nal von minden 252017N-05 Manual de usuario

Marca: nal von minden

Modelo: 252017N-05

Tipo: Manual de usuario

nal von minden GmbH

Carl

Zeiss

Strasse 12

47445 Moers

Germany

Moers

Tel: +49 (2841) 99820-0

Fax: +49 (2841) 99820-1

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Regensburg

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www.nal-vonminden.com

info@nal-vonminden.com

Sandra von Minden

Roland Meißner

Thomas Zander

HRB 5679

Steuer-Nr. 244/133/00130

UST-ID-Nr. DE 189 016 086

Version 1.

1, 2019-07-04

NADAL® Mononucleosis Test

(test cassette)

REF 252017N-05

Gebrauchsanweisung 2

Instructions for use 6

Instructions d’utilisation 9

Instrucciones de uso 13

Istruzioni per l’uso 17

Sposób użycia 21

Instruções de Utilização 25

Návod k použití 29

Käyttöohje 32

Användarinstruktioner 35

Bruksanvisning 38

Symbols 43

Our Teams 44

DEUTSCH

NADAL® Mononucleosis Test (Ref. 252017N-05)

nal von minden GmbH • Carl-Zeiss-Strasse 12 • 47445 Moers • Germany • [email protected] • www.nal-vonminden.com 2

1. Verwendungszweck und Anwendungsbereich

Der NADAL® Mononucleosis Test ist ein schneller, chromato-

graphischer Immunoassay für den qualitativen Nachweis von

heterophilen Antikörpern gegen Epstein-Barr-Virus (EBV) in

humanem Vollblut, Serum oder Plasma. Der Test ist als

Hilfsmittel bei der Diagnose einer infektiösen Mononukleose

(IM) bestimmt, und nur für den professionellen Gebrauch

ausgelegt.

2. Einleitung und Diagnostische Bedeutung

Infektiöse Mononukleose (IM) wird durch das Epstein-Barr-

Virus (EBV) verursacht, das zur Familie der Herpesviren gehört.

Symptome bei IM sind Fieber, Halsschmerzen und

geschwollene Lymphdrüsen. In sehr seltenen Fällen kommen

Herzprobleme oder Probleme des zentralen Nervensystems

vor. Die Diagnose von IM erfolgt auf Basis der Anwesenheit

von heterophilen anti-EBV-Antikörpern. Heterophile anti-EBV-

Antikörper gehören zur IgM-Klasse. Sie sind bei 80-90% der

akuten IM-Fälle vorhanden und können bei 60-70% der

Patienten während der ersten Woche der klinischen

Erkrankung nachgewiesen werden.

1,2,3,4

Der NADAL® Mononucleosis Test ist ein einfacher Test, der

einen Extrakt aus Rindererythrozyten verwendet, um

heterophile anti-EBV-Antikörper qualitativ und selektiv in

wenigen Minuten im Vollblut, Serum oder Plasma

nachzuweisen.

3. Testprinzip

Der NADAL® Mononucleosis Test ist ein Immunoassay im

Lateral-Flow-Format für den qualitativen Nachweis von

heterophilen Antikörpern gegen Epstein-Barr-Virus (EBV) im

Vollblut, Serum oder Plasma.

Bei diesem Test sind aus Rindererythrozyten extrahierte

Antigene im Testlinienbereich der Testkassette immobilisiert.

Während der Testung reagiert die Probe mit weiteren aus

Rindererythrozyten extrahierten Antigenen, welche auf

Partikel beschichtet und auf dem Konjugat-Pad aufgetragen

sind. Dieses Gemisch wandert chromatographisch die

Membran entlang und interagiert mit den immobilisierten

Antigenen. Wenn die Probe heterophile anti-EBV-Antikörper

enthält, erscheint eine farbige Linie im Testlinienbereich und

weist auf ein positives Ergebnis hin. Wenn die Probe keine

heterophilen anti-EBV-Antikörper enthält, wird im Testlinien-

bereich keine farbige Linie ausgebildet und damit liegt ein

negatives Ergebnis vor.

Als Verfahrenskontrolle muss im Kontrolllinienbereich immer

eine farbige Linie erscheinen, die bestätigt, dass ein

ausreichendes Probenvolumen verwendet wurde und die

Membran ausreichend durchnässt ist.

4. Bestandteile der Testpackung

 5 NADAL® Mononucleosis Testkassetten inkl. Einweg-

pipetten

 1 Puffer „Buffer“

 1 Positivkontrolle „Positive Control“ (verdünntes Human-

plasma, das heterophile anti-EBV-Antikörper enthält, 0,09%

Natriumazid)

 1 Negativkontrolle „Negative Control” (verdünntes Human-

plasma, 0,09% Natriumazid)

 1 Gebrauchsanweisung

5. Zusätzlich benötigte Materialien

 Probensammelbehälter

 Zentrifuge (nur für Serum/Plasma)

 Timer

 Lanzette (nur für Vollblut aus Fingereinstich)

 ggf. Kapillarröhrchen mit Hütchen (nur für Vollblut aus

Fingereinstich)

6. Haltbarkeit und Lagerung der Reagenzien

Test-Kits sollten bei 2-30°C gelagert und bis zum auf der

Verpackung angegebenen Verfallsdatum benutzt werden.

Testkassetten sind bis zum auf Folienbeuteln angegebenen

Verfallsdatum stabil. Testkassetten sollten bis zur Verwendung

in verschlossenen Folienbeuteln verbleiben. Frieren Sie Tests

nicht ein. Verwenden Sie die Tests nicht nach dem

Verfallsdatum.

7. Warnungen und Vorsichtsmaßnahmen

 Nur für den professionellen in-vitro-diagnostischen

Gebrauch.

 Lesen Sie die komplette Gebrauchsanweisung vor der Test-

durchführung sorgfältig durch.

 Den Test nicht nach dem auf der Verpackung angegebenen

Verfallsdatum verwenden.

 Test nicht verwenden, wenn der Folienbeutel beschädigt ist.

 Tests nicht wiederverwenden.

 Proben nicht in das Reaktionsfeld (Ergebnisfeld) geben.

 Das Reaktionsfeld (Ergebnisfeld) nicht berühren, um

Kontaminierung zu vermeiden.

 Zur Vermeidung von Kreuzkontaminationen sollte für jede

Probe ein eigener Probensammelbehälter verwendet

werden.

 Essen, trinken oder rauchen Sie nicht in dem Bereich, in

dem mit Proben und Test-Kits umgegangen wird.

 Tragen Sie beim Umgang mit Proben Schutzkleidung wie

Laborkittel, Einmalhandschuhe und Schutzbrille.

 Behandeln Sie alle Proben so, als ob sie infektiöse

Reagenzien enthielten. Beachten Sie bestehende Vorsichts-

maßnahmen für mikrobiologische Risiken während aller

Verfahren sowie Standardrichtlinien für die korrekte

Probenentsorgung.

 Dieser Test enthält Erzeugnisse tierischen Ursprungs.

Zertifizierte Kenntnisse der Herkunft und/oder des Sanitär-

zustands der Tiere gewährleisten nicht völlig die Abwesen-

heit übertragbarer Pathogene. Es wird daher empfohlen,

diese Produkte als potentiell infektiös zu betrachten und sie

gemäß den üblichen Sicherheitsvorkehrungen zu behandeln

(z.B. Verschlucken oder Einatmen vermeiden).

 Feuchtigkeit und Temperaturen können Testergebnisse

beeinträchtigen.

 Benutzte Testmaterialien sollten gemäß lokalen Vorgaben

entsorgt werden.

8. Probennahme, -vorbereitung und -lagerung

Der NADAL® Mononucleosis Test kann mit Vollblut (aus

Venenpunktur oder Fingerpunktion), Serum oder Plasma

durchgeführt werden.

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Vollblutprobenentnahme durch Venenpunktion

Sammeln Sie Blutproben mit Antikoagulanzien (Natrium- oder

Lithium-Heparin, Kalium- oder Natrium-EDTA, Natriumoxalat,

Natriumcitrat) nach Standard-Laborverfahren.

Vollblutprobenentnahme durch Fingerpunktion

Waschen Sie die Hand des Patienten mit Seife und warmem

Wasser oder säubern Sie sie mit einem Alkoholtupfer.

Lassen Sie sie trocknen.

Massieren Sie die Hand ohne dabei die vorgesehene

Einstichstelle zu berühren, indem Sie die Hand abwärts in

Richtung der Kuppe des Mittel- oder Ringfingers reiben.

Stechen Sie die Haut mit einer sterilen Lanzette. Wischen

Sie das Blutanzeichen ab.

Reiben Sie vorsichtig die Hand vom Handgelenk zur

Handfläche und zum Finger, damit sich auf dem Einstich-

punkt ein runder Tropfen bildet.

Trennen Sie Serum oder Plasma vom Blut so schnell wie

möglich, um eine Hämolyse zu vermeiden. Verwenden Sie nur

klare, nicht hämolysierte Proben.

Die Testung sollte unmittelbar nach der Probenentnahme

durchgeführt werden. Bewahren Sie Proben nicht bei

Raumtemperatur über einen längeren Zeitraum auf. Serum-

und Plasmaproben können bei 2-8°C bis zu 3 Tage gelagert

werden. Für eine längere Lagerung sollten die Proben bei

-20°C gelagert werden. Venöses Vollblut sollte bei 2-8°C

aufbewahrt werden, wenn der Test innerhalb von 2 Tagen

nach Probenentnahme durchgeführt wird. Frieren Sie die

Vollblutproben nicht ein. Vollblutproben aus Fingerpunktion

sollten unverzüglich getestet werden. Bringen Sie Proben vor

der Testdurchführung auf Raumtemperatur. Eingefrorene

Proben sollten vor Testdurchführung vollständig aufgetaut

und gut gemischt werden. Proben sollten nicht wiederholt

eingefroren und aufgetaut werden. Wenn Proben versendet

werden sollen, sollten diese gemäß Bundesverordnungen für

ätiologische Mittel verpackt werden.

9. Testdurchführung

Bringen Sie alle Tests, Puffer, Proben und/oder Kontrollen

vor der Testdurchführung auf Raumtemperatur (15-30°C).

1. Entnehmen Sie die Testkassette dem verschlossenen

Folienbeutel und legen Sie sie auf eine saubere und ebene

Oberfläche. Die Testkassette muss unverzüglich nach der

Öffnung des Folienbeutels verwendet werden. Kenn-

zeichnen Sie die Testkassette mit der Patienten- oder

Kontrollidentifikation.

2. a) Für Serum- oder Plasmapro-

ben:

Halten Sie die Pipette senkrecht

und geben Sie 1 Tropfen (ca.

25 μL) Serum oder Plasma in die

Probenvertiefung (S) der Testkas-

sette.

b) Für Vollblutproben aus Venen-

punktion

Halten Sie die Pipette senkrecht

und geben Sie 2 Tropfen (ca.

50 μL) Vollblut in die Probenver-

tiefung (S) der Testkassette.

c) Für Vollblutproben aus Finger-

punktion

Entnehmen Sie mit der Kapillare eine

Blutprobe bis sich das Kapillarröhr-

chen etwa mit ca. 50 μL Blut gefüllt

hat. Vermeiden Sie Luftblasen. Stül-

pen Sie das Hütchen über das obere

Ende des Kapillarröhrchens und

drücken Sie es, um die Vollblutprobe

in die Probenvertiefung (S) der Test-

kassette zu geben.

3. Halten Sie das Pufferfläschchen

senkrecht und geben Sie 1 Tropfen

(ca. 55 μL) Puffer hinzu.

4. Starten Sie den Timer.

5. Warten Sie darauf, dass die farbige(n)

Linie(n) erscheint/en. Werten Sie das

Ergebnis nach 5 Minuten aus. Nach

mehr als 10 Minuten keine Ergebnisse

mehr auswerten.

10. Testauswertung

Positiv

Zwei farbige Linien erscheinen auf der

Membran. Eine Linie erscheint im

Kontrolllinienbereich (C), die andere

Linie erscheint im Testlinienbereich (T).

Hinweis:

Die Farbintensität im Testlinienbereich (T) kann abhängig von

der Konzentration der anti-EBV-Antikörper, die in der Probe

vorhanden sind, variieren. Daher sollte jede Farbtönung im

Testlinienbereich (T) als positives Ergebnis betrachtet werden.

Negativ

Es erscheint eine farbige Linie im

Kontrolllinienbereich (C). Im Testlinien

bereich (T) erscheint keine farbige Linie.

Ungültig

Die Kontrolllinie (C) erscheint nicht.

Ergebnisse von den Tests, die nach der

festgelegten Auswertezeit keine Kon-

trolllinie gebildet haben, müssen

verworfen werden. Überprüfen Sie den

Verfahrensablauf und wiederholen Sie

die Testung mit einer neuen Test-

kassette. Falls das Problem weiter-

besteht, verwenden Sie das Test-Kit bitte

nicht weiter und setzen Sie sich mit

Ihrem Distributor in Verbindung.

Ungenügendes Probenvolumen, abgelaufene Tests oder

fehlerhafte Vorgehensweise sind die wahrscheinlichsten

Ursachen dafür, dass die Kontrolllinie nicht erscheint.

11. Qualitätskontrolle

Die Testkassette beinhaltet eine interne Verfahrenskontrolle:

Eine im Kontrolllinienbereich (C) erscheinende farbige Linie

wird als interne Verfahrenskontrolle betrachtet. Sie bestätigt

ausreichendes Probenvolumen, eine korrekte Verfahrens-

technik und dass die Membran ausreichend durchnässt ist.

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Die Gute Laborpraxis (GLP) empfiehlt den Einsatz von Kontroll-

materialien zum Nachweis der einwandfreien Leistung des

Test-Kits.

Durchführung des externen Qualitätskontrolltestes

1. Halten Sie die Fläschchen senkrecht und geben Sie erst 1

Tropfen (ca. 40 µl) der positiven oder negativen

Kontrolllösung in die Probenvertiefung (S) der Testkassette

und dann 1 Tropfen (ca. 55 µl) Puffer.

2. Bei Schritt 4 der Testdurchführung fortfahren.

3. Die Testergebnisse nicht verwenden, wenn die Kontrollen

nicht die erwarteten Ergebnisse erzielen. Wiederholen Sie

den Test oder kontaktieren Sie Ihren Distributor.

12. Grenzen des Tests

 Der NADAL® Mononucleosis Test ist nur für den in-vitro-

diagnostischen Gebrauch bestimmt. Der Test sollte nur zum

Nachweis von Antikörpern gegen Epstein-Barr-Virus in

Vollblut-, Serum- oder Plasmaproben verwendet werden. Es

kann weder ein quantitativer Wert noch ein Anstieg der

Konzentration der anti-EBV-Antikörper mit diesem

qualitativen Test bestimmt werden.

 Der NADAL® Mononucleosis Test zeigt nur das Vorhanden-

sein von anti-EBV-Antikörpern in der Probe an und sollte

nicht das einzige Kriterium bei der Diagnose einer

infektiösen Mononukleose-Infektion sein.

 Wie bei allen diagnostischen Tests sollten alle Ergebnisse

des Schnelltests zusammen mit anderen klinischen

Informationen, die dem Arzt zur Verfügung stehen,

ausgewertet werden.

 Sollte das Testergebnis negativ ausfallen, klinische

Symptome aber weiter anhalten, empfiehlt es sich,

zusätzliche Testungen unter Verwendung anderer, klini-

scher Methoden durchzuführen. Ein negatives Ergebnis

schließt zu keinem Zeitpunkt eine mögliche IM-Erkrankung

an aus.

13. Erwartete Ergebnisse

In 35-50% der berichteten Fälle verursacht das Epstein-Barr

Virus (EBV) bei Jugendlichen oder jungen Erwachsenen

infektiöse Mononukleose (IM).

1,5

Das Vorkommen von EBV-assoziierter IM in den USA wurde

auf 45 pro 100.000 Fälle geschätzt und ist bei Jugendlichen

und jungen Erwachsenen am höchsten – mit etwa 2 von 1.000

Fällen. Bei EBV Infektionen gibt es kein jahreszeitenabhängiges

Muster. Die Inkubationszeit beträgt 10-60 Tage, obwohl bei

Kindern oder Jugendlichen häufig eine Inkubationszeit von 7-

14 Tagen vorkommt.

14. Leistungsmerkmale des Tests

Sensitivität

Der NADAL® Mononucleosis Test wurde mit Proben ausge-

wertet, die mit einem führenden kommerziell erhältlichen

Objektträger-Agglutinationstest als positiv oder negativ

bestätigt wurden. Der Objektträger-Agglutinationstest wurde

als Vergleichsmethode für den NADAL® Mononucleosis Test

verwendet. Das Ergebnis zeigt, dass die Sensitivität des

NADAL® Mononucleosis Tests >99,9% relativ zum Objekt-

träger-Agglutinationstest beträgt.

Spezifität

Der NADAL® Mononucleosis Test verwendet Antigene, die

hochspezifisch für anti-EBV-Antikörper im Vollblut, Serum

oder Plasma sind. Die Ergebnisse zeigen, dass die Spezifität

des NADAL® Mononucleosis Tests 98,9% relativ zum

Objektträger-Agglutinationstest beträgt.

NADAL® Mononucleosis Test vs. Objektträger-Agglutinations-

test.

Objektträger-Agglutinationstest

NADAL®

Mononucleosis

Test

Positiv Negativ Total

Positiv 60 1 61

Negativ 0 89 89

Total 60 90 150

Relative Sensitivität: >99,9% (95,1% - 100%)*

Relative Spezifität: 98,9% (94% - 99,9%)*

Gesamtübereinstimmung: 99,3% (96,3% - 99,9%)*

*95% Konfidenzintervall

Interferierende Substanzen

Negativen und mittel positiven Plasma- und Serumproben (mit

einem ELISA bestätigt) wurden Analyten mit den unten

aufgeführten Konzentrationen zugegeben und in Triplikaten

getestet.

Analyt Konzentration

Ascorbinsäure 20 mg/ml

Hämoglobin 1000 mg/dl

Gentisinsäure 20 mg/dl

Oxalsäure 60 mg/dl

Bilirubin 1000 mg/dl

Harnsäure 20 mg/ml

Acetaminophen 20 mg/dl

Acetylsalicylsäure 20 mg/dl

Methanol 10%

Kreatin 200 mg/dl

Albumin 2000 mg/dl

Coffein 20 mg/dl

Die Analyten zeigten keine Interferenz mit dem NADAL®

Mononucleosis Test. Es gab keine offensichtlichen Unter-

schiede zwischen den Ergebnissen von drei Chargen der Tests.

Genauigkeit

Inter- und Intra-Lot-Variabilität

Drei unabhängige Chargen der NADAL® Mononucleosis Tests

wurden sowohl mit negativen als auch mit niedrig, mittel und

hoch positiven Serum- und Plasmaproben in 10-fach-

Bestimmungen untersucht. Alle Ergebnisse entsprachen den

Erwartungen. Innerhalb der 10-fach-Bestimmungen bzw.

zwischen den unterschiedlichen Chargen wurden keine

abweichenden Ergebnisse erhalten.

Kreuzreaktivität

Die auf folgende Parameter positiven Proben wurden mit der

NADAL® Mononucleosis Testkassette getestet:

RF HCV

HBsAg TB

HBeAg HIV

HBeAb Syphilis

HBcAb

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Es wurde keine Kreuzreaktivität festgestellt. Dies zeigt, dass

der NADAL® Mononucleosis Test in hohem Maße spezifisch

auf humane anti-EBV-Antikörper ist.

15. Referenzen

1. Hickey SM, Strasburger VC. What Every Pediatrician Should Know About Infectious

Mononucleosis In Adolescents. Pediatr Clin North Am. 1997;44(6):1541-56.

2. Omori M. Mononucleosis http://www.emedicine.com/EMERG/topic309.htm

3. Linde A. Diagnosis of Epstein-Barr-Virus-related diseases. Scand J Infect Dis Suppl.

1996; 100:83-8.

4. Papesch M, Watkins R. Epstein-Barr-Virus infectious mononucleosis. Clin

Otolaryngol. 2001; 26(1):3-8.

5. CDC National Center for Infectious Diseases. EBV & IM:

http://www.cdc.gov/ncidod/diseases/ebv.htm

Rev. 1, 2019-07-04 OM/UJa

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1. Intended Use

The NADAL® Mononucleosis Test is a rapid, chromatographic

immunoassay for the qualitative detection of heterophile

antibodies to Epstein-Barr virus (EBV) in human whole blood,

serum or plasma. The test is intended for use as an aid in the

diagnosis of infectious mononucleosis (IM) and designed for

professional use only.

2. Introduction and Clinical Significance

Infectious Mononucleosis (IM) is caused by the Epstein-Barr

virus (EBV), which is a member of the herpesvirus family. The

symptoms of IM are: fever, sore throat and swollen lymph

glands. In very rare cases, heart or central nervous system

problems may occur. Diagnosis of IM is made based on the

presence of heterophile anti-EBV antibodies. Heterophile anti-

EBV antibodies belong to the IgM class. They are present in

80-90% of acute IM cases and can be detected in 60-70% of

patients during the first week of clinical illness.

