negativos conrmados bioquímicamente:
• Las colonias que mantienen el mismo color rojo, rojo oscuro o marrón sin un azul precipitado son negativas para las
especies de Salmonella.
7. Puede que las colonias se deban subcultivar para una mayor identicación. Cuando realice subcultivos, use la ropa
de protección adecuada y respete las buenas prácticas de seguridad de laboratorio (GLP) estándares
2
.
a. Levante la película superior y quite de manera aséptica la colonia del gel o del Disco de Conrmación
3M Petrilm SALX. Si un Disco de Conrmación 3M Petrilm SALX está cubriendo el gel, desprenda el disco de
manera aséptica y quite la colonia del gel de manera también aséptica.
b. Raye la colonia según el método de referencia adecuado
6, 7, 8
.
8. Si las colonias no se pueden subcultivar dentro de 1hora de haber quitado la placa de la incubadora, almacene
las Placas 3M Petrilm SALX para un análisis posterior colocándolas en una bolsa plástica sellada en un ambiente
de -20°C a -10°C durante no más de 72horas en la oscuridad. Deje que las Placas 3M Petrilm SALX alcancen
la temperatura ambiente (20°C-25°C / <60% de humedad relativa) antes de seguir con el subcultivo para
la identicación.
9. Después de que se haya completado la prueba, deseche las Placas 3M Petrilm SALX y los Discos de Conrmación
3M Petrilm SALX de acuerdo con los estándares de la industria o la normativa local.
Para obtener mayor información, consulte la "Guía de interpretación" del Sistema 3M™ Petrilm™ Salmonella Express.
Si tiene preguntas acerca de los procedimientos o las aplicaciones especícas, visite nuestro sitio web en
www.3M.com/foodsafety o comuníquese con su representante o distribuidor local de 3M.
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(Español)
ES
Referencias
1. McDonough P.L, et al. (2000). Diagnostic and Public Health Dilemma of Lactose-Fermenting Salmonella enterica
Serotype Typhimurium in Cattle in the Northeastern United States. J. Clin. Microbiol. 38:1221-1226.
2. U.S. Food and Drug Administration. Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58. Good Laboratory Practice
for Nonclinical Laboratory Studies.
3. ISO/IEC 17025:2017. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
4. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stus – General requirements and guidance for
microbiological examinations.
5. ISO 18593:2004. Microbiology of food and animal feeding stus – Horizontal methods for sampling techniques
from surfaces using contact plates and swabs.
6. US Food and Drug Administration Bacteriological Analytical Manual. Chapter 5 Salmonella.
7. US Department of Agriculture (USDA) Microbiology Laboratory Guidebook 4.09. Isolation and Identication
of Salmonella from Meat, Poultry, Pasteurized Egg, and Siluriformes (Fish) Products and Carcass and
Environmental Sponges.
8. ISO 6579-1:2017. Microbiology of the food chain – Horizontal method for the detection, enumeration and serotyping
of Salmonella – Part 1: Detection of Salmonella spp.
Consulte las versiones actuales de los métodos estándar enumerados anteriormente.
Explicación de los símbolos
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