1,2,3,4

The NADAL® Mononucleosis Test is a simple test that utilises

an extract of bovine erythrocytes to qualitatively and

selectively detect heterophile anti-EBV antibodies in whole

blood, serum or plasma in just minutes.

3. Test Principle

The NADAL® Mononucleosis Test is a lateral flow

immunoassay for the qualitative detection of heterophile

antibodies to Epstein-Barr virus (EBV) in whole blood, serum

or plasma.

In this test, antigens extracted from bovine erythrocytes are

immobilised in the test line region of the test cassette. During

testing, the specimen reacts with further antigens extracted

from bovine erythrocytes and precoated onto particles which

have been applied to the conjugate pad. The mixture migrates

chromatographically along the membrane and interacts with

the immobilised antigens. If the specimen contains

heterophile anti-EBV antibodies, a coloured line will appear in

the test line region, indicating a positive result. If the

specimen contains no heterophile anti-EBV antibodies, no

coloured line will appear in the test line region, indicating a

negative result.

To serve as a procedural control, a coloured line should always

appear in the control line region (C), indicating that a proper

volume of specimen has been added and membrane wicking

has occurred.

4. Reagents and Materials Supplied

 5 NADAL® Mononucleosis test cassettes incl. disposable

pipettes

 1 buffer

 1 positive control (diluted human plasma containing

heterophile anti-EBV antibodies, 0.09% sodium azide)

 1 negative control (diluted human plasma, 0.09% sodium

azide)

 1 package insert

5. Additional Materials Required

 Specimen collection containers

 Centrifuge (for serum/plasma)

 Timer

 Lancet (for fingerstick whole blood only)

 If necessary, heparinised capillary tubes and dispensing bulb

(for fingerstick whole blood only)

6. Storage & Stability

Test kits should be stored at 2-30°C and used before the expiry

date printed on the packaging. Test cassettes are stable until

the expiration date printed on foil pouches. Test cassettes

should remain in sealed pouches until use. Do not freeze tests.

Do not use tests beyond the expiration date.

7. Warnings and Precautions

 For professional in-vitro diagnostic use only.

 Carefully read through the test procedure prior to testing.

 Do not use the test beyond the expiration date indicated on

the package.

 Do not use the test if the foil pouch is damaged.

 Do not reuse tests.

 Do not add samples to the reaction area (result area).

 In order to avoid contamination, do not touch the reaction

area (result area).

 Avoid cross-contamination of specimens by using a new

specimen collection container for each specimen obtained.

 Do not eat, drink or smoke in the area where specimens

and test kits are handled.

 Wear protective clothing such as laboratory coats,

disposable gloves and eye protection when specimens are

being assayed.

 Handle all specimens as if they contain infectious agents.

Observe established precautions for microbiological risks

throughout all procedures and standard guidelines for the

appropriate disposal of specimens.

 The test kit contains products of animal origin. Certified

knowledge of the origin and/or sanitary state of the animals

does not completely guarantee the absence of transmissible

pathogenic agents. It is therefore recommended that these

products be treated as potentially infectious, and handled

in accordance with usual safety precautions (e.g., do not

ingest or inhale).

 Humidity and temperature can adversely affect test results.

 Used testing materials should be discarded according to

local regulations.

8. Specimen Collection and Preparation

The NADAL® Mononucleosis Test can be performed using

whole blood (from venipuncture or fingerstick), serum or

plasma.

To collect venipuncture whole blood specimens:

Collect blood specimens with anticoagulants (sodium or

lithium heparin, potassium or sodium EDTA, sodium oxalate,

sodium citrate) following standard laboratory procedures.

To collect fingerstick whole blood specimens:

 Wash the patient’s hand with soap and warm water or

clean it with an alcohol swab. Allow it to dry.

 Massage the hand without touching the intended puncture

site by rubbing down the hand towards the fingertip of the

middle or ring finger.

 Puncture the skin with a sterile lancet. Wipe away the first

sign of blood.

 Gently rub the hand from wrist to palm to finger to form a

rounded drop of blood over the puncture site.

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Separate serum or plasma from blood as soon as possible to

avoid haemolysis. Use only clear, non-haemolysed specimens.

Testing should be performed immediately after specimen

collection. Do not leave specimens at room temperature for

prolonged periods of time. Serum and plasma specimens can

be stored at 2-8°C for up to 3 days. For long-term storage,

specimens should be kept below -20°C. Whole blood collected

by venipuncture should be stored at 2-8°C if the test is to be

run within 2 days of collection. Do not freeze whole blood

specimens. Fingerstick whole blood should be tested

immediately. Bring specimens to room temperature prior to

testing. Frozen specimens should be completely thawed and

mixed well prior to testing. Specimens should not be frozen

and thawed repeatedly. If specimens are to be shipped, they

should be packed in compliance with federal regulations for

transportation of etiologic agents.

9. Test Procedure

Bring tests, buffer, specimens and/or controls to room

temperature (15-30°C) prior to testing.

1. Remove the test cassette from the sealed foil pouch and

place it on a clean and level surface. The test cassette

should be used immediately after opening the foil pouch.

Label the test cassette with the patient or control

identification.

2. a) For serum or plasma specimen:

Holding the dropper vertically, add

1 drop (approximately 25 μL) of

serum or plasma to the sample well

(S) of the test cassette.

b) For venipuncture whole blood

specimen:

Holding the dropper vertically, add

2 drops (approximately 50 μL) of

whole blood to the sample well (S) of

the test cassette.

c) For fingerstick whole blood

specimen:

Apply the end of the capillary tube to

the blood until it is filled with

approximately 50 μL. Avoid air

bubbles. Place the bulb onto the top

end of the capillary tube and squeeze

the bulb to dispense the whole blood

specimen into the sample well (S) of

the test cassette.

3. Holding the buffer bottle vertically,

add 1 drop (approximately 55 μL) of

buffer to the sample well (S).

4. Start the timer.

5. Wait for the coloured line(s) to

appear. Read the result after 5

minutes. Do not interpret the result

after more than 10 minutes.

10. Result Interpretation

Positive:

Two coloured lines appear on the

membrane. One line appears in the

control line region (C) and the other line

appears in the test line region (T).

Note:

The colour intensity in the test line region (T) may vary

depending on the concentration of anti-EBV antibodies

present in the specimen. Therefore, any shade of colour in the

test line region (T) should be considered positive.

Negative:

One coloured line appears in the control

line region (C). No apparent coloured

line appears in the test line region (T).

Invalid:

The control line (C) fails to appear.

Results from any test which has not

produced a control line at the specified

reading time must be discarded. Please

review the procedure and repeat the

test with a new test cassette. If the

problem persists, discontinue using the

test kit immediately and contact your

distributor.

Insufficient specimen volume, incorrect operating procedure

or expired tests are the most likely reasons for the control line

failure.

11. Quality Control

An internal procedural control is included in the test cassette:

A coloured line appearing in the control line region (C) is

considered an internal procedural control. It confirms

sufficient specimen volume, adequate membrane wicking and

correct procedural technique.

Good laboratory practice (GLP) recommends the use of

control materials to ensure proper test kit performance.

Procedure for External Quality Control Testing

1. Holding each bottle vertically, add 1 drop (approximately

40 μL) of positive or negative control solution to the sample

well (S) of the test cassette. Then, holding the bottle

vertically, add 1 drop (approximately 55 μL) of buffer to the

sample well (S).

2. Continue with step 4 of ‘Test Procedure’.

3. If the controls do not yield the expected results, do not use

the obtained results. Repeat the test or contact your

distributor.

12. Limitations

 The NADAL® Mononucleosis Test is for in-vitro diagnostic

use only. The test should only be used for the detection of

anti-EBV antibodies in whole blood, serum or plasma

specimens. Neither the quantitative value nor the rate of

increase in concentration of anti-EBV antibodies can be

determined by this qualitative test.

 The NADAL® Mononucleosis Test only detects the presence

of anti-EBV antibodies in specimen and should not be used

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as the sole criterion for diagnosis of infectious

mononucleosis infection.

 As with all diagnostic tests, all results obtained with this test

should be interpreted in conjunction with other clinical

information available to the physician.

 If the test result is negative and clinical symptoms persist,

additional testing using other clinical methods is

recommended. A negative result does not at any time

preclude the possibility of IM infection.

13. Expected Results

Infection with Epstein-Barr virus (EBV) during adolescence or

young adulthood causes infectious mononucleosis (IM) in 35%

to 50% of reported cases.

1,5

The incidence of EBV-associated IM

in the USA has been estimated at 45 per 100,000 and is the

highest in adolescent and young adults - roughly 2 out of

1,000. No seasonal pattern of EBV infection exists. The

incubation period is 10 to 60 days, though the incubation

period of 7 to 14 days is common amongst children and

adolescents.

14. Performance Characteristics

Sensitivity

The NADAL® Mononucleosis Test has been evaluated with

specimens confirmed positive or negative by a leading,

commercially-available slide agglutination test. The slide

agglutination test served as a reference method for the

NADAL® Mononucleosis Test. The result shows that the

sensitivity of the NADAL® Mononucleosis Test is >99.9%

relative to the slide agglutination test.

Specificity

The NADAL® Mononucleosis Test uses antigens that are highly

specific for anti-EBV antibodies in whole blood, serum or

plasma. The results show that the specificity of the NADAL®

Mononucleosis Test is 98.9% relative to the slide agglutination

test.

NADAL® Mononucleosis Test vs. slide agglutination test

Slide agglutination test

NADAL®

Mononucleosis

Test

Positive Negative Total

Positive 60 1 61

Negative 0 89 89

Total 60 90 150

Relative sensitivity: >99.9% (95.1% - 100%)*

Relative specificity: 98.9% (94% - 99.9%)*

Overall agreement: 99.3% (96.3% - 99.9%)*

*95% Confidence interval

Interfering substances

Negative and middle positive plasma and serum specimens

(ELISA confirmed) were spiked with the analytes at the

concentrations listed below and tested in triplicate.

Analyte Concentration

Ascorbic acid 20 mg/ml

Haemoglobin 1000 mg/dl

Gentisic acid 20 mg/dl

Oxalic acid 60 mg/dl

Bilirubin 1000 mg/dl

Analyte Concentration

Uric acid 20 mg/ml

Acetaminophen 20 mg/dl

Acetylsalicylic acid 20 mg/dl

Methanol 10%

Creatine 200 mg/dl

Albumin 2000 mg/dl

Caffeine 20 mg/dl

The analytes showed no interference with the NADAL®

Mononucleosis Test. There were no obvious differences

among the results obtained with three lots of tests.

Precision

Inter- and intra-lot variability

Three independent lots of the NADAL® Mononucleosis Tests

were tested with negative as well as low, medium and high

positive serum and plasma specimens in 10-fold

determinations. All results matched the expectations. No

deviating results were obtained within the 10-fold

determinations or between the different lots.

Cross-reactivity

Samples, positive for the following parameters were tested

with the NADAL® Mononucleosis Test:

RF HCV

HbsAg TB

HbeAg HIV

HbeAb Syphilis

HbcAb

No cross-reactivity was observed indicating that the NADAL®

Mononucleosis Test has a high degree of specificity for human

anti-EBV antibodies.

15. References

1. Hickey SM, Strasburger VC. What Every Pediatrician Should Know About Infectious

Mononucleosis In Adolescents. Pediatr Clin North Am. 1997;44(6):1541-56.

2. Omori M. Mononucleosis http://www.emedicine.com/EMERG/topic309.htm

3. Linde A. Diagnosis of Epstein-Barr-Virus-related diseases. Scand J Infect Dis Suppl.

1996; 100:83-8.

4. Papesch M, Watkins R. Epstein-Barr-Virus infectious mononucleosis. Clin

Otolaryngol. 2001; 26(1):3-8.

5. CDC National Center for Infectious Diseases. EBV & IM:

http://www.cdc.gov/ncidod/diseases/ebv.htm

Rev. 1, 2019-07-04 OM/UJa

FRANÇAIS

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1. Domaine d’application

Le test rapide NADAL® Mononucleosis est un immunodosage

chromatographique pour la détection qualitative des anticorps

hétérophiles dirigés contre le virus de l'Epstein-Barr dans les

échantillons de sang total, de sérum ou de plasma. Le test est

une aide au diagnostic de la mononucléose infectieuse. Il est

réservé à un usage professionnel.

2. Introduction et signification clinique

La mononucléose infectieuse (MNI) est une maladie

provoquée par le virus Epstein-Barr (EBV). L'EBV fait partie de

la famille des Herpesviridae. Les symptômes de la MNI sont la

fièvre, les maux de gorge et un gonflement des ganglions

lymphatiques. Dans de rares cas, des problèmes cardiaques ou

du système nerveux central peuvent apparaître. Le diagnostic

de la MNI se fait par la détection d'anticorps hétérophiles anti-

EBV. Les anticorps hétérophiles anti-EVB font partie de la

classe des IgM. Les anticorps hétérophiles apparaissent dans

80-90°C des cas aigus et sont détectables chez 60-70% des

patients lors de la première semaine de l'infection.

1,2,3,4

Le test NADAL® Mononucleosis emploie un extrait

d’érythrocytes bovins pour détecter de manière qualitative et

sélective des anticorps hétérophiles dans le sang total, le

sérum ou le plasma en quelques minutes seulement.

3. Principe du test

Le test rapide NADAL® Mononucleosis est un immunodosage

chromatographique pour la détection qualitative des anticorps

hétérophiles dirigés contre le virus de l'Epstein-Barr dans les

échantillons de sang total, de sérum ou de plasma.

Des antigènes d’érythrocytes bovins sont immobilisés au

niveau de la ligne de test (T) de la cassette. L’échantillon réagit

avec les particules antigéniques d’extraits d’érythrocytes

bovins immobilisées sur le tampon de conjugué du test. Ce

mélange migre le long de la membrane et interagit avec les

antigènes immobilisés. Si l’échantillon contient des anticorps

hétérophiles anti-EBV, une ligne de couleur apparaît dans la

zone de test (T). Le résultat est alors positif. Si l’échantillon ne

contient pas d’anticorps hétérophiles anti-EBV, la zone de test

ne présente aucune ligne de couleur, le résultat est alors

négatif.

Une ligne de couleur doit toujours apparaître dans la zone de

contrôle. Cette ligne indique que le volume d'échantillon

utilisé était suffisant et que la membrane a été entièrement

imbibée.

4. Réactifs et matériel fournis

 5 cassettes NADAL® Mononucleosis (pipettes à usage

unique incluses)

 1 solution tampon "Buffer“

 1 flacon de contrôle positif « Positiv Control » (plasma

humain dilué contenant des anticorps hétérophiles anti-

EBV, 0,09% azoture de sodium)

 1 flacon de contrôle négatif « Negativ Control » (plasma

humain dilué, 0,09% azoture de sodium)

 1 notice d'utilisation

5. Matériel supplémentaire nécessaire

 Récipient collecteur

 Centrifugeuse (Sérum/Plasma)

 Chronomètre

 Lancettes (pour sang total recueilli sur le bout du doigt)

 Éventuellement, tubes capillaires avec poire de

prélèvement (pour sang total recueilli au bout du doigt)

6. Péremption et conservation des réactifs

Les kits de test devraient être conservés à une température

ambiante comprise entre 2 et 30°C et utilisés d'ici à la date de

péremption indiquée sur l'emballage. Les cassettes restent

stables jusqu'à la date de péremption indiquée sur

l'emballage. Les cassettes devraient restées dans leur

emballage fermé jusqu'à leur utilisation. Ne pas congeler les

prélèvements. Ne pas utiliser le test au-delà de la date de

péremption.

7. Avertissement et précautions

 Test réservé au diagnostic in-vitro professionnel.

 Lire attentivement la notice d'utilisation avant de réaliser le

test.

 Ne pas utiliser le test après la date de péremption indiquée

sur l'emballage.

 Ne pas utiliser le test si l'emballage est endommagé.

 Test à usage unique.

 Ne pas déposer de prélèvement sur la zone réactive

(fenêtre de résultats).

 Ne pas toucher la zone réactive afin d'éviter toute

contamination.

 Utiliser un collecteur différent pour chaque échantillon afin

d’éviter tout risque de contaminations croisées.

 Ne pas manger, boire ou fumer dans la zone de

manipulation du test.

 Utiliser des vêtements de protection tels qu'une blouse de

laboratoire, des gants à usage unique et des lunettes de

protection.

 Manipuler les échantillons en les considérant comme de

potentiels réactifs infectieux. Respecter les précautions

relatives aux risques microbiologiques pendant les

manipulations ainsi que les directives locales en vigueur

concernant l'élimination des déchets.

 Ce test contient des produits d'origine animale. La

certification concernant l'origine et l'état sanitaire des

animaux ne certifie pas l'absence totale d'agents

pathogènes transmissibles. Tous les prélèvements et

matériaux utilisés pour ce test doivent être considérés

comme des matières infectieuses. Il est recommandé

d'appliquer les mesures de précaution nécessaires (ne pas

avaler ou inhaler).

 L'humidité et les fortes températures peuvent altérer les

résultats du test.

 Les composants du test doivent être éliminés selon les

directives locales en vigueur.

8. Recueil, préparation et conservation des échantillons

Le test NADAL® Mononucleosis peut être réalisé sur des

échantillons de sang total (ponction veineuse ou au bout du

doigt), de sérum et de plasma.

Sang total veineux

Recueillir un échantillon de sang avec un anticoagulant

(héparine de sodium, héparine de lithium, potassium EDTA,

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EDTA-sodium, oxalate de sodium, citrate de sodium) selon les

procédures standards de laboratoire.

Sang total recueilli au bout du doigt

 Laver les mains du patient avec du savon et de l'eau chaude

ou nettoyer soigneusement la zone de piqûre avec un

tampon alcoolisé. Bien sécher la main.

 Masser la main en direction du bout du majeur ou de

l'annulaire. Prendre soin de ne pas entrer en contact avec la

zone de piqûre.

 Piquer le bout du doigt à l'aide d'une lancette stérile.

Essuyer la première goutte de sang.

 Frotter la main du poignet à la paume et au doigt jusqu’à

former une goutte de sang au niveau de la zone de piqûre.

Séparer le sérum et le plasma du sang dès que possible afin

d'éviter toute hémolyse. Utiliser exclusivement des

échantillons clairs et non-hémolysés.

L'analyse devrait être réalisée juste après le recueil des

échantillons. Ne pas conserver les échantillons à température

ambiante pendant une période trop longue. Les échantillons

de sérum et de plasma peuvent être conservés jusqu'à 3 jours

à une température comprise entre 2 et 8°C. Lors d'une

conservation plus longue, conserver les échantillons à -20°C.

Le sang total veineux devrait être conservé à une température

comprise entre 2 et 8°C si le test est réalisé dans les 2 jours qui

suivent le recueil des échantillons. Ne pas congeler les

échantillons de sang total. Les échantillons de sang total

recueillis au bout du doigt devraient être testés dès que

possible. Amener tous les échantillons à température

ambiante avant la réalisation du test. Les échantillons

congelés devraient être décongelés avant la réalisation du test

et bien mélangés. Ne pas répéter les cycles de congélation-

décongélation. Dans les cas où les échantillons doivent être

expédiés, s'assurer que ceux-ci sont emballés selon les normes

relatives au transport de matières éthologiques.

9. Exécution du test

Amener les tests, les échantillons et/ou les contrôles

externes à température ambiante (15-30°C) avant la

réalisation du test.

1. Retirer la cassette de son emballage d'origine et déposer la

cassette sur une surface plane et propre. Utiliser la cassette

immédiatement après l'ouverture de son emballage.

Indiquer les identifiants du patient et du contrôle sur la

cassette.

2. a) Échantillons de sérum et de

plasma

Tenir la pipette à la verticale et

déposer 1 goutte (env. 25 µl) de

l'échantillon de sérum et de

plasma dans le puits de dépôt (S)

de la cassette.

b) Échantillons de sang total par

ponction veineuse

Tenir la pipette à la verticale et

déposer 2 gouttes (env. 50 μL) de

sang total dans le puits de dépôt

(S) de la cassette.

c) Échantillons de sang total

recueilli au bout du doigt

Remplir le tube capillaire de sang

total d'environ 50 μL de sang. Éviter

la formation de bulles d'air. Déposer

la poire de prélèvement à l'extrémité

du tube capillaire et appuyer sur la

poire pour déposer l'échantillon de

sang total dans le puits de dépôt de la

cassette (S).

3. Tenir la pipette à la verticale et

déposer 1 goutte (55 μL) de la

solution tampon "Buffer".

4. Démarrer le chronomètre.

5. Attendre que la ou les lignes colorées

apparaissent. Interpréter les résultats

après 5 minutes. Ne plus interpréter

les résultats après 10 minutes.

10. Interprétation des résultats

Positif

Deux lignes colorées apparaissent sur la

membrane. Une ligne apparaît à hauteur

de la zone de contrôle (C) et une autre

ligne apparaît à hauteur de la zone de

test (T).

NOTE:

L'intensité de la couleur de la ligne de test (T) peut varier selon

la concentration en anticorps anti-EBV contenue dans

l'échantillon. La moindre apparition d'une ligne colorée à

hauteur de la zone de test (T) doit être considérée comme un

résultat positif.

Négatif

Une ligne colorée apparaît au niveau de

la zone de contrôle (C). Aucune ligne de

couleur n'apparaît au niveau de la zone

de test (T).

Non-valide

Aucune ligne n’apparaît à hauteur de la

zone de contrôle (C). Les tests sur

lesquels aucune ligne de contrôle n'est

apparue dans le temps d'évaluation fixé

doivent être jetés. Contrôler la

procédure d'exécution du test et répéter

le test avec une nouvelle cassette. Dans

le cas où le problème persiste, ne plus

utiliser le kit du test et contacter le

distributeur.

Un volume d'échantillon insuffisant, une mauvaise

manipulation ou des tests périmés sont les principales causes

d'absence de ligne de contrôle.

11. Contrôle qualité

La cassette contient une procédure de contrôle interne.

La ligne colorée apparaissant au niveau de la zone de contrôle

confirme que le volume d'échantillon était suffisant, que la

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manipulation a été correctement effectuée et que la

membrane a été suffisamment imbibée.

Les Bonnes Pratiques de Laboratoire (BPL) recommandent

l'utilisation de matériel de contrôle afin de confirmer la

fiabilité du test.

Contrôle externe de qualité

1. Tenir le flacon à la verticale et déposer 1 goutte (40 µl) de

la solution de contrôle positive ou négative dans le puits de

dépôt (S) de la cassette. Ajouter 1 goutte (env. 55 µl) de

solution tampon.

2. Continuer avec l'étape 4 de l'exécution du test.

3. Ne pas exploiter les résultats du test si les contrôles ne

fournissent pas les résultats attendus. Recommencer le test

ou contacter le distributeur.

12. Limites du test

Le test rapide NADAL® Mononucleosis est réservé au

diagnostic in-vitro professionnel. Le test est réservé à la

détection d’anticorps anti-EBV dans les échantillons de sang

total, de sérum ou de plasma. Ce test qualitatif ne donne

aucune information sur la concentration ou la progression

de la concentration en anticorps anti-EBV.

Le test NADAL® Mononucleosis indique seulement la

présence d'anticorps anti-EBV dans les échantillons et ne

devraient pas être le seul critère lors du diagnostic d'une

infection à la mononucléose.

Un diagnostic clinique définitif ne devrait jamais s'appuyer

sur les résultats d'un seul test. Le diagnostic devrait être

établi par un médecin après évaluation de toutes les

données de laboratoire et cliniques.

Si les résultats du test sont négatifs mais que les

symptômes cliniques persistent, il est recommandé de faire

appel à d'autres méthodes cliniques de diagnostic. Un

résultat négatif n'exclut pas la possibilité d'une infection à

MNI.

13. Résultats attendus

Pendant l'adolescence ou au début de l'âge adulte, le virus

Epstein-Barr provoque une mononucléose infectieuse dans

35-5 à 50% des cas rapportés.

1,5

Aux États-Unis, le taux d'incidence de la mononucléose

infectieuse associée à l'EBV a été estimé à 45 nouveaux cas

pour 100 000 personnes par an et est le plus fort chez les

adolescents ou les jeunes adultes, autour de 2 nouveaux cas

pour 1000 personnes par an. L'infection à l'EBV n'est pas

saisonnière. Le temps d'incubation est de 10 à 60 jours voire

de 7 à 14 jours chez les enfants et les adolescents.

14. Performance du test

Sensibilité

La performance du test NADAL® Mononucleosis a été calculée

en testant des échantillons positifs et négatifs confirmés par

une méthode d'agglutination sur lame disponible dans le

commerce. Les résultats ont montré que la sensibilité du test

NADAL® Mononucleosis est de 99,9% en comparaison avec un

test d’agglutination sur lame.

Spécificité

Le test NADAL® Mononucleosis utilise des antigènes

hautement spécifiques aux anticorps anti-EBV dans le sang

total, le sérum et le plasma. Les résultats ont montré que la

spécificité du test NADAL® Mononucleosis est de 98,9% en

comparaison avec un test d’agglutination sur lame.

NADAL® Mononucleosis vs. Agglutination sur lame

Agglutination sur lame

NADAL®

Mononucleosis

Positif Négatif Total

Positif 60 1 61

Négatif 0 89 89

Total 60 90 150

Sensibilité relative: >99,9% (95,1% - 100%)*

Spécificité relative: 98,9% (94% - 99,9%)*

Concordance générale: 99,3% (96,3% - 99,9%)*

*95% Intervalle de confiance

Substances interférentes

Les analytes suivants ont été ajoutés à des échantillons de

plasma et de sérum négatifs et moyennement positifs

(confirmés avec ELISA) aux concentrations indiquées. Le test a

été réalisé trois fois.

Analytes Concentration

Acide ascorbique 20 mg/ml

Hémoglobine 1000 mg/dl

Acide gentisique 20 mg/dL

Acide oxalique 60 mg/dl

Bilirubine 1000 mg/dl

Acide urique 20 mg/ml

Acétaminophène 20 mg/dL

Acide acétylsalicylique 20 mg/dL

Méthanol 10%

Créatine 200 mg/dL

Albumine 2000 mg/dL

Cofféine 20 mg/dL

Les analytes n'ont montré aucune interférence avec le test

NADAL® Mononucleosis. Aucune différence notable n'a été

observée entre les résultats des trois lots de test.

Précision

Variabilité inter- et intra-lots

Le test NADAL® Mononucleosis a été testé sur trois lots

indépendants dix fois avec des échantillons négatifs,

faiblement, moyennement et fortement positifs sur des

échantillons de sérum et de plasma. Tous les résultats ont été

correctement identifiés. Aucun résultat incohérent n'a été

observé.

Réactions croisées

Les échantillons positifs aux substances suivantes ont été

testés avec le test NADAL® Mononucleosis:

RF HCV

HBsAg TB

HBeAg VIH

HBeAb Syphilis

HBcAb

Aucune réaction croisée n'a été observée. Le test NADAL®

Mononucleosis est hautement spécifique aux anticorps

hétérophiles humains anti-EBV.

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15. Bibliographie

1. Hickey SM, Strasburger VC. What Every Pediatrician Should Know About Infectious

Mononucleosis In Adolescents. Pediatr Clin North Am. 1997;44(6):1541-56.

2. Omori M. Mononucleosis http://www.emedicine.com/EMERG/topic309.htm

3. Linde A. Diagnosis of Epstein-Barr-Virus-related diseases. Scand J Infect Dis Suppl.

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4. Papesch M, Watkins R. Epstein-Barr-Virus infectious mononucleosis. Clin

Otolaryngol. 2001; 26(1):3-8.

5. CDC National Center for Infectious Diseases. EBV & IM:

http://www.cdc.gov/ncidod/diseases/ebv.htm

Rev. 1, 2019-07-04 PF

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1. Uso previsto

El test NADAL® Mononucleosis es un inmunoensayo cromato-

gráfico rápido para la detección cualitativa de anticuerpos

heterófilos del virus de Epstein-Barr (VEB) en sangre completa,

suero o plasma humanos. Este test sirve para ayudar en el

diagnóstico de la mononucleosis infecciosa (MI) y solo está

indicado para el uso profesional.

2. Introducción y significado clínico

La mononucleosis infecciosa (MI) está causada por el virus

Epstein-Barr (VEB), que forma parte de la familia del virus

herpes. Los síntomas de la MI son: fiebre, dolor de garganta y

ganglios linfáticos inflamados. En casos muy raros, pueden

producirse problemas en el corazón o en el sistema nervioso

central. El diagnóstico de la MI se determina en base a la

presencia de anticuerpos heterófilos anti-VEB. Estos

anticuerpos pertenecen al tipo IgM. Están presentes en el 80-

90% de los casos de MI aguda y se pueden detectar en el 60-

70% de los pacientes durante la primera semana de la

enfermedad clínica.

1,2,3,4

El test NADAL® Mononucleosis es un test simple que utiliza un

extracto de eritrocitos bovinos para detectar, cualitativa y

selectivamente, anticuerpos heterófilos anti-VEB en sangre

completa, suero o plasma en cuestión de minutos.

3. Principio del test

El test NADAL® Mononucleosis es un inmunoensayo de flujo

lateral para la detección cualitativa de anticuerpos heterófilos

del virus de Epstein-Barr (VEB) en sangre completa, suero o

plasma.

En este test, los antígenos extraídos de eritrocitos bovinos se

encuentran inmovilizados en la región de la línea de test del

casete. Durante la prueba, la muestra reacciona con otros

antígenos extraídos de eritrocitos bovinos que recubren

partículas aplicadas en la almohadilla de conjugado. La mezcla

migra cromatográficamente a lo largo de la membrana e

interactúa con los antígenos inmovilizados. Si la muestra

contiene anticuerpos heterófilos anti-VEB, aparecerá una línea

coloreada en la región de test, indicando un resultado

positivo. Si la muestra no contiene anticuerpos heterófilos

anti-VEB, no aparecerá la línea coloreada en la región de test,

lo que indicará un resultado negativo.

Como control del procedimiento, debe aparecer siempre una

línea coloreada en la región de control (C), indicando que el

volumen de muestra ha sido adecuado y que la membrana se

ha empapado suficientemente.

4. Reactivos y materiales provistos

5 casetes de test NADAL® Mononucleosis con pipetas

desechables incluidas

1 búfer

1 control positivo (plasma humano diluido que contiene

anticuerpos heterófilos anti-VEB, azida de sodio al 0,09%)

1 control negativo (plasma humano diluido, azida de sodio

al 0,09%)

1 manual de instrucciones

5. Materiales adicionales

Recipientes para recolectar la muestra

Centrifugadora (para suero/plasma)

Cronómetro

Lanceta (solo para sangre completa obtenida por punción

digital)

Tubos capilares desechables heparinizados y goteros

dispensadores (solo para sangre completa obtenida por

punción digital), si fueran necesarios.

6. Almacenamiento y conservación

Almacene el kit de test a 2-30 °C y utilícelo antes de la fecha

de caducidad impresa en el envase. Los casetes de test se

mantienen estables hasta la fecha de caducidad indicada.

Manténgalos en su envase sellado hasta su uso. No congele el

kit. No utilice los test después de su fecha de caducidad.

7. Advertencias y precauciones

Solo apto para el uso profesional de diagnóstico in-vitro.

Lea atentamente todo el procedimiento del test antes de

comenzar la prueba.

No utilice el test después de la fecha de caducidad indicada

en el envase.

No utilice el kit de test si el envase está dañado.

No reutilice los dispositivos.

No añada muestras en el área de reacción (región de

resultados).

Evite tocar el área de reacción (región de resultados) para

evitar posibles contaminaciones.

Evite la contaminación cruzada de las muestras utilizando

un nuevo recipiente recolector para cada una.

No coma, beba o fume en la zona donde se manipulan de

las muestras y los kits de test.

Utilice ropa protectora, como bata de laboratorio, guantes

desechables y gafas de protección, mientras manipule las

muestras.

Manipule las muestras como si contuviesen agentes

infecciosos. Siga durante todo el procedimiento las

precauciones establecidas para riesgos microbiológicos, y

las directrices estándar para la correcta eliminación de las

muestras.

El kit de test contiene productos de origen animal. El

conocimiento certificado del origen y/o estado sanitario de

los animales no garantiza completamente la ausencia de

agentes patogénicos transmisibles. Por eso, se recomienda

tratar estos productos como potencialmente infecciosos y

seguir las medidas de seguridad habituales durante su

manipulación (p.ej. no ingerir ni inhalar).

La humedad y la temperatura pueden afectar

negativamente a los resultados del test.

La eliminación de los materiales utilizados debe realizarse

de acuerdo con las regulaciones locales.

8. Recolección de muestras y preparación

El test NADAL® Mononucleosis se puede realizar utilizando

sangre completa (obtenida por punción venosa o digital),

suero o plasma.

Para recolectar muestras de sangre completa por punción

venosa:

Recolecte las muestras de sangre con anticoagulantes (sodio o

heparina de litio, potasio o EDTA de sodio, oxalato de sodio,

citrato de sodio) siguiendo los procedimientos estándar de

laboratorio.

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Para recolectar muestras de sangre completa por punción

digital:

 Lave la mano del paciente con jabón y agua templada o

límpiela con un hisopo con alcohol. Déjela secar.

 Masajee la mano, sin tocar el lugar de la punción,

frotándola hacia a la punta del dedo medio o anular.

 Pinche la piel con una lanceta estéril. Limpie la primera gota

de sangre.

 Frote suavemente la mano desde la muñeca hacia la palma

y hasta la punta del dedo de modo que se forme una gota

redonda de sangre en la zona de punción.

Separe el suero o plasma de la sangre lo antes posible para

evitar la hemólisis. Utilice solo muestras claras no

hemolizadas.

El test se debe realizar inmediatamente después de la

recolección de la muestra. No deje las muestras a temperatura

ambiente durante periodos de tiempo prolongados. Las

muestras de suero y plasma se pueden almacenar a 2-8 °C

hasta 3 días. Para un almacenamiento de larga duración, debe

conservarlas por debajo de -20 °C. La sangre completa

recolectada por punción venosa se debe almacenar a 2-8 °C

siempre que el test se realice en los 2 días siguientes a la

recolección. No congele las muestras de sangre completa. Si la

sangre completa se ha obtenido por punción digital se debe

realizar la prueba inmediatamente. Lleve las muestras a

temperatura ambiente antes de realizar la prueba. Las

muestras congeladas deben ser completamente descon-

geladas y mezcladas bien antes de realizar la prueba. Evite los

ciclos repetidos de congelado y descongelado. Si las muestras

se van a transportar, se deben empaquetar de acuerdo con las

regulaciones vigentes para el transporte de agentes

etiológicos.

9. Procedimiento del test

Lleve los test, búfer, muestras y/o controles a temperatura

ambiente (15-30 °C) antes de realizar la prueba.

1. Retire el casete de test de su envase sellado y colóquelo

sobre una superficie limpia y plana. El casete se debe

utilizar inmediatamente después de abrir el envase de

aluminio. Etiquételo con la identificación del paciente o del

control.

2. a) Para muestras de suero o

plasma:

Sujetando la pipeta verticalmente,

añada 1 gota (aprox. 25 μL) de suero

o plasma al pocillo del casete (S).

b) Para muestras de sangre

completa obtenidas por punción

venosa:

Sujetando la pipeta verticalmente,

añada 2 gotas (aprox. 50 μL) de

sangre completa al pocillo del

casete (S).

c) Para muestras de sangre

completa obtenidas por punción

digital:

Coloque el extremo del tubo capilar

sobre la sangre hasta llenarlo con

aproximadamente 50 µL. Evite la

formación de burbujas. Coloque la

perilla en el extremo del tubo

capilar y apriétela para dispensar la

muestra de sangre completa en el

pocillo del casete (S).

3. Sosteniendo el botecito de búfer

verticalmente añada 1 gota (aprox.

55 μL) de búfer al pocillo del casete

(S).

4. Active el cronómetro.

5. Espere a que aparezca(n) la(s) línea(s)

coloreada(s). Lea los resultados del

test tras 5 minutos. No interprete los

resultados pasados más de 10

minutos.

10. Interpretación del resultado

Positivo:

Aparecen dos líneas coloreadas en la

membrana. Una en la región de la línea de

control (C) y la otra en la región de la línea

de test (T).

Nota:

La intensidad del color en la región de la línea de test (T)

puede variar en función de la concentración de anticuerpos

anti-VEB presentes en la muestra. Por eso, cualquier sombra

coloreada en la región de test (T) se debe considerar positiva.

Negativo:

Aparece una línea coloreada en la región de

la línea de control (C). No aparece ninguna

línea coloreada en la región de la línea de

test (T).

No válido:

No aparece la línea de control (C). Si no

aparece la línea de control dentro del

tiempo de lectura especificado, los

resultados del test se deben descartar.

Revise el procedimiento y repita la prueba

con un nuevo test. Si el problema persiste,

deje de usar el kit inmediatamente y

contacte con su distribuidor.

Las causas más frecuentes de que no aparezca la línea de

control son un volumen de muestra insuficiente, un

procedimiento incorrecto o que el dispositivo esté caducado.

11. Control de calidad

El casete de test contiene un control interno del procedi-

miento.

La línea coloreada que aparece en la región de control (C) se

considera un control interno del procedimiento. Esta línea

confirma que el volumen de la muestra ha sido el adecuado,

que la membrana se ha empapado suficientemente y que la

técnica del procedimiento ha sido correcta.

Las Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL) recomiendan el uso

de materiales de control para asegurar que el funcionamiento

del test es correcto.

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Procedimiento operativo para el análisis del control de

calidad externo

1. Sostenga cada bote en posición vertical, añada 1 gota

(aprox. 40 μL) de solución de control positivo o negativo en

el pocillo del casete (S). A continuación, sosteniendo el

botecito en posición vertical, añada 1 gota (aprox. 55 μL) de

búfer al pocillo del casete (S).

2. Continúe con el paso 4 del 'Procedimiento de test'.

3. Si los controles no producen los resultados esperados, no

utilice los resultados obtenidos. Repita el test o contacte

con su distribuidor.

12. Limitaciones

El test NADAL® Mononucleosis solo es apto para el uso de

diagnóstico in-vitro. El test se debe utilizar únicamente para

la detección de anticuerpos anti-VEB en muestras de sangre

completa, suero o plasma. Este test cualitativo no detecta ni

la cantidad ni el aumento de la concentración de

anticuerpos anti-VEB.

El test NADAL® Mononucleosis solo detecta la presencia de

anticuerpos anti-VEB en la muestra y no se debe utilizar

como único criterio para el diagnóstico de una infección por

mononucleosis.

Al igual que con todos los test de diagnóstico, los resultados

obtenidos se deben interpretar junto con otra información

clínica disponible por el médico.

Si el test muestra un resultado negativo y los síntomas

clínicos persisten, se recomienda realizar pruebas

adicionales utilizando otros métodos clínicos. Un resultado

negativo no excluye la posibilidad de infección por MI.

13. Resultados esperados

La infección con el virus de Epstein-Barr (VEB) en adolescentes

o adultos jóvenes causa mononucleosis infecciosa (MI) en el

35-50% de los casos notificados.

1,5

La incidencia de MI

asociada a VEB en los EE.UU. se ha estimado en 45 por

100.000 y es la más alta en adolescentes y adultos jóvenes,

aproximadamente 2 de cada 1.000. No existe un patrón

estacional para la infección por VEB. El periodo de incubación

es de 10 a 60 días, mientras que en niños y adolescentes es

habitualmente de 7 a 14 días.

14. Características del rendimiento

Sensibilidad

Se ha evaluado el test NADAL® Mononucleosis con muestras

confirmadas positivas o negativas por un test de aglutinación

en portaobjetos disponible comercialmente. El test de

aglutinación en portaobjetos sirvió como método de

referencia para el test NADAL® Mononucleosis. El resultado

muestra que la sensibilidad del test NADAL® Mononucleosis es

>99,9% en relación al test de aglutinación en portaobjetos.

Especificidad

El test NADAL® Mononucleosis utiliza antígenos altamente

específicos para los anticuerpos anti-VEB en sangre completa,

suero o plasma. Los resultados muestran que la especificidad

del test NADAL® Mononucleosis es 98,9% en relación al test

de aglutinación en portaobjetos.

Test NADAL® Mononucleosis frente a test de aglutinación en

portaobjetos.

Test de aglutinación en

portaobjetos

Test NADAL®

Mononucleosis

Positivo Negativo Total

Positivo 60 1 61

Negativo 0 89 89

Total 60 90 150

Sensibilidad relativa: >99,9% (95,1% - 100%)*

Especificidad relativa: 98,9% (94% - 99,9%)*

Concordancia general: 99,3% (96,3% - 99,9%)*

*95% intervalo de confianza

Sustancias interferentes

Se añadieron los siguientes analitos a las concentraciones

indicadas a muestras de plasma y suero negativas y

medianamente positivas (confirmadas con ELISA) y se

analizaron por triplicado.

Analito Concentración

Ácido ascórbico 20 mg/mL

Hemoglobina 1000 mg/dL

Ácido gentísico 20 mg/dL

Ácido oxálico 60 mg/dL

Bilirrubina 1000 mg/dL

Ácido úrico 20 mg/mL

Acetaminofeno 20 mg/dL

Ácido acetilsalicílico 20 mg/dL

Metanol 10%

Creatina 200 mg/dL

Albúmina 2000 mg/dL

Cafeína 20 mg/dL

Los analitos no mostraron ninguna interferencia con el test

NADAL® Mononucleosis. No hubo diferencias evidentes entre

los resultados obtenidos con tres lotes de test.

Precisión

Variabilidad interlote e intralote

Se analizaron tres lotes independientes de test NADAL®

Mononucleosis con muestras de suero y plasma negativas así

como débilmente, medianamente y altamente positivas en

determinaciones de 10 veces. Todos los resultados cumplieron

con las expectativas. No se obtuvieron resultados divergentes

dentro de las determinaciones de 10 veces o entre los

diferentes lotes.

Reacciones cruzadas

Se analizaron las muestras positivas para los siguientes

parámetros con el test NADAL® Mononucleosis:

FR VHC

HBsAg TB

HBeAg VIH

HBeAb Sífilis

HBcAb

No se observaron reacciones cruzadas, lo cual indica que el

test NADAL® Mononucleosis tiene un alto grado de

especificidad con los anticuerpos anti-VEB humanos.

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15. Referencias

1. Hickey SM, Strasburger VC. What Every Pediatrician Should Know About Infectious

Mononucleosis In Adolescents. Pediatr Clin North Am. 1997;44(6):1541-56.

2. Omori M. Mononucleosis http://www.emedicine.com/EMERG/topic309.htm

3. Linde A. Diagnosis of Epstein-Barr-Virus-related diseases. Scand J Infect Dis Suppl.

1996; 100:83-8.

4. Papesch M, Watkins R. Epstein-Barr-Virus infectious mononucleosis. Clin

Otolaryngol. 2001; 26(1):3-8.

5. CDC National Center for Infectious Diseases. EBV & IM:

http://www.cdc.gov/ncidod/diseases/ebv.htm

Rev. 1, 2019-07-04 GP

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1. Scopo del test

Il Test rapido NADAL® Mononucleosis è un immunodosaggio

cromatografico per l`individuazione qualitativa degli anticorpi

eterofili del virus di Epstein-Barr (EBV) in campioni di sangue

intero, siero oppure plasma. Il test è concepito come supporto

nella diagnosi di una Mononucleosi infettiva (IM) e solo per

uso professionale.

2. Introduzione e Significato Clinico

La Mononucleosi Infettiva (IM) è causata dal virus di Epstein-

Barr (EBV), membro della famiglia dei virus herpes. I sintomi

dell`IM sono: febbre, gola irritata e ghiandole linfatiche

ingrossate. Raramente, possono verificarsi anche problemi del

sistema nervoso centrale oppure cardiaci. La diagnosi di IM è

fatta basandosi sulla presenza di anticorpi eterofili anti-EBV.

Gli anticorpi eterofili anti-EBV appartengono alla classe degli

IgM. Sono presenti nell`80-90% dei casi acuti di IM e possono

essere rilevati nel 60-70% dei pazienti durante la prima

settimana di malattia clinica.

1,2,3,4

Il Test NADAL® Mononucleosis è un test semplice che utilizza

un estratto di eritrociti bovini per individuare qualitativa-

mente e selettivamente gli anticorpi eterofili anti-EBV in

campioni di sangue intero, siero oppure plasma in pochi

minuti.

3. Principio del Test

Il Test NADAL® Mononucleosis è un immunodosaggio a flusso

laterale per l`individuazione qualitativa degli anticorpi eterofili

del virus di Epstein-Barr (EBV) in campioni di sangue intero,

siero oppure plasma.

In questo test, gli antigeni estratti dagli eritrociti bovini sono

immobilizzati nella regione della linea del test (T) del test a

cassetta. Durante il test, il campione reagisce con altri antigeni

estratti dagli eritrociti bovini che rivestono le particelle

applicate sul tampone coniugato. Il complesso migra

cromatograficamente lungo la membrana interagendo con gli

antigeni immobilizzati. Se il campione contiene anticorpi

eterofili anti-EBV, compare una linea colorata nella regione

della linea del test (T), indicando un risultato positivo. Se il

campione non contiene anticorpi eterofili anti-EBV, non

compare alcuna linea nella regione della linea del test,

indicando un risultato negativo.

Una linea colorata dovrebbe sempre comparire nella regione

della linea di controllo (C) fungendo da controllo procedurale

interno. Tale linea indica che è stato aggiunto il giusto volume

di campione e che la migrazione lungo la membrana è

avvenuta correttamente.

4. Reagenti e Matreriali Forniti

5 test a cassetta NADAL® Mononucleosis, pipette monouso

incluse

1 tampone

1 Controllo Positivo (plasma umano diluito contenente

anticorpi eterofili anti-EBV, 0,09% azoturo di sodio)

1 Controllo Negativo (plasma umano diluito, 0,09% azoturo

di sodio)

1 istruzioni per l`uso

5. Altri materiali richiesti

Contenitore di raccolta del campione

Centrifuga (per siero/plasma)

Timer

Bisturi (solo per il prelievo di sangue intero)

Tubicini capillari eparinizzati e pompetta di gomma (solo

per il prelievo di sangue intero)

6. Conservazione e Stabilità

I kit vanno conservati a 2-30°C ed utilizzati prima della data di

scadenza riportata sulla confezione. I test a cassetta

rimangono stabili fino alla data di scadenza riportata sulla

confezione. I test a cassetta vanno conservati nella confezione

fino al loro utilizzo. Non congelare. Non utilizzare i test oltre la

data di scadenza.

7. Avvertenze e Precauzioni

Esclusivamente per uso diagnostico professionale in-vitro.

Leggere attentamente la procedura del test prima di

eseguirlo.

Non utilizzare il test oltre la data di scadenza riportata sulla

confezione.

Non utilizzare il test se la confezione dovesse risultare

danneggiata.

Non riutilizzare i test.

Non aggiungere i campioni all`area di risultato (result area).

Al fine di evitare la contaminazione non toccare l`area di

risultato (result area).

Evitare il rischio di contaminazione incrociata utilizzando

sempre un nuovo contenitore di raccolta per ogni

campione.

Non mangiare, bere o fumare nei luoghi in cui vengono

trattati i campioni ed i test.

Indossare abiti protettivi quali camici da laboratorio, guanti

monouso ed occhiali protettivi quando vengono trattati i

campioni.

Considerare tutti i campioni come potenzialmente infettivi.

Osservare le normali precauzioni contro rischi

microbiologici e seguire le procedure standard per il

corretto smaltimento dei campioni.

Il kit fornito contiene prodotti di origine animale. La

conoscenza certificata della provenienza e/o condizione

sanitaria degli animali non esclude del tutto l`assenza di

agenti patogeni trasmissibili. Si raccomanda, pertanto, che

questi prodotti vengano trattati come potenzialmente

infettivi ed utilizzati nel rispetto delle normali pratiche di

sicurezza (ad esempio, non ingerire o inalare).

Umiditá o temperature elevate possono influenzare in

maniera negativa i risultati del test.

I materiali utilizzati nello svolgimento del test vanno smaltiti

nel rispetto delle regolamentazioni locali.

8. Preparazione e Raccolta del Campione

Il test NADAL® Mononucleosis può essere eseguito su

campioni di sangue intero (ottenuti tramite prelievo venoso o

puntura del polpastrello), siero o plasma.

Campioni di sangue intero, prelievo venoso o puntura del

polpastrello:

Raccogliere i campioni di sangue contenenti anticoagulanti

(sodio o eparina litio, potassio oppure sodio EDTA, ossalato di

sodio, citrato di sodio) seguendo le procedure di laboratorio

standard.

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Campioni di sangue intero, prelievo venoso o puntura del

polpastrello:

 Lavare la mano del paziente con sapone ed acqua calda o

pulire con alcol la zona da incidere. Fare asciugare.

 Massaggiare la mano del paziente senza toccare la zona del

prelievo sfregando la mano verso il basso in direzione del

dito medio o dell`anulare.

 Incidere la punta del dito utilizzando un bisturi sterile.

Asciugare la prima goccia di sangue.

 Sfregare leggermente la mano del paziente dal polso al

palmo fino al dito inciso affinchè si formi una nuova goccia

di sangue.

Separare siero e plasma immediatamente al fine di evitare

emolisi. Utilizzare solo campioni chiari non emolizzati

Eseguire il test immediatamente dopo la raccolta del

campione. Non lasciare il test a temperatura ambiente per

lunghi periodi di tempo. Campioni di siero e plasma possono

essere conservati tra 2-8°C per un massimo di 3 giorni. Per

conservazioni prolungate, i campioni vanno conservati a -20°C.

I campioni di sangue intero raccolti attraverso prelievo venoso

vanno conservati a 2-8°C nel caso in cui il test venga svolto

entro 2 giorni dalla raccolta del campione. Non congelare i

campioni di sangue intero. I campioni di sangue intero raccolti

attraverso puntura del polpastrello, andrebbero testati

immediatamente. Portare i campioni a temperatura ambiente

prima di eseguire il test. I campioni congelati vanno fatti

scongelare completamente e mescolati adeguatamente prima

di eseguire il test. Evitare episodi ripetuti di congelamento e

scongelamento dei campioni. Nel caso in cui si intenda spedire

i campioni, questi andrebbero imballati seguendo le

regolamentazioni locali in materia di trasporto di agenti

eziologici.

9. Procedura del Test

Portare i test, i campioni, soluzioni e/o controlli a

temperatura ambiente (15-30°) prima di eseguire il test.

1. Rimuovere il test a cassetta dalla confezione ed utilizzarlo

nel più breve tempo possibile. Il test a cassetta andrebbe

utilizzato immediatamente dopo l`apertura della

confezione. Etichettare il test a cassetta con l`identificativo

del paziente o controllo.

2. a) Per i campioni di siero o plasma:

Mantenendo il contagocce

verticalmente, aggiungere 1

goccia (circa 25 μL) di siero

oppure plasma nel pozzetto di

raccolta del campione (S) del test

a cassetta.

b) Per campioni di sangue intero

raccolto tramite prelievo venoso:

Mantenendo verticalmente il

contagocce, aggiungere 2 gocce

(circa 50 μL) di sangue intero nel

pozzetto di raccolta del campione

(S) del test a cassetta.

c) Per campioni di sangue intero

prelevato tramite puntura del

polpastrello:

Appoggiare il tubo capillare finchè

non sia riempito di sangue per circa

50 μL. Evitare la formazione di bolle

d`aria. Posizionare la pompetta di

gomma al lato opposto del tubo

capillare e premere per trasferire il

campione di sangue nel pozzetto di

raccolta del campione (S) del test a

cassetta.

3. Mantenendo verticalmente il flacone

di soluzione, aggiungere 1 goccia

(circa 55 μL) di soluzione nel pozzetto

di raccolta del campione (S).

4. Avviare il timer.

5. Attendere la comparsa delle linee

colorate. Leggere il risultato del test

entro 5 minuti. Non interpretare i

risultati dopo più di 10 minuti.

10. Interpretazione dei risultati

Positivo:

Compaiono due linee colorate sulla

membrana. Una linea colorata nella

regione della linea di controllo (C) e una

linea nella regione della linea del test (T).

Nota bene:

L`intensità della linea del test nella regione della linea del test

(T) varia in base alla concentrazione degli anticorpi anti-EBV

presenti nel campione. Pertanto, qualsiasi sfumatura di colore

nell`area della linea del test (T) va considerata come indicativa

di risultato psitivo.

Negativo:

Si sviluppa una linea colorata nella

regione della linea di controllo (C). Non

compare alcuna linea visibile nella

regione della linea del test (T).

Non valido:

La linea di controllo (C) non compare. I

risultati di qualsiasi test che non abbia

prodotto alcuna linea di controllo entro i

tempi di lettura indicati, non vanno presi

in considerazione. In tal caso si consiglia

di rivedere la procedura e ripetere il test

utilizzando un nuovo test a cassetta. Se il

problema persiste, si consiglia di

interrompere immediatamente l`utilizzo

dello stesso lotto di test e contattare il

proprio distributore.

Un volume insufficiente di campione, procedure operative

scorrette o test scaduti sono tra le principali cause che

potrebbero impedire la comparsa della linea di controllo.

11. Controllo Qualità

Un controllo procedurale interno è inserito nel test a cassetta:

La linea colorata che compare in corrispondenza della regione

della linea di controllo (C) è da considerarsi un controllo

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procedurale interno. Ciò conferma che è stato aggiunto il

giusto volume di campione, che la migrazione lungo la

membrana è avvenuta correttamente e che sono state

applicate le corrette tecniche procedurali.

La Buona Pratica di Laboratorio (GLP) raccomanda l`impiego di

metodi di controllo al fine di confermare la corretta

performance del kit di test.

Procedura per l`esecuzione del Controllo Qualità Esterno

1. Mantenendo ogni flacone verticalmente, aggiungere 1

goccia (circa 40 μL) di soluzione controllo positivo oppure

negativo nel pozzetto di raccolta del campione (S) del test a

cassetta. Poi, mantenendo il flacone verticalmente,

aggiungere 1 goccia (circa 55 μL) di soluzione nel pozzetto

di raccolta del campione (S).

2. Continuare con il passaggio 4 "Procedura del Test".

3. Se i controlli non mostrano i risultati attesi, non utilizzare i

risultati ottenuti. Ripetere il test o contattare il proprio

distributore.

12. Limiti del Test

Il test NADAL® Mononucleosis è un test per uso diagnostico

professionale in-vitro. Il test può essere utilizzato per la

rilevazione degli anticorpi anti-EBV in campioni di sangue

intero, siero oppure plasma. In ogni caso, nè il valore

quantitativo nè il grado di aumento della concentrazione

degli anticorpi anti-EBV possono essere determinati con

questo test qualitativo.

Il test NADAL® Mononucleosis rileva solo gli anticorpi anti-

EBV nel campione e non va utilizzato come unico criterio

per la diagnosi di infezioni da mononucleosi infettiva.

Come per tutti i test diagnostici, tutti i risultati ottenuti

andrebbero interpretati in congiunzione con altre

informazioni cliniche reperibili dal medico.

Se il risultato del test è negativo ma i sintomi clinici

persistono, si consiglia di eseguire altri test utilizzando altri

metodi clinici di analisi. Un risultato negativo non preclude

la possibilità di infezioni da IM.

13. Risultati attesi

Le infezioni causate dal virus di Epstein-Barr (EBV) contratte

durante l`adolescenza o la giovane età adulta portano allo

sviluppo di Mononucleosi infettiva (IM) nel 35%- 50% dei casi

riportati.

1,5

L`incidenza dell`IM associata all`EBV negli USA è

stata stimata al 45 per 100,000. Raggiunge il picco negli

adolescenti e giovani adulti - circa 2 su 1000. Non esistono

legami stagionali con l`incidenza delle infezioni EBV. Il periodo

di incubazione varia tra 10 e 60 giorni, anche se un periodo di

incubazione tra i 7 e i 14 giorni è comune per i bambini e gli

adolescenti.

14. Caratteristiche Tecniche

Sensibilità

Il test NADAL® Mononucleosis è stato valutato con campioni

confermati positivi o negativi utilizzando un test di

agglutinazione su vetrino normalmente reperibile in

commercio. Il test di agglutinazione su vetrino serve come

metodo di riferimento per il test NADAL® Mononucleosis. Il

risultato mostra che la sensibilità del Test NADAL®

Mononucleosis è >99,9% in base al test di agglutinazione su

vetrino.

Specificità

Il Test NADAL® Mononucleosis utilizza antigeni altamente

specifici per glianticorpi anti-EBV in campioni di sangue intero,

siero oppure plasma. I risultati mostrano che la specificità del

Test NADAL® Mononucleosis è del 98,9% in relazione al Test

di agglutinazione su vetrino.

Test NADAL® Mononucleosis vs. Test di agglutinazione su

vetrino

Test di agglutinazione su vetrino

Test NADAL®

Mononucleosis

Positivo Negativo Totale

Positivo 60 1 61

Negativo 0 89 89

Totale 60 90 150

Sensibilità Relativa: >99,9% (95,1% - 100%)*

Specificità Relativa: 98,9% (94% - 99,9%)*

Andamento complessivo: 99,3% (96,3% - 99,9%)*

*95% Accuratezza

Sostanze interferenti

I campioni di plasma e siero negativi e medio positivi

(confermati ELISA) sono stati adulterati con gli analiti alle

concentrazioni riportate sotto ed analizzati in ripetizioni da

tre.

Analita Concentrazione

Acido Ascorbico 20 mg/ml

Emoglobina 1000 mg/dl

Acido Gentisico 20 mg/dl

Acido Ossalico 60 mg/dl

Bilirubina 1000 mg/dl

Acido Urico 20 mg/ml

Acetaminofene 20 mg/dl

Acido Acetilsalicilico 20 mg/dl

Metanolo 10%

Creatina 200 mg/dl

Albumina 2000 mg/dl

Caffeina 20 mg/dl

Gli analiti non hanno mostrato alcuna interferenza con il Test

NADAL® Mononucleosis. Non c`erano differenze evidenti tra i

risultati ottenuti con questi tre lotti di test.

Precisione

Variabilità inter ed intra-lotto

Sono stati analizzati tre lotti indipendenti del Test NADAL®

Mononucleosis con campioni di siero e plasma bassi, medi e

alti positivi e negativi in 10 ripetizioni. Tutti i risultati

corrispondono alle aspettative. Non sono stati ottenuti

risultati discostanti nè tra le 10 ripetizioni nè tra i differenti

lotti.

Reattività incrociata

I campioni positivi ai seguenti parametri sono stati analizzati

con il Test NADAL® Mononucleosis:

RF HCV

HBsAg TB

HBeAg HIV

HBeAb Sifilide

HBcAb

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Non è stata riscontrata alcuna reattività incrociata indicando

che il Test NADAL® Mononucleosis ha un elevato grado di

specificità per glianticorpi anti-EBV.

15. Bibliografía

1. Hickey SM, Strasburger VC. What Every Pediatrician Should Know About Infectious

Mononucleosis In Adolescents. Pediatr Clin North Am. 1997;44(6):1541-56.

2. Omori M. Mononucleosis http://www.emedicine.com/EMERG/topic309.htm

3. Linde A. Diagnosis of Epstein-Barr-Virus-related diseases. Scand J Infect Dis Suppl.

1996; 100:83-8.

4. Papesch M, Watkins R. Epstein-Barr-Virus infectious mononucleosis. Clin

Otolaryngol. 2001; 26(1):3-8.

5. CDC National Center for Infectious Diseases. EBV & IM:

http://www.cdc.gov/ncidod/diseases/ebv.htm

Rev. 1, 2019-07-04 BN

POLSKI Test NADAL® Mononucleosis (Nr prod. 252017N-05)

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1. Zastosowanie

NADAL® Mononucleosis jest testem immunochromato-

graficznym do jakościowego oznaczania heterofilnych

przeciwciał przeciw wirusowi Epsteina-Barr (EBV) w ludzkich

próbkach krwi pełnej, surowicy lub osocza. Test ten służy jako

środek pomocniczy przy diagnozie infekcji mononukleozą

zakaźną (IM) i przeznaczony jest wyłącznie do profesjonalnego

użytku.

2. Wprowadzenie i znaczenie diagnostyczne

Infekcyjna mononukleoza (IM) wywoływana jest przez wirus

Epsteina Barr (EBV), który należy do rodziny wirusów

opryszczki. Objawy przy IM to gorączka, bóle gardła

i opuchnięte węzły chłonne. W bardzo nielicznych

przypadkach mogą występować problemy z sercem

i centralnym układem nerwowym. Diagnoza IM następuje na

podstawie obecności heteroflinych przeciwciał przeciw EBV.

Heterofilne przeciwciała przeciw EBV należą do klasy IgM.

Występują w 80-90% ostrych przypadków IM i mogą zostać

wykryte u 60-70% pacjentów podczas pierwszego tygodnia

klinicznego zachorowania.

1,2,3,4

NADAL® Mononucleosis jest prostym testem, który używa

ekstraktu wołowych erytrocytów w celu jakościowego

i selektywnego oznaczania w ciągu kilku minut heterofilnych

przeciwciał przeciw EBV we krwi pełnej, surowicy lub osoczu.

3. Zasada działania testu

NADAL® Mononucleosis jest testem immunochromato-

graficznym typu Lateral Flow do jakościowego oznaczania

heterofilnych przeciwciał przeciw wirusowi Epsteina-Barr

(EBV) w próbkach krwi pełnej, surowicy lub osocza.

W teście antygeny wyekstrahowane z wołowych erytrocytów

unieruchomione są w obszarze linii testowej na kasecie

testowej. Podczas badania próbka reaguje z kolejnymi

antygenami wyekstrahowanymi z wołowych erytrocytów,

które są powleczone na cząsteczkach i nałożone na płytkę

próbki. Mieszanina ta wędruje chromatograficznie wzdłuż

membrany i wchodzi w interakcję z unieruchomionymi

antygenami. Jeżeli próbka zawiera heterofilne przeciwciała

przeciw EBV, w obszarze linii testowej pojawi się kolorowa

linia, która wskazuje na pozytywny wynik. Jeżeli próbka nie

zawiera heterofilnych przeciwciał przeciw EBV w obszarze linii

testowej nie pojawi się kolorowa linia, co jest jednoznaczne

z wynikiem negatywnym.

Jako kontrola procesowa w obszarze linii kontrolnej zawsze

musi pojawić się kolorowa linia, która potwierdza, że

zastosowana została wystarczająca ilość próbki oraz że

membrana jest wystarczająco nasączona.

4. Materiały zawarte w zestawie

5 testów NADAL® Mononucleosis wraz z jednorazowymi

pipetami

1 bufor “Buffer“

1 kontrola pozytywna „Positive Control“ (rozcieńczone

ludzkie osocze, zawierające heterofilne przeciwciała przeciw

EBV, 0,09% azydku sodu)

1 kontrola negatywna „ Negative – Control“ (rozcieńczone

ludzkie osocze, 0,09 % azydku sodu)

1 instrukcja obsługi

5. Dodatkowo potrzebne materiały

Pojemniki na próbkę

Wirówka (tylko dla surowicy/osocza)

Stoper

Lanceta (dla krwi pełnej z nakłucia palca)

Ewentualnie kapilara z nasadką (tylko dla krwi pełnej

z nakłucia palca)

6. Data ważności i przechowywanie odczynników

Zestawy testowe powinny być przechowywane w tempera-

turze 2-30°C i stosowane do daty użyteczności podanej na

opakowaniu. Kasety testowe są stabilne do daty użyteczności

podanej na opakowaniu. Kasety testowe powinny pozostać

w zamkniętym opakowaniu foliowym do momentu

przeprowadzenia badania. Nie zamrażać testów. Testów nie

używać po upływie daty ważności.

7. Ostrzeżenia i środki ostrożności

Tylko do profesjonalnej diagnostyki in-vitro.

Przed przeprowadzeniem testu należy dokładnie przeczytać

całą instrukcję obsługi.

Nie używać testu po upływie daty użyteczności podanej na

opakowaniu.

Nie używać testu, jeżeli opakowanie foliowe jest

uszkodzone.

Nie używać ponownie tych samych testów.

Nie pipetować próbek na pole reakcyjne (pole wyniku).

Aby uniknąć zanieczyszczenia, nie należy dotykać pola

reakcyjnego (pola wyniku).

W celu uniknięcia zanieczyszczenia krzyżowego należy

używać każdorazowo nowej probówki dla każdej próbki.

Nie jeść, nie pić ani nie palić w obszarze pracy z próbkami

lub zestawem testowym.

Podczas kontaktu z próbkami, stosować odzież ochronną,

taką jak fartuch, jednorazowe rękawiczki oraz okulary

ochronne.

Traktować wszystkie próbki tak, jakby zawierały zakaźne

odczynniki. Należy zwrócić uwagę na zaistniałe środki

ostrożności dla mikrobiologicznego ryzyka, podczas

wszystkich procesów jak również standardowych dyrektyw

dla odpowiedniej utylizacji próbek.

Test ten zawiera produkty pochodzenia zwierzęcego.

Certyfikowana wiedza o pochodzeniu i/lub o stanie

sanitarnym zwierząt nie gwarantują braku przenoszonych

patogenów. Dlatego zaleca się, aby te produkty były

traktowane jako potencjalnie zakaźne. Posługując się nimi,

należy przestrzegać standardowych środków ostrożności

(np. unikać połknięcia lub wdychania).

Wilgoć oraz wysokie temperatury mogą mieć wpływ na

wyniki testu.

Zużyte materiały testowe powinny być zutylizowane

zgodnie z lokalnymi zaleceniami.

8. Pobieranie, przygotowywanie i przechowywanie próbek

Test NADAL® Mononucleosis może być przeprowadzony

z próbki krwi pełnej (żylnej lub z opuszka palca), surowicy lub

osocza.

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Próbki krwi pełnej z punkcji żylnej

Próbki krwi z antykoagulantami (heparyna sodowa lub litowa,

EDTA potasowe lub sodowe, szczawian sodu, cytrynian sodu)

zebrać zgodnie ze standardowymi procesami laboratoryjnymi.

Próbki krwi pełnej z nakłucia palca

Umyć dłoń pacjenta przy pomocy mydła i ciepłej wody,

a następnie przemyć wacikiem nasączonym alkoholem.

Pozostawić do osuszenia.

Masować dłoń, nie dotykając przy tym miejsca nakłucia.

Pocierać dłoń w kierunku opuszka palca środkowego lub

serdecznego.

Nakłuć skórę przy pomocy sterylnej lancety. Wytrzeć

pojawiającą się krew.

Pocierać ostrożnie dłoń od nadgarstka do powierzchni dłoni

i do palca, tak, aby w punkcie nakłucia wytworzyła się

okrągła kropla.

Jak najszybciej oddzielić surowicę lub osocze z krwi w celu

uniknięcia hemolizy. Używać wyłącznie przejrzystych i nie

hemolitycznych próbek.

Przeprowadzenie testu powinno nastąpić bezpośrednio po

pobraniu próbki. Nie przechowywać próbek w temperaturze

pokojowej przez dłuższy okres czasu. Próbki surowicy/osocza

mogą być przechowywane przy temperaturze 2-8°C do 3 dni.

W celach dłuższego przechowywania próbki powinny być

przechowywane w temperaturze poniżej -20°C. Krew pełna

z żyły powinna być przechowywana przy temperaturze 2-8°C,

jeżeli test zostanie przeprowadzony w ciągu 2 dni po pobraniu

próbki. Nie zamrażać próbek z krwi pełnej. Próbki krwi pełnej

z palca powinny być przebadane bezpośrednio. Przed

przeprowadzeniem testu, należy doprowadzić próbki do

temperatury pokojowej. Zamrożone próbki powinny zostać

całkowicie rozmrożone i dobrze wymieszane przed

rozpoczęciem testu. Próbki nie mogą być ponownie zamrażane

i rozmrażane. Jeżeli próbki mają być wysłane, to powinny

zostać zapakowane zgodnie z lokalnymi przepisami

dotyczącymi środków etiologicznych.

9. Przeprowadzanie testu

Przed przeprowadzeniem testu, doprowadzić wszystkie testy,

próbki, i/oraz kontrole do temperatury pokojowej (15-30°C).

1. Wyciągnąć kasetę testową z zamkniętego opakowania

foliowego i położyć ją na czystą i równą powierzchnię.

Kaseta testowa musi być użyta bezpośrednio po otwarciu

opakowania foliowego. Oznaczyć kasetę z danymi pacjenta

oraz identyfikacją kontrolną.

2. a) dla próbek surowicy lub osocza

Trzymać pipetę pionowo i dodać 1

kroplę (ok. 25μL) surowicy lub osocza

do zagłębienia próbki (S) kasety

testowej.

b) dla próbek krwi pełnej z nakłucia

żyły

Trzymać pipetę pionowo i dodać 2

krople (ok. 50μL) krwi pełnej do

zagłębienia próbki (S) kasety testo-

wej.

c) Dla próbek krwi pełnej z nakłucia

palca

Pobrać przy pomocy kapilary tyle

krwi, aby kapilara napełniła się do

poziomu ok. 50 μL. Unikać wytwar-

zania się pęcherzyków powietrza.

Nałożyć nasadkę na górny koniec

kapilary i ścisnąć ją, aby dodać próbkę

krwi pełnej do zagłębienia próbki (S)

kasety testowej.

3. Trzymać buteleczkę z buforem

pionowo i dodać 1 kroplę (ok. 55 μL)

bufora.

4. Włączyć stoper.

5. Poczekać na pojawienie się koloro-

wej/owych linii. Wynik interpretować

dokładnie po 5 minutach. Nie

interpretować wyników po upływie

więcej jak 10 minut.

10. Interpretacja wyników

Pozytywny

Na membranie pojawią się w 2 kolorowe

linie. Jedna linia pojawi się w obszarze

linii kontrolnej (C), druga linia pojawi się

w obszarze linii testowej (T).

Wskazówka:

Intensywność kolorów w obszarze linii testowej (T) może

różnić się, w zależności od stężenia przeciwciał przeciw EBV,

które zawarte są w próbce. Dlatego każdy odcień w obszarze

linii testowej (T) powinien być traktowany jako pozytywny

wynik.

Negatywny

W obszarze linii kontrolnej (C) pojawia

się kolorowa linia. W obszarze linii

testowej (T) nie pojawia się kolorowa

linia.

Nieważny

Linia kontrolna (C) nie pojawia się.

Wyniki testów, które po ustalonym

czasie odczytu nie wytworzyły linii

kontrolnej, muszą zostać odrzucone.

Sprawdzić przebieg procesu i powtórzyć

badanie przy pomocy nowej kasety

testowej. Jeżeli problem będzie

występował nadal, nie używać już tego

zestawu testowego i skontaktować się z

dystrybutorem.

Niewystarczająca objętość próbki, przeterminowane testy lub

niewłaściwy sposób użytkowania testu są najprawdopodo-

bniejszymi przyczynami niepojawienia się linii kontrolnej.

11. Kontrola jakości

Test kasetowy zawiera wewnętrzną kontrolę procesową:

pojawiająca się w obszarze linii kontrolnej (C) kolorowa linia,

traktowana jest jako kontrola procesowa. Potwierdza ona

dodanie wystarczającej ilości próbki, prawidłowe przepro-

wadzenie testu oraz wystarczające nasączenie membrany.

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Dobra praktyka laboratoryjna zaleca stosowanie materiałów

kontrolnych do oznaczania poprawnej wydajności zestawu

testowego.

Przeprowadzenie zewnętrznego testu kontrolnego.

1. Trzymać buteleczkę pionowo i dodać najpierw 1 kroplę (ok.

40 µl) pozytywnego lub negatywnego roztworu kon-

trolnego do zagłębienia próbki (S) kasety testowej

i następnie dodać 1 kroplę (ok. 55 µl) buforu.

2. Kontynuować dalej od punktu 5 „Przeprowadzenie testu”.

3. Nie stosować testów, jeżeli kontrole nie spełniają

oczekiwanych wyników. Powtórzyć przeprowadzenie testu

lub skontaktować się z dystrybutorem.

12. Ograniczenia testu

Test NADAL® Mononucleosis przeznaczony jest wyłącznie

do profesjonalnej diagnostyki in-vitro. Test powinien być

wykorzystywany wyłącznie do oznaczania przeciwciał

przeciw wirusowi Epsteina-Barr w próbkach krwi pełnej,

surowicy lub osocza. Przy pomocą tego jakościowego testu

nie można określić ilościowej wartości, ani wzrostu stężenia

przeciwciał przeciw EBV.

Test NADAL® Mononucleosis wskazuje wyłącznie obecność

przeciwciał przeciw EBV w próbce i nie powinien być

traktowany jako jedyne kryterium podczas diagnozy infekcji

IM.

W przypadku testów diagnostycznych, wszystkie wyniki

muszą być porównywane razem z innymi informacjami

klinicznymi, które są udostępnione lekarzowi.

Jeżeli wynik testu jest negatywny, a objawy kliniczne dalej

będą się utrzymywać, zaleca się przeprowadzenie

dodatkowych badań przy zastosowaniu innych metod

klinicznych. Wynik negatywny w żadnym wypadku nie

wyklucza możliwej infekcji IM.

13. Oczekiwane wyniki

W 35%-50% odnotowanych przypadków, wirus Epsteina Barr

(EBV) wywołuje u młodzieży lub młodych dorosłych infekcyjną

mononukleozę (IM).

1,5

Pojawienie się infekcyjnej mononukleozy (IM) powiązanej

z EBV w Stanach Zjednoczonych Ameryki zostało oszacowane

na poziomie 45 na 100.000 przypadków i jest najwyższe wśród

młodzieży i młodych dorosłych - ok. 2 przypadki na 1.000. Przy

infekcjach EBV nie ma schematu zależnego od pory roku. Czas

inkubacji wynosi 10-60 dni, chociaż u dzieci lub młodzieży

często pojawia się czas inkubacji 7-14 dni.

14. Charakterystyka testu

Czułość

Test NADAL® Mononuklesis został zinterpretowany przy

pomocy próbek, które potwierdzone zostały jako negatywne i

pozytywne przy pomocy komercyjnego testu aglutynacji

lateksowej. Test aglutynacji lateksowej został zastosowany,

jako metoda porównawcza dla testu NADAL® Mononucleosis.

Wynik pokazuje, że czułość testu NADAL® Mononucleosis

wynosi względnie >99,9% w porównaniu do testu aglutynacji

lateksowej.

Swoistość

Test NADAL®Mononucleosis stosuje antygeny, które są

wysokospecyficzne dla przeciwciał przeciw EBV we krwi

pełnej, surowicy lub osoczu. Wyniki pokazują, że swoistość

testu NADAL® Mononucleosis wynosi względnie 98,9%

w porównaniu do testu aglutynacji lateksowej.

Test NADAL® Mononucleosis vs. test aglutynacji lateksowej.

Test aglutynacji lateksowej

Test NADAL®

Mononucleosis

Pozyty-

wny

Negaty-

wny Suma

Pozytywny 60 1 61

Negatywny 0 89 89

Suma 60 90 150

Relatywna czułość: >99,9% (95,1% - 100%)*

Relatywna swoistość: 98,9% (94% - 99,9%)*

Ogólna zgodność: 99,3% (96,3% - 99,9%)*

*95% przedział ufności

Substancje interferujące

Negatywnym i średnio pozytywnym próbkom osocza

i surowicy (potwierdzonym testem ELISA) dodano anality

o poniżej wymienionych stężeniach i przebadano

w tryplikatach.

Analit Stężenie

Kwas askorbinowy 20 mg/ml

Hemoglobina 1000 mg/dl

Kwas gentyzynowy 20 mg/dl

Kwas szczawiowy 60 mg/dl

Bilirubina 1000 mg/dl

Kwas moczowy 20 mg/ml

Paracetamol 20 mg/dl

Kwas acetylosalicylowy 20 mg/dl

Metanol 10%

Kreatyna 200 mg/dl

Albumina 2000 mg/dl

Kofeina 20 mg/dl

Anality nie wykazały żadnych interferencji z testem NADAL®

Mononucleosis. Nie było oczywistych różnić pomiędzy

wynikami trzech serii testów.

Dokładność

Zróżnicowanie serii śródtestowych i międzytestowych

Trzy niezależne serie testu NADAL® Mononucleosis zostało

przebadanych zarówno z negatywnymi próbkami, jak również

ze średnio i wysoko pozytywnymi próbkami surowicy i osocza,

w 10-cio krotnych oznaczeniach. Wszystkie wyniki odpo-

wiadały oczekiwaniom. Podczas 10-cio krotnych oznaczeń ew.

pomiędzy różnymi seriami, nie osiągnięto odmiennych

wyników.

Reakcje krzyżowe

Na następujące parametry pozytywne próbki zostały

przetestowane przy pomocy testu kasetowego NADAL®

Mononucleosis:

RF HCV

HbsAg TB

HbeAg HIV

HbeAb Syfilis

HBcAb

Nie stwierdzono reakcji krzyżowych. Wykazuje to, że NADAL®

Mononucleosis w znacznym stopniu jest specyficzny na ludzkie

przeciwciała przeciw EBV.

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15. Bibliografia

1. Hickey SM, Strasburger VC. What Every Pediatrician Should Know About Infectious

Mononucleosis In Adolescents. Pediatr Clin North Am. 1997;44(6):1541-56.

2. Omori M. Mononucleosis http://www.emedicine.com/EMERG/topic309.htm

3. Linde A. Diagnosis of Epstein-Barr-Virus-related diseases. Scand J Infect Dis Suppl.

1996; 100:83-8.

4. Papesch M, Watkins R. Epstein-Barr-Virus infectious mononucleosis. Clin

Otolaryngol. 2001; 26(1):3-8.

5. CDC National Center for Infectious Diseases. EBV & IM:

http://www.cdc.gov/ncidod/diseases/ebv.htm

Rev. 1, 2019-07-04 AM

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1. Uso Previsto

O teste NADAL® Mononucleosis é um imunoensaio cromato-

gráfico, rápido, para a detecção qualitativa de anticorpos

heterófilos para o vírus Epstein-Barr (VEB) no sangue total,

soro ou plasma humano. O teste foi concebido para auxiliar no

diagnóstico da mononucleose infecciosa (MI) e apenas para

uso profissional.

2. Introdução e Significado Clínico

A mononucleose infecciosa (IM) é causada pelo vírus Epstein-

Barr (EBV), que é membro da família dos Herpesvírus. Os

sintomas da IM são: febre, dor de garganta e glândulas

linfáticas inchadas. Em casos muito raros, podem ocorrer

problemas cardíacos ou do sistema nervoso central. O

diagnóstico da IM é feito baseando-se na presença de

anticorpos heterófilos anti-EBV. Os anticorpos heterófilos anti-

EBV pertencem à classe IgM. Estes estão presentes em 80-90%

dos casos de IM aguda e podem ser detectados em 60-70%

dos pacientes durante a primeira semana de doença

clínica.

1,2,3,4

O teste NADAL® Mononucleosis é um teste simples que utiliza

um extracto de eritrócitos de bovinos, para detectar

qualitativamente e selectivamente anticorpos heterófilos anti-

EBV no sangue total, soro ou plasma em apenas alguns

minutos.

3. Princípio do Teste

O teste NADAL® Mononucleosis é um imunoensaio de fluxo

lateral para a detecção qualitativa de anticorpos heterófilos

do vírus Epstein-Barr (EBV) no sangue total, soro ou plasma.

Neste teste, antigénios extraídos de eritrócitos de bovinos são

imobilizados na região de linha de teste do teste cassete.

Durante o teste, a amostra reage com os antigénios extraídos

dos eritrócitos de bovinos que foram pré-revestidos em

partículas, as quais foram aplicadas em compressas conju-

gadas. A mistura migra cromatograficamente ao longo da

membrana e interage com os antigénios imobilizados. Se a

amostra contiver anticorpos heterófilos anti-EBV, surgirá uma

linha colorida na região de linha de teste, indicando um

resultado positivo. Se a amostra não contiver anticorpos

heterófilos anti-EBV, nenhuma linha colorida surgirá na região

da linha de teste, indicando um resultado negativo.

Como controlo de processo, deverá sempre surgir uma linha

colorida na região da linha de controlo (C), indicando que foi

adicionado um volume apropriado de amostra e que a

amostra percorreu a membrana de forma adequada.

4. Reagentes e Materiais Fornecidos

 5 testes cassete NADAL® Mononucleosis incluindo pipetas

descartáveis

 1 solução tampão

 1 controlo positivo (plasma humano diluído contendo

anticorpos heterófilos anti-EBV, 0.09% azida de sódio)

 1 controlo negativo (plasma humano diluído, 0.09% azida

de sódio)

 1 folheto informativo

5. Material Adicional Necessário

 Recipientes de recolha de amostras

 Centrifugadora (para soro/plasma)

 Cronómetro

 Lanceta (apenas para recolha de sangue total)

 Se necessário, tubos capilares de heparina e pompetes ou

pipetas (apenas para recolha de sangue total)

6. Armazenamento e Estabilidade

Os kits de teste devem ser armazenados entre 2-30°C e

utilizados antes de expirada a data de validade impressa na

embalagem. Os testes cassete encontram-se estáveis até à

data de validade indicada na embalagem. Os testes cassete

devem permanecer selados nas embalagens até serem

utilizados. Não congelar os testes. Não utilizar os testes após o

prazo de validade.

7. Avisos e Precauções

 Apenas para utilização profissional de diagnóstico in-vitro.

 Ler atentamente o procedimento de teste antes de realizar

o teste.

 Não utilizar o teste após a data de validade indicada na

embalagem.

 Não utilizar o teste caso a embalagem se encontre

danificada.

 Não reutilizar os testes.

 Não adicionar amostras à área de reação (área de

resultados).

 De modo a evitar uma contaminação, não tocar na área de

reação (área de resultados).

 Evitar contaminação cruzada utilizando um recipiente de

recolha de amostras novo para cada amostra obtida.

 Não comer, beber ou fumar na área de manuseamento de

amostras e kits de testes.

 Utilizar vestuário de protecção como batas, luvas

descartáveis e protecção ocular durante o manuseamento

das amostras.

 Manusear todas as amostras como potenciais agentes

infecciosos. Observar as regulamentações estabelecidas

respeitantes a riscos microbiológicos e ao tratamento de

resíduos durante todos os procedimentos.

 O kit de teste contém produtos de origem animal. O

certificado de origem e/ou estado sanitário dos animais não

garante completamente a ausência de agentes patogénicos

transmissíveis. Portanto, é recomendado que todos estes

produtos sejam tratados como potencialmente infeciosos e

manuseados de acordo com as precauções de segurança

habituais (p.e. não ingerir ou inalar).

 Humidade e temperatura podem afectar adversamente os

resultados do teste.

 Materiais de testes usados devem ser descartados de

acordo com as regulamentações locais.

8. Recolha e Preparação de Amostras

O teste NADAL® Mononucleosis pode ser realizado utilizando

sangue total (por punção venosa ou picada no dedo), soro ou

plasma.

Para recolher amostras de sangue total por punção venosa:

Recolher amostras de sangue com anticoagulantes (heparina

de sódio ou lítio, EDTA de potássio ou sódio, oxalato de sódio,

citrato de sódio) seguindo os procedimentos laboratoriais

normais.

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Para recolher amostras de sangue total por picada no dedo:

 Lavar a mão do paciente com sabão e água morna ou limpar

com um algodão embebido em álcool. Deixar secar.

 Massajar a mão sem tocar no local da punção, esfregando a

mão em direção à ponta do dedo médio ou anelar.

 Perfurar a pele com uma lanceta estéril. Limpar os

primeiros vestígios de sangue.

 Esfregar suavemente a mão, do pulso para a palma da mão

e, em seguida para o dedo para formar uma gota de sangue

arredondada no local da punção.

Separar o soro, ou o plasma, do sangue o mais rapidamente

possível para evitar hemólise. Utilizar apenas amostras limpas,

não hemolisadas.

O teste deve ser realizado imediatamente após a recolha da

amostra. Não deixar amostras à temperatura ambiente por

um período prolongado. Amostras de soro e plasma podem

ser conservadas entre 2-8°C até 3 dias. Para armazenamento a

longo prazo, as amostras deverão ser congeladas a tempera-

turas inferiores a -20°C. O sangue total recolhido por punção

venosa deve ser armazenado entre 2-8°C se o teste for

realizado dentro de 2 dias após a recolha. Não congelar

amostras de sangue total. A amostra de sangue total através

de picada no dedo deve ser testada imediatamente. Colocar

as amostras à temperatura ambiente antes de realizar o teste.

Amostras congeladas deverão encontrar-se completamente

descongeladas e bem misturadas antes de realizar o teste. As

amostras não devem ser congeladas e descongeladas

repetidamente. Se as amostras forem transportadas, deverão

ser embaladas de acordo com as regulamentações locais para

o transporte de agentes etiológicos.

9. Procedimento de Teste

Colocar os testes, as amostras, os reagentes e/ou os

controlos à temperatura ambiente (15-30°C) antes da sua

utilização.

1. Retirar o teste cassete da embalagem selada, e colocar o

teste cassete numa superfície limpa e nivelada. O teste

cassete deve ser utilizado imediatamente após a abertura

da embalagem. Etiquetar o teste cassete com a

identificação do paciente ou de controlo.

2. a) Para a amostra de soro ou

plasma:

Segurando a pipeta verticalmente,

adicionar 1 gota (cerca de 25 μL) de

soro ou plasma para o poço da

amostra (S) do teste cassete.

b) Para a amostra de sangue total

por punção venosa:

Segurando a pipeta verticalmente,

adicionar 2 gotas (cerca de 50 μL) de

sangue total no poço de amostra (S)

do teste cassete.

c) Para a amostra de sangue total

por picada no dedo:

Aplicar a extremidade do tubo

capilar no sangue até que esteja

preenchido com aproximadamente

50 μL. Evitar bolhas de ar. Colocar a

pompete na extremidade superior

do tubo capilar e apertar a pompete

para dispensar toda a amostra de

sangue total para o poço de amostra

(S) do teste cassete.

3. Segurando a solução tampão vertical-

mente, adicionar 1 gota (cerca de

55 μL) de solução tampão para o

poço de amostra (S).

4. Iniciar o cronómetro.

5. Esperar pelo aparecimento da(s)

linha(s) colorida(s). Ler o resultado

após decorridos 5 minutos. Não

interpretar os resultados após

decorridos mais de 10 minutos.

10. Interpretação de Resultados

Positivo:

Surgem duas linhas coloridas na

membrana. Uma linha surge na região da

linha de controlo (C) e outra linha surge

na região da linha de teste (T).

Nota:

A intensidade da cor na região da linha de teste (T) pode

variar, dependendo da concentração de anticorpos anti-EBV

presentes na amostra. Qualquer sombra de cor na zona da

linha de teste (T) deve ser considerada positiva.

Negativo:

Uma linha colorida surge na região da

linha de controlo (C). Nenhuma linha

visível surge na região da linha de teste

(T).

Inválido:

Não surge qualquer linha de controlo (C).

Resultados de qualquer teste, no qual não

tenha surgido uma linha de controlo no

tempo especificado deverão ser descar-

tados. Por favor, rever o procedimento e

repetir o teste com um novo teste

cassete. Se o problema persistir,

interromper a utilização do kit e contactar

o distribuidor.

As razões mais prováveis para um resultado inválido são: um

volume insuficiente da amostra, erros de procedimento ou

testes expirados.

11. Controlo de qualidade

Um controlo interno de procedimento encontra-se incluído no

teste cassete:

A linha colorida que surge na região da linha de controlo (C), é

considerada um controlo interno de procedimento. Isto

confirma um volume de amostra suficiente, uma saturação de

membrana adequada e o procedimento técnico correto.

As Boas Práticas Laboratoriais (GLP) recomendam a utilização

de materiais de controlo para garantir um desempenho

apropriado do kit de teste.

Procedimento para Teste de Controlo de Qualidade Externo

1. Segurando cada pipeta verticalmente, adicionar 1 gota

(cerca de 40 μL) da solução de controlo positivo ou

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negativo ao poço de amostra (S) do teste cassete. De

seguida, segurando a pipeta verticalmente, adicionar 1 gota

(cerca de 55 μL) de solução tampão ao poço de amostra (S).

2. Continuar com o passo 4 do ‘Procedimento do teste’.

3. Se os controlos não produzirem os resultados esperados,

não usar os resultados obtidos. Repetir o teste ou contactar

o seu distribuidor.

12. Limitações

 O teste NADAL® Mononucleosis destina-se apenas ao uso

de diagnóstico in-vitro. O teste deve ser usado para a

detecção de anticorpos anti-EBV em amostras de sangue

total, soro ou plasma. O valor quantitativo e a taxa de

aumento na concentração de anticorpos anti-EBV não

podem ser determinados por este teste qualitativo.

 O teste NADAL® Mononucleosis apenas detecta a presença

de anticorpos anti-EBV na amostra e não deve ser utilizado

como o único critério para o diagnóstico de infecção por

mononucleose infecciosa.

 Como em todos os testes de diagnóstico, todos os

resultados devem ser considerados em conjunto com

outras informações clínicas disponíveis para o médico.

 Se o resultado do teste é negativo e os sintomas clínicos

persistirem, é recomendado fazer testes adicionais

utilizando outros métodos de teste. Um resultado negativo

não exclui, a qualquer momento, a possibilidade de infeção

de IM.

13. Resultados esperados

A infeção com o vírus Epstein-Barr (EBV) durante a

adolescência ou em idade jovem adulta, causa mononucleose

infecciosa (IM) em 35% a 50% dos casos reportados.

1,5

incidência de IM associada ao vírus Epstein-Barr (EBV) nos EUA

foi estimada em 45 por 100.000 e é mais alta em adolescentes

e jovens adultos - aproximadamente 2 em cada 1.000. Não

existe padrão sazonal de infecção por EBV. O período de

incubação é de 10 a 60 dias, embora o período de incubação

de 7 a 14 dias seja comum em crianças e adolescentes.

14. Características de Desempenho

Sensibilidade

O teste NADAL® Mononucleosis foi avaliado com amostras

confirmadas como positivas ou negativas por um teste de

aglutinação de lâminas disponível comercialmente. O teste de

aglutinação de lâminas serviu como método de referência

para o teste NADAL® Mononucleosis. O resultado mostra que

a sensibilidade do teste NADAL® Mononucleosis é >99,9% em

relação ao teste de aglutinação de lâminas.

Especificidade

O teste NADAL® Mononucleosis usa antigénios que são

altamente específicos para anticorpos anti-EBV no sangue

total, soro ou plasma. O resultado mostra que a especificidade

do teste NADAL® Mononucleosis é 98.9% relativamente ao

teste de aglutinação de lâminas.

Teste NADAL® Mononucleosis vs. teste de aglutinação de

lâminas.

Teste de aglutinação de lâminas

Teste NADAL®

Mononucleosis

Positivo Negativo Total

Positivo 60 1 61

Negativo 0 89 89

Total 60 90 150

Sensibilidade relativa: >99.9% (95.1% - 100%)*

Especificidade relativa: 98.9% (94% - 99,9%)*

Concordância geral: 99.3% (96,3% - 99,9%)*

*95% Intervalo de confiança

Substâncias interferentes

Amostras negativas e médio positivas de plasma e amostras

de soro (confirmadas por ELISA) foram retiradas com analitos

às concentrações listadas abaixo, e testadas em triplicado.

Analito Concentração

Ácido ascórbico 20 mg/ml

Hemoglobina 1000 mg/ml

Ácido gentísico 20 mg/dl

Ácido oxálico 60 mg/dl

Bilirrubina 1000 mg/dl

Ácido úrico 20 mg/ml

Acetaminofeno 20 mg/dl

Ácido acetilsalicílico 20 mg/dl

Metanol 10%

Creatina 200 mg/dl

Albumina 200 mg/dl

Cafeína 20 mg/dl

Os analitos não mostraram interferência com o teste NADAL®

Mononucleosis. Não houve diferenças óbvias entre os

resultados obtidos com os 3 lotes de testes.

Precisão

Variabilidade inter-lotes e intra-lotes

Três testes NADAL® Mononucleosis independentes, foram

testados com amostras negativas, baixo, médio e alto

positivas de soro e amostras de plasma em determinações de

10 replicados. Todos os resultados coincidiram com os

resultados esperados. Não foram obtidos resultados

divergentes com as determinações de 10 replicados ou entre

os diferentes lotes.

Reactividade Cruzada

Amostras positivas foram testadas com o teste NADAL®

Mononucleosis para os seguintes parâmetros:

RF HCV

HBsAg TB

HBeAg VIH

HBeAb Sífilis

HBcAb

Não se observou reactividade cruzada indicando que o teste

NADAL® Mononucleosis tem um grau elevado de

especificidade para anticorpos anti-EBV humanos.

PORTUGUÊS

NADAL® Mononucleosis (Ref. 252017N-05)

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15. Referências

1. Hickey SM, Strasburger VC. What Every Pediatrician Should Know About Infectious

Mononucleosis In Adolescents. Pediatr Clin North Am. 1997;44(6):1541-56.

2. Omori M. Mononucleosis http://www.emedicine.com/EMERG/topic309.htm

3. Linde A. Diagnosis of Epstein-Barr-Virus-related diseases. Scand J Infect Dis Suppl.

1996; 100:83-8.

4. Papesch M, Watkins R. Epstein-Barr-Virus infectious mononucleosis. Clin

Otolaryngol. 2001; 26(1):3-8.

5. CDC National Center for Infectious Diseases. EBV & IM:

http://www.cdc.gov/ncidod/diseases/ebv.htm

Rev. 1, 2019-07-04 JC

ĈESKÝ

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1. Účel použití

Test NADAL® Mononucleosis je rychlý imunochromatografický

test určený ke kvalitativní detekci heterofilních protilátek proti

viru Epstein-Barrové (EBV) ve vzorku lidské plné krve, séra

nebo plazmy. Test slouží jako pomůcka ke stanovení diagnózy

infekční mononukleózy (IM) a je určen pouze k profe-

sionálnímu použití.

2. Úvod a klinický význam

Inkfekční mononuklóza (IM) je způsobena virem Epstein-

Barrové (EBV), který patří do čeledi herpes virů. Symptomy IM:

horečka, bolení v krku a zduření lymfatických uzlin. V

ojedinělých případech se mohou projevit problémy se srdcem

nebo centrální nervovou soustavou. Diagnóza IM je stanovena

na základě přítomnosti heterofilních protilátek proti EBV.

Heterofilní protilátky proti EBV patří k protilátkám třídy IgM.

Jsou přítomny v 80-90% případů akutní IM a mohou být

detekovány u 60-70% pacientů během prvního týdne

onemocnění.

1,2,3,4

Test NADAL® Mononucleosis je jednoduchý test, který za

pomoci extraktů hovězích erytrocytů během několika minut

kvalitativně a selektivně detekuje heterofilní protilátky proti

EBV v plné krvi, séru nebo plazmě.

3. Princip testu

Test NADAL® Mononucleosis je rychlý imunochromatografický

test určený ke kvalitativní detekci heterofilních protilátek proti

viru Epstein-Barrové (EBV) ve vzorku lidské plné krve, séra

nebo plazmy.

V tomto testu jsou v oblasti testovací linie na testovací kazetě

imobilizovány antigeny získané z hovězích erytrocytů. Během

testování vzorek interaguje s dalšími antigeny získanými z

hovězích erytrocitů, které byly předem naneseny na částice

aplikované na konjugační podložku. Směs poté putuje

chromatograficky dále membránou a reaguje s imobi-

lizovanými antigeny. Pokud vzorek obsahuje heterofilní

protilátky proti EBV, objeví se barevná linie v oblasti testovací

linie, což svědčí o pozitivním výsledku testu. Pokud vzorek

neobsahuje heterofilní protilátky proti EBV, nezobrazí se žádná

barevná linie v oblasti testovací linie, což svědčí o negativním

výsledku.

V oblasti kontrolní linie (C) se vždy musí objevit barevná linie.

Tato slouží jako procedurální kontrola a potvrzuje, že bylo

použito dostatečné množství vzorku a že membrána byla

dostatečně promočena.

4. Činidla a dodávané materiály:

 5 NADAL® Mononucleosis testovacích kazet, včetně

jednorázových pipet

 1 pufr

 1 pozitivní kontrola (zředěná lidská plazma obsahující

heterofilní protilátky proti EBV, 0,09% azidu sodného)

 1 negativní kontrola (zředěná lidská plazma, 0,09% azidu

sodného)

 1 návod k použití

5. Další potřebný materiál

 Nádoby pro odběr vzorku

 Odstředivka (pouze pro sérum/plazmu)

 Stopky

 Lancety (pouze pro plnou krev z prstu)

 Dle potřeby také heparinizované kapiláry a sací balónek

(pouze pro plnou krev z prstu)

6. Skladování a trvanlivost

Testovací sady by měly být skladovány při teplotě 2-30°C a

použity před uplynutím data expirace uvedeném na obalu.

Testovací kazety mají trvanlivost do data expirace vytištěném

na fóliovém sáčku. Testovací kazety by měly do doby použití

zůstat v zapečetěném fóliovém sáčku. Testy nezmrazujte.

Nepoužívejte po uplynutí data expirace.

7. Bezpečnostní opatření

 Pouze pro profesionální in-vitro diagnostiku.

 Před testováním si pečlivě přečtěte návod k použití.

 Test nepoužívejte po uplynutí data expirace, které je

uvedeno na obalu.

 Nepoužívejte test, je-li obalová fólie poškozena.

 Pouze k jednorázovému použití.

 Nenanášejte vzorek do reakční oblasti (výsledková oblast).

 Aby se zamezilo kontaminaci, nedotýkejte se reakční oblasti

(výsledková oblast).

 Aby se zabránilo křížové kontaminaci vzorků, používejte pro

každý vzorek novou nádobu.

 V místě provádění testu nejezte, nepijte ani nekuřte.

 Během testování vzorků používejte ochranný oděv jako

laboratorní plášť, jednorázové rukavice a ochranné brýle.

 Se všemi vzorky zacházejte jako kdyby obsahovaly infekční

činidla. V průběhu všech testovacích kroků dodržujte

zavedená opatření pro prevenci mikrobiologických rizik a

řiďte se standardními předpisy pro správnou likvidaci

vzorků.

 Testovací sada obsahuje produkty živočišného původu.

Znalost původu a/nebo zdravotního stavu zvířat doložená

certifikátem zcela nezaručuje absenci přenosných patogenů.

Je tudíž doporučeno s těmito produkty zacházet jako s

potencionálně infekčními a dle běžných bezpečnostních

opatření (např.nepolykejte nebo nevdechujte).

 Vlhkost a teplota mohou ovlivnit výsledky testu.

 Použité testovací materiály by měly být zlikvidovány v

souladu s místními předpisy.

8. Odběr a příprava vzorku

Test NADAL® Mononucleosis může být proveden z plné krve

(ze žíly nebo z prstu), ze séra nebo plazmy.

Odběr vzorku plné krve z žíly:

Odeberte vzorky krve s antikoagulanty (sodík nebo lithiový

heparin, draslík nebo sodík EDTA, šťavel sodný, citronan

sodný) dle standardních laboratorních postupů.

Odběr vzorku plné krve z prstu:

 Omyjte pacientovu ruku mýdlem a teplou vodou nebo ji

očistěte tampónem namočeným v alkoholu. Nechte

uschnout.

 Masírujte ruku a vynechte přitom plánované místo vpichu.

Ruku třete směrem dolů ke špičce prostředníčku nebo

prsteníčku.

 Propíchněte kůži sterilní lancetou. První kapku krve setřete.

 Jemně třete ruku od zápěstí k dlani a k prstu tak, aby se

vytvořila ucelená kapka krve na místě vpichu.

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Aby se zamezilo hemolýze, oddělte sérum nebo plazmu od

krve co nejdříve. Používejte pouze čisté, nehemolyzované

vzorky.

Testování by mělo proběhnout ihned po odebrání vzorku.

Nenechávejte vzorek po delší dobu při pokojové teplotě.

Sérum a plazma by měly být skladovány při teplotě 2-8°C po

dobu nejdéle 3 dnů. Při dlouhodobém skladování udržujte

vzorky při teplotě -20°C. Pokud bude test proveden do 2 dnů

od odběru vzorku, měla by být plná krev odebraná ze žíly

skladována při teplotě 2-8°C. Vzorek plné krve nezmrazujte.

Plná krev z prstu by měla být testována okamžitě. Před

testováním nechte vzorky dosáhnout pokojové teploty.

Zmražené vzorky by měly být před testováním řádně

rozmrazeny a promíchány. Vzorky opakovaně nezmrazujte a

nerozmrazujte. V případě přepravy by vzorky měly být

zabaleny v souladu se státními předpisy pro přepravu

etiologických agens.

9. Provedení testu

Testy, pufr, vzorky a/nebo kontroly přiveďte před

testováním na pokojovou teplotu (15-30°C).

1. Vyjměte kazetu z ochranné fólie a položte ji na čistou,

rovnou plochu. Testovací kazeta by měla být použita ihned

po rozpečetění fóliového sáčku. Poznamenejte na testovací

kazetu identifikaci pacienta nebo kontroly.

2. a) Pro vzorky séra nebo plazmy:

Držte pipetu svisle a přidejte 1

kapku (cca 25 μL) séra nebo

plazmy do otvoru pro vzorek (S)

testovací kazety.

b) Pro vzorky plné krve z žíly:

Držte pipetu svisle a přidejte 2

kapky (cca 50 μL) séra nebo

plazmy do otvoru pro vzorek

(S) testovací kazety.

c) Pro vzorky plné krve z prstu:

Pomocí kapiláry odeberte cca

50 μL krve . Zamezte utváření

vzduchových bublin. Nasaďte

sací balónek na konec kapiláry,

balónek stiskněte a přidejte

vzorek plné krve do otvoru pro

vzorek (S) na testovací kazetě.

3. Držte lahvičku s pufrem svisle a

přidejte 1 kapku (cca 55 μL)

pufru do otvoru pro vzorek (S).

4. Spusťte stopky.

5. Vyčkejte až se zobrazí barevná/

barevné linie. Po 5 minutách

odečtěte výsledky. Po 10

minutách výsledek testu již

neodečítejte.

10. Vyhodnocení výsledků

Pozitivní:

Na membráně se zobrazí dvě barevné

linie. Jedna linie se zobrazí v oblasti

kontrolní linie (C) a druhá linie se zobrazí

v oblasti testovací linie (T).

Poznámka:

Intenzita barvy v oblasti testovací linie (T) se může lišit v

závislosti na koncentraci protilátek proti EBV přítomných ve

vzorku. Každý barevný odstín v oblasti testovací linie (T) by

proto měl být vyhodnocen jako pozitivní.

Negativní:

Jedna barevná linie se objeví v oblasti

kontrolní linie (C). V oblasti testovací

linie (T) se nezobrazí žádná barevná linie.

Neplatný:

Kontrolní linie (C) se nezobrazí. Výsledky

jakéhokoliv testu, na kterém se ve

stanoveném čase pro odečítání výsledku

nezobrazila kontrolní linie, musí být

znehodnoceny. Revidujte prosím postup

a zopakujte test s novou testovací

kazetou. Pokud problém přetrvává,

přestaňte ihned používat testovací sadu

a kontaktujte Vašeho distributora.

Nedostatečné množství vzorku, nesprávný postup při

testování nebo prošlý test jsou nejčastějšími příčinami

nezobrazení kontrolní linie.

11. Kontrola kvality

Součástí testu je interní procedurální kontrola:

Barevná linie, která se objeví v oblasti kontrolní linie (C) je

považována za interní procedurální kontrolu. Potvrzuje, že

bylo přidáno dostatečné množství vzorku, že membrána byla

dostatečně promočena a že byl dodržen správný postup při

testování.

Správná laboratorní praxe (SLP) doporučuje používání kontrol

k ověření správné výkonnosti testovací sady.

Postup při externím testování kvality

1. Držte každou lahvičku svisle a přidejte 1 kapku (cca 40 μL)

roztoku pozitivní nebo negativní kontroly do otvoru pro

vzorek (S) na testovací kazetě. Poté do otvoru pro vzorek

(S) přidejte 1 kapku (cca 55 μL) pufru .

2. Pokračujte dle kroku 9 "Provedení testu".

3. Nepoužívejte výsledky testů, neobdržíte-li pomocí kontrol

očekávané výsledky. Test zopakujte nebo kontaktujte svého

distributora.

12. Omezení

 Test NADAL® Mononucleosis je určen pouze pro in-vitro

diagnostiku. Test by měl být použit pouze k detekci

protilátek proti EBV v plné krvi, séru nebo v plazmě. Ani

kvantitativní hodnota ani míra nárůstu koncentrace

protilátek proti EBV nemohou být zjištěny tímto

kvalitativním testem.

 Test NADAL® Mononucleosis by měl být použit pouze k

detekci přítomnosti protilátek proti EBV ve vzorku a neměl

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by sloužit jako jediné kritérium ke stanovení diagnózy

infekce infekční mononukleózou.

 Stejně jako u všech diagnostických testů musí být výsledky

vyhodnoceny ve spojení s dalšími lékaři dostupnými

klinickými informacemi.

 Je-li výsledek testu negativní a klinické symptomy

přetrvávají, je doporučeno vzorek otestovat znovu za

pomoci jiné klinické metody. Negativní výsledek za žádných

okolností nevylučuje možnost infekce IM.

13. Očekávané výsledky

Infekce virem Epstein-Barrové (EBV) u dospívajících nebo

mladých dospělých jedinců způsobuje v 35% až 50% hlášených

případu infekční mononukleózu (IM).

1,5

Výskyt IM způsobené

EBV je v USA estimován na 45 ze 100 000 případů, přičemž je

její výskyt nejčastější u mladistvých a mladých dospělých -

přibližně 2 z 1000. Neexistuje žádná sezónní pravidelnost

infekce EBV. Inkubační perioda je mezi 10 až 60 dny, přičemž u

dětí a dospívajících je běžná inkubační doba 7 až 14 dní.

14. Výkonnostní charakteristiky

Senzitivita

Test NADAL® Mononucleosis byl posouzen komerčně

dostupným sklíčkovým aglutinačním testem za pomoci

potvrzených pozitivních nebo negativních vzorků. Sklíčkový

aglutinační test sloužil jako referenční metoda pro test

NADAL® Mononucleosis. Test prokázal, že senzitivita testu

NADAL® Mononucleosis je >99.9% v poměru se sklíčkovým

aglutinačním testem.

Specificita

Test NADAL® Mononucleosis používá antigeny, které jsou

vysoce specifické pro protilátky proti EBV v plné krvi, séru

nebo plazmě. Výsledky prokázaly, že specificita testu NADAL®

Mononucleosis je 98.9% v poměru se sklíčkovým aglutinačním

testem.

Test NADAL® Mononucleosis Test vs. sklíčkový aglutinační test

Sklíčkový aglutinační test

Test NADAL®

Mononucleosis

Pozitivn

Negativní Celke

Pozitivní 60 1 61

Negativní 0 89 89

Celkem 60 90 150

Relativní senzitivita: >99,9% (95,1% - 100%)*

Relativní specificita: 98,9% (94% - 99,9%)*

Celková shoda: 99,3% (96,3% - 99,9%)*

*95% Interval spolehlivosti

Interferující látky

Do negativních a středně pozitivních vzorků plazmy a séra

(potvrzené testy ELISA) byly přidány analyty při koncentracích

uvedených níže. Vzorky byly testovány třikrát.

Analyt Koncentrace

Kyselina askorbová 20 mg/ml

Hemoglobin 1000 mg/dl

Kyselina gentisová 20 mg/dl

Kyselina šťavelová 60 mg/dl

Bilirubin 1000 mg/dl

Kyselina močová 20 mg/ml

Analyt Koncentrace

Acetaminofen 20 mg/dl

Kyselina acetylsalicylová 20 mg/dl

Metanol 10%

Kreatin 200 mg/dl

Albumin 2000 mg/dl

Kofein 20 mg/dl

Tyto analyty neprokázaly žádnou interferenci s testem

NADAL® Mononucleosis. Mezi výsledky testů třech různých

šarží nebyly zjištěny žádné očividné rozdíly.

Přesnost

Inter-lot a intra-lot variabilita

Tři nezávislé šarže testu NADAL® Mononucleosis byly

testovány negativními, jakož i slabě, středně a silně pozitivními

vzorky séra a plazmy, a to v 10 provedeních. Všechny výsledky

odpovídaly očekávání. Ani mezi jednotlivými testy ani mezi

jednotlivými šaržemi nebyly obdrženy odlišné výsledky.

Křížová reaktivita

Vzorky pozitivní na následující parametry byly testovány

testem NADAL® Mononucleosis:

RF HCV

HBsAg TB

HbeAg HIV

HbeAb Syphilis

HbcAb

Nebyla zjištěna žádná křížová reaktivita, což poukazuje na

vysokou míru specificity testu NADAL® Mononucleosis na

lidské protilátky proti EBV.

15. Reference

1. Hickey SM, Strasburger VC. What Every Pediatrician Should Know About Infectious

Mononucleosis In Adolescents. Pediatr Clin North Am. 1997;44(6):1541-56.

2. Omori M. Mononucleosis http://www.emedicine.com/EMERG/topic309.htm

3. Linde A. Diagnosis of Epstein-Barr-Virus-related diseases. Scand J Infect Dis Suppl.

1996; 100:83-8.

4. Papesch M, Watkins R. Epstein-Barr-Virus infectious mononucleosis. Clin

Otolaryngol. 2001; 26(1):3-8.

5. CDC National Center for Infectious Diseases. EBV & IM:

http://www.cdc.gov/ncidod/diseases/ebv.htm

Rev. 1, 2019-07-04 AG

SUOMI

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1. Käyttötarkoitus

NADAL® Mononucleosis testi on nopea, kromatografinen

immunomääritys Epstein-Barr viruksen (EBV) havaitsemiseen

ihmisen kokoveri, seerumi, tai plasmänäytteistä. Testi on

tarkoitettu apuvälineeksi mononukleoosi-infektion

havaitsemiseen ja vain ammattikäyttöön.

2. Johdanto ja kliiniset merkitykset

Mononukleoosi-infektion aiheuttaa Epstein-Barr virus (EBV),

joka kuuluu herpesvirusten ryhmään. Sen oireita ovat: kuume,

kurkkukipu ja turvonneet imusolmukkeet. Harvoissa

tapauksissa sydämen ja keskushermoston ongelmat ovat myös

mahdollisia. Mononukleoosi diagnoosi tehdään perusten

heterofilisten anti-EBV vasta-aineiden läsnäoloon.

Heterofiliset anti-EBV vasta-aineet kuuluvat IgM-luokkaan. Ne

esiintyvät 80-90% akuuteista mononukleeosi tapauksista, ja

ne voidaan havaita 60-70% potilaista sairauden ensimmäisen

viikon aikana.

1,2,3,4

NADAL® Mononucleosis testi on yksinkertainen testi, joka

hyödyntää naudan punasoluista johdettua uutetta

heterofilisten anti-EBV vasta-aineiden laadulliseen

havaitsemiseen kokoveri, seerumi, tai plasmanäytteistä.

3. Testiperiaate

NADAL® Mononucleosis testi on lateraalivirtaukseen

perustuva immunokromatografinen määritys heterofilisten

Epstein-Barr virusten (EBV) vasta-aineiden laadulliseen

havaitsemiseen kokoveri, seerumi, tai plasmanäytteistä.

Naudan punasoluista uutetut antigeenit ovat liikkumattomina

testikasetin testiviivan-alueella. Testin aikana näyte reagoi

naudan punasoluista uutettujen konjugaatti alustalle

päällystettyjen partikkeleiden kanssa. Tämän jälkeen seos

imeytyy kromatografisesti kalvoa pitkin ja reagoi kalvolla

olevien antigeenien kanssa. Mikäli näyte sisältää heterofilisiä

anti-EBV vasta-aineita, ilmestyy testiviiva-alueelle värillinen

viiva. Tämä ilmaisee positiivisen tuloksen. Mikäli seos ei sisällä

heterofilisiä anti-EBV vasta-aineita, ei testiviiva-alueelle

ilmaannu värillistä viivaa. Tämä ilmaisee negatiivisen tuloksen.

Toiminnallisena kontrollina toimii kontrolliviiva-alueelle

kehittyvä värillinen viiva, joka varmistaa riittävän näytteen

lisäämisen sekä riittävän näytteen imeytymisen solukalvoon.

4. Reagenssit ja toimitettavat materiaalit

 5 NADAL® Mononucleosis testikasettia, sis. kertakäyttöisiä

pipettejä

 1 puskuriliuos

 1 positiivinen kontrolli (laimennettua ihmisen plasmaa, sis.

heterofilisiä anti-EBV vasta-aineita, 0.09% natriumatsidia)

 1 negatiivinen kontrolli (laimennettua ihmisen plasmaa,

0.09% natriumatsidia)

 1 pakkausseloste

5. Vaaditut lisämateriaalit

 Näytteenkeräysastioita

 Sentrifugi (seerumi/plasmanäytteille)

 Ajastin

 Lansetti ( vain sormenpään kokoverinäytteille)

 Tarvittaessa heparanisoituja kapillaariputkia ja annostelija

(vain sormenpäästä otetuille kokoverinäytteille)

6. Säilytys & Stabiilisuus

Testipakkaukset tulee säilyttää 2-30°C lämpötilassa

pakkauksessa ilmoitettuun viimeiseen käyttöpäivään asti.

Testikasetit ovat käyttökelpoisia pakkauksessa ilmoitettuun

viimeiseen käyttöpäivään asti. Testikasetit tulee säilyttää

suljetuissa pakkauksissaan testien suorittamiseen asti. Älä

pakasta testiliuskoja. Älä käytä eräpäivän jälkeen.

7. Varoitukset ja varotoimet

 Vain ammattimaiseen in-vitro diagnostiikan käyttöön.

 Lue käyttöohjeet huolellisesti ennen testin suorittamista.

 Älä käytä testiä pakkauksessa ilmoitetun viimeisen

käyttöpäivän jälkeen.

 Älä käytä testejä, mikäli foliopakkaus on vahingoittunut.

 Älä uudelleenkäytä testejä.

 Älä lisää näytettä reaktioalueelle (tulosalue).

 Välttääksesti saastumisen, älä koske reaktioalueeseen

(tulosalue).

 Vältä näytteiden ristiin saastumista käyttämällä uutta

näytteenkeräysastiaa jokaiselle näytteelle.

 Älä syö,juo tai tupakoi alueella, jossa näytteitä käsitellään.

 Käytä suojavarusteita, kuten laboratoriotakkeja, hanskoja ja

suojalaseja käsitellessäsi näytteitä.

 Käsittele kaikkia näytteitä mahdollisina tartuntalähteinä.

Noudata mikrobiologisia vaaroja koskevia varotoimia

testaamisen aikana ja noudata asianmukaisia määräyksia

koskien näytteiden hävittämistä.

 Testipakkaus sisältää eläinperäisiä tuotteita. Sertifioitu tieto

alkuperästä ja/tai eläinten terveydentilasta ei täysin takaa

tarttuvien taudinaiheuttajien puuttumista. Tuotteita

suositellaan täten käsiteltävän mahdollisesti tartuttavina

(älä niele tai hengitä).

 Kosteus ja lämpötilan vaihtelut voivat vaikuttaa

testitulokseen.

 Käytetyt testausmateriaalit tulee hävittää paikallisten

säännösten mukaisesti.

8. Näytteenotto ja valmistelu

NADAL® Mononucleosis testi voidaan suorittaa käyttäen

kokoverta (injektiokanyyli tai sormenpää), seerumi, tai

plasmanäytettä.

Injektiokanyyli kokoverinäytteen kerääminen:

Kerää verinäytteet antikoagulanteilla (natrium tai litium

hepariini, kalium tai natrium EDTA, natriumoksalaatti,

natriumsitraatti) noudattaen standardeja

laboratoriokäytäntöjä.

Kokoverinäytteen kerääminen sormenpäästä:

 Pese potilaan käsi saippualla ja lämpimällä vedellä, tai

puhdista käyttämällä alkoholipyyhettä. Anna käden kuivua.

 Hiero kättä kohti keskisormen sormenpäätä tai nimetöntä

välttäen koskemasta lävistyskohtaan.

 Lävistä iho käyttämällä steriiliä lansettia. Pyyhi pois

ensimmäinen tippa verta.

 Hiero kättä hellästi ranteesta kohti kämmentä ja sormea

muodostaaksesi pyöreän pisaran verta lävistyskohtaan.

Erota seerumi tai plasma verestä mahdollisimman pian

välttääksesi hemolyysiä. Käytä vain kirkkaita, ei

hemolysoituneita näytteitä.

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NADAL® Mononucleosis Test (Ref. 252017N-05)

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Testi tulee suorittaa heti näytteen keräämisen jälkeen. Älä jätä

näytteitä huoneenlämpöön pitkäksi ajaksi. Seeruminäytteet

voidaan säilyttää 2-8°C lämpötilassa enintään 3 päivän ajan.

Pidempiaikaisessa säilytyksessä näytteet tulee säilyttää alle

-20°C asteessa. Injektiokanyylillä kerätty kokoverinäyte tulee

säilyttää 2-8°C lämpötilassa mikäli testi suoritetaan 2 päivän

sisällä näytteen keräämisestä. Älä pakasta kokoverinäytteitä.

Sormenpäästä kerätyt kokoverinäytteet tulee testata

välittömästi. Tuo näytteet huoneenlämpöön ennen testausta.

Jäädytetyt näytteen tulee sulattaa täysin, ja sekoittaa ennen

testin suorittamista. Älä pakasta ja sulata näytteitä toistuvasti.

Mikäli näytteitä aiotaan kuljettaa, tulee ne pakata noudattaen

paikallisia etiologisten aineiden kuljettamista koskevia

säännöksiä.

9. Testin suorittaminen

Tuo testit, reagenssit, näytteet, ja/tai kontrollit

huoneenlämpöön (15-30°C) ennen testin suorittamista.

1. Poista testikasetti pakkauksestaan ja aseta se puhtaalle,

tasaiselle alustalle. Testikasetti tulee käyttää välittömästi

pakkauksen avaamisen jälkeen. Merkitse testikasettiin

potilaan tiedot.

2. a) Seerumi tai plasmanäytteille:

Pitäen tiputinta pystysuorassa, lisää

1 pisara (noin 25 μL) seerumi tai

plasmanäytettä testikasetin

näytekaivoon (S).

b) Injektiokanyyli kokoverinäytteille

Pitäen tiputinta pystysuorassa, lisää

2 pisaraa (noin 50 μL) kokoverta

testikasetin näytekaivoon (S).

c) Sormenpään kokoverinäytteille

Kerää kapillariputkella verta noin

50 μL. Vältä ilmakuplien

muodostumista. Aseta pumpetti

kapillaariputken yläpäähän, ja

purista sitä annostellaksesi

kokoverinäytettä testikasetin

näytekaivoon (S).

3. Pitäen puskuriliuos pulloa

pystysuorassa, lisää 1 pisara (noin

55 μL) puskuriliuosta näytekaivoon

(S).

4. Käynnistä ajastin.

5. Odota värillisten viivojen

muodostumista. Lue tulokset 5

minuutin kuluttua. Älä tulkitse

tuloksia enää 10 minuutin jälkeen.

10. Tuloksien tulkinta

Positiivinen:

Kalvolle kehittyy kaksi värillistä viivaa.

Toinen viiva kehittyy kontrolliviiva-

alueelle (C) ja toinen viiva kehittyy

testiviiva-alueelle (T).

Huom:

Testiviivan (T) värin voimakkuus voi vaihdella näytteessä

olevan analyytin tason mukaan. Vaikka testiviiva (T) olisi

heikko, luetaan testin tulos silti positiiviseksi.

Negatiivinen:

One coloured line appears in the control

line region (C). No apparent coloured

line appears in the test line region (T).

Mitätön:

Kontrolliviiva Testikasetit, joihin ei

ilmesty kontrolliviivaa (C) tulee hävittää.

Lue käyttöohjeet huolellisesti uudelleen

ja tee testi uudella testikasetilla. Jos

ongelma jatkuu, lopeta testien käyttö

välittömästi ja ota yhteys jakelijaasi.

Riittämätön näytteen määrä ja väärä

testin tekotapa ovat yleisimpiä syitä

kontrolliviivan puuttumiseen.

11. Laaduntarkkailu

Testikasetti sisältää sisäänrakennetun laatukontrollin.

Värillisen viivan ilmestyminen kontrollialueelle (C) vahvistaa

testin oikeanlaisen toiminnan. Sillä varmistetaan näytteen

riittävyys, oikea tekniikka ja näytteen riittävä imeytyminen

testikalvolle.

Hyvä laboratorio käytäntö (GLP) suosittelee käyttämään

ulkoisia kontrollimateriaaleja oikeanlaisen testin suorituksen

varmistamiseen.

Ulkoisen laaduntarkkailun suorittaminen

1. Pitäen pulloa pystysuorassa, lisää 1 pisara (noin 40 μL)

positiivista tai negatiivista kontrolliliuosta testikasetin

näytekaivoon (S). Tämän jälkeen, pitäen pulloa

pystysuorassa, lisää 1 pisara (noin 55 μL) puskuriliuosta

näytekaivoon (S).

2. Jatka osion ‘testin suorittaminen’ kohtaan 4.

3. Mikäli kontrollit eivät johda odotettuihin tuloksiin, älä käytä

testin tuloksia. Suorita testi uudelleen, tai ota yhteys

jakelijaasi.

12. Rajoitukset

 NADAL® Mononucleosis testi on tarkoitettu ainoastaan in-

vitro diagnostiseen käyttöön. Testiä tulee käyttää

ainoastaan anti-EBV vasta-aineiden havaitsemiseen

kokoveri, seerumi, tai plasma näytteistä. Testillä ei pystytä

määrittämään anti-EBV vasta-aineiden määrää tai sen

muutosta.

 NADAL® Mononucleosis testi havaitsee ainoastaan anti-EBV

vasta-aineiden läsnäolon näytteessä. Testin tulosta ei

yksinään tule käyttää mononukleoosi-infektion

diagnosointiin.

 Kuten kaikkien diagnostisten testien kanssa, tulokset tulee

tulkita yhdessä muiden kliinisten tutkimusten kanssa.

 Jos oireet jatkuvat negatiivisesta tuloksesta huolimatta,

suositellaan lisätestien suorittamista Negatiivinen tulos ei

poissulje mononukleoosi-infektion mahdollisuutta.

13. Odotetut tulokset

Epstein-Barr virus (EBV) aiheuttaa mononukleoosi-infektion

35-60 % raportoiduisssa tapauksissa nuorten, sekä

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nuortenaikuisten keskuudessa.

1,5

EBV:hen liittyvien

mononukleoosi-infektioiden arvioidaan olevan 45 per

100,000. Luku korkein nuorten, ja nuortenaikuisten

keskuudessa- noin 2 per 1000. EBV-infektio ei esiinny

kausiluontoisesti. Sairauden itämisaika on 10-60 päivää.

Kuitenkin, 7-14 päivän itämisaika on yleisin nuorten, sekä

nuortenaikuisten keskuudessa.

14. Ominaisuudet

Havaitsemisraja:

The NADAL® Mononucleosis Test has been evaluated with

specimens confirmed positive or negative by a leading,

commercially-available slide agglutination test. The slide

agglutination test served as a reference method for the

NADAL® Mononucleosis Test. The result shows that the

sensitivity of the NADAL® Mononucleosis Test is >99.9%

relative to the slide agglutination test.

Tarkkuus

NADAL® Mononucleosis testi käyttää kokoveressä,

seerumissa, tai plasmassa oleville anti-EBV vasta-aineille

spesifisiä antigeenejä. Tulokset osoittavat NADAL®

Mononucleosis testin tarkkuuden olevan 98.9%

yhdenmukainen slide agglutinaatiotestin kanssa.

NADAL® Mononucleosis testi verrattuna slide

agglutinaatiotestiin

Slide agglutinaatiotesti

NADAL®

Mononucleosis

testi

Positiivi

nen

Negatiivi

nen

Yhtee

nsä

Positiivin

60 1 61

Negatiivi 0 89 89

Yhteensä 60 90 150

Relatiivinen herkkyys: >99.9% (95.1% - 100%)*

Relatiivinen tarkkuus: 98.9% (94% - 99.9%)*

Yhdenmukaisuus:99.3% (96.3% - 99.9%)*

*95% luottamusväli

Testin toimintaa häiritsevät aineet

Negatiiviset ja keski-positiiviset seerumi näytteet (ELISA

varmistettuja) oli vahvistettu alla olevilla analyyteillä ja

pitoisuuksilla. Näytteet testattiin kolmen ryhmissä.

Analyytti Pitoisuus

Askorbiinihappo 20 mg/ml

Hemoglobiini 1000 mg/dl

Gentisiinihappoliuos 20 mg/dl

Oksaalihappo 60 mg/dl

Bilirubiini 1000 mg/dl

Virtsahappo 20 mg/ml

Parasetamoli 20 mg/dl

Asetyylisalisyylihappo 20 mg/dl

Metanoli 10%

Kreatiini 200 mg/dl

Albumiini 2000 mg/dl

Kofeiini 20 mg/dl

Mainitut analyytit eivät aiheuttaneet häiriöitä NADAL®

Mononucleosis testin tuloksissa. Kolmen eri erän tuotteiden

tuloksissa ei havaittu eroja.

Tarkkuus

Erien sisäinen-ja välinen vaihtelevuus

Kolme erillistä erää NADAL® Mononucleosis testiä testattiin

käyttäen negatiivista, sekä keski-ja korkean positiivista

seerumi-ja plasmanäytettä. Testit suoritettiin 10-kertaisella

määrityksellä. Kaikki tulokset vastasivat odotettuja arvoja.

Eroavia tuloksia ei saatu 10-kertaisen määrityksen

seurauksena, eikä erien välillä.

Ristikkäisreaktiivisuus

Seuraaville parametreille positiiviset näytteet testattiin

käyttäen NADAL® Mononucleosis testiä:

RF HCV

HbsAg TB

HbeAg HIV

HbeAb Kuppa

HbcAb

Ristikkäisreaktiivisuutta ei havaittu. Tämä osoittaa NADAL®

Mononucleosis testillä olevan korkea tarkkuus ihmisen anti-

EBV vasta-aineiden havaitsemisessa.

15. Lähteet

1. Hickey SM, Strasburger VC. What Every Pediatrician Should Know About Infectious

Mononucleosis In Adolescents. Pediatr Clin North Am. 1997;44(6):1541-56.

2. Omori M. Mononucleosis http://www.emedicine.com/EMERG/topic309.htm

3. Linde A. Diagnosis of Epstein-Barr-Virus-related diseases. Scand J Infect Dis Suppl.

1996; 100:83-8.

4. Papesch M, Watkins R. Epstein-Barr-Virus infectious mononucleosis. Clin

Otolaryngol. 2001; 26(1):3-8.

5. CDC National Center for Infectious Diseases. EBV & IM:

http://www.cdc.gov/ncidod/diseases/ebv.htm

Rev. 1, 2019-07-04 BM

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1. Avsedd användning

NADAL® Mononucleosis Test är en snabb, kromatografisk

immunanalys för kvalitativ detektion av heterofilantikroppar

mot Epstein-Barr-virus (EBV) i humant helblod, serum eller

plasma. Testet är avsett att användas som ett hjälpmedel vid

diagnos av infektiös mononukleos (IM) och är endast för

professionellt bruk.

2. Introduktion och klinisk betydelse

Infektiös mononukleos (IM) orsakas av Epstein-Barr-viruset

(EBV), som är en medlem av herpesvirusfamiljen. Symptomen

på IM är: Feber, ont i halsen och svullna lymfkörtlar. I mycket

sällsynta fall kan problem med hjärt- eller centrala

nervsystemet uppstå. Diagnos av IM görs baserat på närvaron

av heterofil anti-EBV antikroppar. Heterofila anti-EBV

antikroppar tillhör IgM-klassen. De är närvarande i 80-90% av

akuta IM-fall och kan detekteras hos 60-70% av patienterna

under den första veckan av klinisk sjukdom.

1,2,3,4

NADAL® Mononucleosis Test är ett enkelt test som utnyttjar

ett extrakt av bovina erytrocyter för att kvalitativt och

selektivt detektera heterofil anti-EBV-antikroppar i helblod,

serum eller plasma på bara några minuter.

3. Testprincip

NADAL® Mononucleosis Test är en immunflödesanalys av

lateral flöde för kvalitativ detektion av heterofilantikroppar

mot Epstein-Barr-virus (EBV) i helblod, serum eller plasma.

I detta test immobiliseras antigener extraherade från bovina

erytrocyter i test linje regionen av testkassetten. Under

provningen reagerar provet med ytterligare antigener

extraherade från bovina erytrocyter och förbehandlades på

partiklar som har applicerats på konjugat dynan. Blandningen

migrerar kromatografiskt längs membranet och interagerar

med de immobiliserade antigenerna. Om provet innehåller

heterofil anti-EBV-antikroppar kommer en färgad linje att visas

i testlinjeområdet, vilket indikerar ett positivt resultat. Om

provet inte innehåller några heterofila anti-EBV-antikroppar

kommer ingen färgad linje att visas i testlinjeområdet, vilket

indikerar ett negativt resultat.

För att fungera som procedurkontroll bör en färgad linje alltid

visas i kontrolllinjegruppen (C), vilket indikerar att en korrekt

volym prov har tillsatts och membranvridning har inträffat.

4. Tillhandahållet material och reagenser

 5 NADAL® Mononucleosis testkassetter inkl.

engångspipetter

 1 buffert

 1 positiv kontroll (utspädd humanplasma innehållande

heterofil anti-EBV antikroppar , 0,09% natriumazid)

 1 negativ kontroll (utspädd human plasma, 0,09%

natriumazid)

 1 bruksanvisning

5. Ytterligare material som behövs

 Provtagningsbehållare

 Centrifug (för serum / plasma)

 Timer

 Lansett (endast för fingerstick helblod)

 Om nödvändigt, hepariniserade kapillärrör och

doseringslampa (endast för fingerstick helblod)

6. Förvaring & hållbarhet

Testpaketet ska förvaras vid 2-30°C och användas före

utgångsdatumet på förpackningen. Testkassetterna är stabila

tills utgångsdatumet som är tryckt på foliepåsen.

Testkassetterna ska förbli i förseglade påsar tills de används.

Frys inte ner testerna. Använd inte test utöver

utgångsdatumet.

7. Varningar och försiktighetsåtgärder

 Endast för professionellt in-vitro-diagnostisk användning.

 Läs noga igenom testproceduren innan testet sätts igång.

 Använd inte testet efter passerat utgångsdatum som anges

på förpackningen.

 Använd inte testet om förpackningen är skadad.

 Använd inte testet pånytt.

 Tillsätt inte prov i reaktionsfältet (resultatfältet).

 För att undvika kontamination bör inte reaktionsfältet

(resultatfältet) vidröras.

 Undvik korskontaminering av prover genom att använda en

ny provuppsamlingsbehållare för varje prov som erhållits.

 Ät, drick eller rök ej i området där provexemplar och testkit

hanteras.

 Bär skyddsklädsel som exempelvis laboratorierock,

engångshandskar och skyddsglasögon när proverna

analyseras.

 Hantera samtliga provexemplar som om de skulle innehålla

smittosamma medel. Observera etablerade

försiktighetsåtgärder för mikrobiologiska risker genom hela

proceduren och standardriktlinjerna för en korrekt

avfallshantering av provexemplaren.

 Testkitet innehåller produkter av animaliskt ursprung.

Certifierad kunskap om djurs ursprung och / eller sanitära

tillstånd garanterar inte fullständigt frånvaron av

överförbara patogena ämnen. Det rekommenderas därför

att dessa produkter behandlas som potentiellt

smittosamma och hanteras i enlighet med vanliga

säkerhetsåtgärder (t.ex. skall de inte intas eller inandas).

 Fuktighet och temperatur kan ha stor påverkan på

testresultaten.

 Använt testmaterial bör kasseras enligt lokala regleringar.

8. Provtagning och förberedelser

NADAL® Mononucleosis Test kan utföras med helblod (från

venipunktur eller fingerstick), serum eller plasma.

Att samla helblodprover genom venipunktur:

Samla blodprover med antikoagulantia (natrium eller litium

heparin, kalium eller natrium EDTA, natriumoxalat,

natriumcitrat) enligt standard laboratorieförfaranden.

Att samla helblodsprover genom fingerstick:

 Tvätta patientens hand med tvål och varmt vatten eller

rengör det med en alkoholpinne. Låt det torka.

 Massera handen utan att röra den avsedda

punkteringsplatsen genom att gnugga ner handen mot

fingertoppen på mitt- eller ringfingret.

 Punktera huden med en steril lansett. Torka bort det första

tecknet av blod.

 Gnid försiktigt handen från handleden till handflatan och

sedan till fingret för att bilda en rund bloddropp över

punkteringsplatsen.

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Separera serum eller plasma från blod så snart som möjligt för

att undvika hemolys. Använd endast klara, ej hemolyserade

prover.

Testet bör utföras omedelbart efter provtagningen. Lämna

inte prov i rumstemperatur under längre perioder. Serum- och

plasmaprover kan förvaras vid 2-8°C i upp till 3 dagar. För

långvarig lagring bör proverna hållas under -20°C. Helblod som

uppsamlas genom venipunktur ska förvaras vid 2-8°C om

testet görs inom 2 dagar efter insamling. Frys inte ner

helblodsproverna. Helblodsprover med fingerstick bör testas

omedelbart. Ta prov till rumstemperatur före provning. Frysta

prov bör tinas helt och blandas väl före provningen. Proverna

ska inte frysas och tinas upprepade gånger. Om prover ska

skickas ska de packas i enlighet med federala bestämmelser

för transport av etiologiska medel.

9. Testprocedur

Ta prov, buffert, prov och/eller kontroller till rums-

temperatur (15-30 °C) före provningen.

1. Ta bort testkassetten från den förseglade foliepåsen och

placera den på en ren och jämn yta. Testkassetten ska

användas omedelbart efter öppnandet av foliepåsen. Märk

testkassetten med patienten eller kontrollidentifikationen.

2. a) För serum- eller plasmaprover:

Håll droppen vertikalt, tillsätt

1 droppe (cirka 25 μl) serum

eller plasma till provbrunnen

(S) på testkassetten.

b) För helblodprov på veni-

punktur:

Håll droppen vertikalt, tillsätt

2 droppar (cirka 50 μl) helblod

till provbrunnen (S) på

testkassetten.

c) För fingerstick helblodsprov:

Applicera kapillärrörets ända i

blodet tills det fylls med ca 50

μl. Undvik luftbubblor. Placera

en peleusboll på kapillärrörets

övre ända och kläm

peleusbollen för att avge hela

blodprovet i provkassettens

provbrunn (S).

3. Håll buffertflaskan vertikalt,

tillsätt 1 droppe (ca 55 μl)

buffert till provbrunnen (S).

4. Starta timern.

5. Vänta på att de färgade

raderna visas. Läs resultatet

efter 5 minuter. Tolka inte

resultatet efter mer än 10

minuter.

10. Tolkning av resultat

Positiv:

Två färgade linjer visas på membranet.

En rad visas i kontroll linjens region (C)

och den andra raden visas i testlinjens

region (T).

OBS:

Färgintensiteten i testområdets linje region (T) kan variera

beroende på koncentrationen av anti-EBV-antikroppar

närvarande i provet. Därför bör all färgskugga i test linje

regionen (T) anses vara positiv.

Negativ:

En färgad linje visas i kontrollområdets

linje region (C). Ingen färgad linje visas i

testområdets linje region (T).

Ogiltig:

Kontroll linjen (C) visas inte. Resultat

från test som inte genererar en kontroll

linje på en specificerad avläsningstid

måste kasseras. Vänligen gå igenom

proceduren och upprepa testet med en

ny testkassett. Om problemet kvarstår

bör du avsluta användandet av testkittet

omedelbart och kontakta din lokala

distributör.

Otillräcklig volym av prov, felaktigt utförande av proceduren

eller utgångna test är de vanligaste orsakerna till att kontroll

linjen inte fungerar.

11. Kvalitetskontroll

En intern procedurkontroll ingår i testkassetten:

En färgad linje i kontroll linjeområdet (C) anses vara en intern

procedurkontroll. Den bekräftar tillräcklig volym av prov,

adekvat fuktning av membranet och korrekt procedurkontroll.

God laboratoriepraxis (GLP) rekommenderar användning av

kontrollmaterial för att säkerställa korrekt provkit.

Förfarande för extern kvalitetskontroll

1. Håll varje flaska vertikalt, tillsätt 1 droppe (ca 40 μL) positiv

eller negativ kontroll lösning till provbrunnen (S) på

testkassetten. Sedan håller du flaskan vertikalt, tillsätt 1

droppe (ca 55 μl) buffert till provbrunnen (S).

2. Fortsätt med steg 4 i testproceduren.

3. Om kontrollerna inte ger de förväntade resultaten, använd

inte de erhållna resultaten. Upprepa testet eller kontakta

din distributör.

12. Begränsningar

 NADAL® Mononucleosis Test är endast för in-vitro-

diagnostisk användning. Testet bör endast användas för

detektering av anti-EBV-antikroppar i helblod-, serum- eller

plasmaprover. Varken det kvantitativa värdet eller

höjningsgraden av anti-EBV-antikroppar kan bestämmas

genom detta kvalitativa test.

 NADAL® Mononucleosis Test detekterar endast

förekomsten av anti-EBV-antikroppar i provet och bör inte

användas som enda kriterium för diagnos av infektiös

mononukleosinfektion.

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 Liksom vid alla diagnostiska tester ska alla resultat som

erhålls med detta test tolkas i kombination med annan

klinisk information tillgänglig för läkaren.

 Om testresultatet är negativt och kliniska symptom

kvarstår, rekommenderas ytterligare testning med andra

kliniska metoder. Ett negativt resultat utesluter inte när

som helst möjligheten av IM-infektion.

13. Förväntade resultat

Infektion med Epstein-Barr-virus (EBV) under ungdom eller

ung vuxen ålder orsakar infektiös mononukleos (IM) hos 35%

till 50% av rapporterade fall.

1,5

Förekomsten av EBV-associerad

IM i USA har uppskattats till 45 per 100 000 och är högst hos

ungdomar och unga vuxna - ungefär 2 av 1000. Inga

säsongsbetonade mönster av EBV-infektion existerar.

Inkubationsperioden är 10 till 60 dagar, men

inkubationsperioden 7 till 14 dagar är vanlig hos barn och

ungdomar.

14. Prestanda

Känslighet

NADAL® Mononucleosis Test har utvärderats med prover som

blivit bekräftade positiva eller negativa av ett ledande

kommersiellt tillgängligt glidagglutinationstest. Glidagglu-

tinationstestet fungerade som referensmetod för NADAL®

Mononucleosis Testet, resultatet visar att känsligheten hos

NADAL® Mononucleosis Test är > 99,9% i förhållande till

glidagglutinationstestet.

Specificitet

NADAL® Mononucleosis Test använder antigener som är

mycket specifika för anti-EBV-antikroppar i helblod, serum

eller plasma. Resultaten visar att specificiteten av NADAL®

Mononucleosis Test är 98,9% i förhållande till

glidagglutinationstestet .

NADAL® Mononucleosis Test mot glid agglutinationstest

Glidagglutination test

NADAL®

Mononucleosis

Test

Positiv Negativ Totalt

Positiv 60 1 61

Negativ 0 89 89

Totalt 60 90 150

Relativ sensitivitet: >99,9% (95,1% - 100%)*

Relativ specificitet: 98,9% (94% - 99,9%)*

Översiktlig överenskommelse: 99,3% (96,3% - 99,9%)*

* 95% konfidensintervall

Substanser som kan orsaka störning

Negativa och mellersta positiva plasma- och serumprover

(ELISA-bekräftad) spikades med analyterna vid de

koncentrationer som anges nedan och testades i triplikat.

Analyt Koncentration

Askorbinsyra 20 mg/ml

Hemoglobin 1000 mg/dl

Gentisinsyra 20 mg/dl

Oxalsyra 60 mg/dl

Bilirubin 1000 mg/dl

Urinsyra 20 mg/ml

Analyt Koncentration

Acetaminofen 20 mg/dl

Acetylsalicylsyra 20 mg/dl

Metanol 10%

Kreatin 200 mg/dl

Albumin 2000 mg/dl

Koffein 20 mg/dl

Analyserna visade ingen störning av NADAL® Mononucleosis

Test. Det fanns inga uppenbara skillnader bland de resultat

som erhölls med tre olika produktioner av test.

Precision

Inter- och intra-lot-variabilitet

Tre oberoende delar av NADAL® Mononucleosis Test testades

med negativa såväl som låga, medelstora och höga positiva

serum- och plasmaprover i 10-faldiga bestämningar. Alla

resultat överensstämde med förväntningarna. Inga avvikande

resultat erhölls inom de 10-faldiga bestämningarna eller

mellan de olika delarna.

Korsreaktion

Prover som var positiva för följande parametrar testades med

NADAL® Mononucleosis Test:

RF HCV

HbsAg TB

HbeAg HIV

HbeAb Syfilis

HbcAb

Ingen korsreaktivitet observerades vilket indikerar att NADAL®

Mononucleosis Test har en hög grad av specificitet för humana

anti-EBV-antikroppar.

15. Referenser

1. Hickey SM, Strasburger VC. What Every Pediatrician Should Know About Infectious

Mononucleosis In Adolescents. Pediatr Clin North Am. 1997;44(6):1541-56.

2. Omori M. Mononucleosis http://www.emedicine.com/EMERG/topic309.htm

3. Linde A. Diagnosis of Epstein-Barr-Virus-related diseases. Scand J Infect Dis Suppl.

1996; 100:83-8.

4. Papesch M, Watkins R. Epstein-Barr-Virus infectious mononucleosis. Clin

Otolaryngol. 2001; 26(1):3-8.

5. CDC National Center for Infectious Diseases. EBV & IM:

http://www.cdc.gov/ncidod/diseases/ebv.htm

Rev. 1, 2019-07-04 MM

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1. Bruksområdet

NADAL® Mononucleosis Test er en rask, kromatografisk

immunoassay for kvalitativ deteksjon av heterofile antistoffer

mot Epstein-Barr virus (EBV) i humant helblod, serum eller

plasma. Testen brukes som et diagnostisk verktøy i diagnosen

av smittsom Mononukleose (IM) og er designet kun for

profesjonelt bruk.

2. Introduksjon og Klinisk Signifikans

Infeksiøs Mononukleose (IM) er forårsaket av Epstein-Barr

virus (EBV), som er et medlem av herpesvirus familien.

Symptonene av IM er: feber, sår hals og hovne lymfekjertler. I

svært sjeldne tilfeller kan det oppstå hjerteproblemer eller

problemer knyttet til sentralnervesystemet. Diagnosen av IM

er basert på prinsippet av heterofile anti-EBV antikropper.

Heterofile anti-EBV antikropper hører til IgM klassen. De er til

stede i 80-90% av akutte IM saker og kan påvises i 60-70% av

pasientene i løpet av den første uken av klinisk sykdom.

1,2,3,4

NADAL® Mononucleosis Test er en enkel test som bruker et

ekstrakt av storfe erytrocytter til å kvalitativt og selektivt

detektere heterofile anti-EBV antikropper i helblod, serum

eller plasma kun i løpet av et minutt.

3. Test Prinsipp

NADAL® Mononucleosis Test er en kvalitativ test for påvisning

av heterofile antistoffer mot Epstein-Barr-virus (EBV) i fullblod,

serum eller plasma.

I denne testen blir antigener ekstrahert fra bovin erytrocytter

immobilisert i testlinjeområdet (T) av testkassetten. Under

testen reagerer prøven med ytterligere antigener ekstrahert

fra bovin erytrocytter og precoated på partikler som er blitt

påført til konjugatputen. Blandingen beveger seg

kromatografisk langs membranen og integreres med de

immobiliserte antigenene. Hvis prøven inneholder heterofile

anti-EBV antikropper, vil en farget linje bli synlig i

testlinjeregionen. Dette indikerer et positivt resultat. Hvis

prøven inneholder heterofile anti-EBV antikropper, vil ingen

farget linje komme til syne i testlinjeregionen. Dette indikerer

et negativt resultat.

For å fungere som en prosesskontroll, bør en farget linje alltid

vises i kontrolllinjeregionen (C), hvilket indikerer at et riktig

volum av prøven er blitt tilsatt og at det har oppstått

membranveke.

4. Medfølgende Regenter og Material

 5 NADAL® Mononucleosis testkassetter inkl. disponible

pipetter

 1 buffer

 1 positiv kontroll (fortynnet humant plasma som inneholder

heterofile anti-EBV antikropper, 0.09% sodium azide)

 1 negativ kontroll (forynnet humant plasma, 0.09% sodium

azide)

 1 pakkeseddel

5. Tillleggsmateriale

 Prøvetakingsbeholdere

 Sentrifuge (for serum/plasma)

 Timer

 Lansett (bare for fingerfullblod)

 Hvis nødvendig, hepariniserte kapillærrør og

dispenseringspære (for fingerstikk kun med helblod)

6. Oppbevaring & Stabilitet

Testkit bør oppbevares i en temperatur mellom 2-30°C og

brukes før utgangsdato som er oppgitt på forpakningen. Test

kassetter er stabile fram til utgangsdato som er printet på

emballasjen. Test kassetter bør forbli i emballasjen fram til

bruk. Tester skal ikke fryses. Bruk ikke tester som er utgått på

dato.

7. Advarsler og Forholdsregler

 Kun for profesjonell in-vitro diagnostisk bruk.

 Les nøye gjennom testprosedyren før testing.

 Bruk ikke testen hvis den er gått ut på dato.

 Ikke bruk testen hvis emballasjen er skadet.

 Ikke gjenbruk tester.

 Ikkelegg til prøvematerial til reaksjonsområdet

(resultsområdet).

 For å unngå forurensning og smitte, ikke rør

reaksjonsområdet (resultat området).

 Unngå krysskontaminering av prøver ved hjelp av en ny

prøveinnsamlingsbeholder for hver prøve som tas.

 Ikke spis, drikk eller røyk i området der prøver og testsett

håndteres.

 Bruk verneklær som laboratoriefrakker, engangshansker og

vernebriller når prøvene blir analysert.

 Håndter alle prøver som om de inneholder smittestoffer.

Observer etablerte forholdsregler for mikrobiologiske farer

gjennom alle prosedyrer og standard retningslinjer for

korrekt avhandling av prøver.

 Testsettet inneholder produkter av animalsk opprinnelse.

Sertifisert kunnskap om opprinnelse og/eller sanitær

tilstand av dyrene garanterer ikke fravær av smittestoffer.

Det anbefales derfor at disse produktene behandles som

potensielt smittefarlig, og behandles i samsvar med vanlige

sikkerhetsregler (f.eks ikke svelg eller innhaler).

 Fuktighet og temperatur kan påvirke testresultatene.

 Brukt testmateriale skal kastes i henhold til lokale

forskrifter.

8. Prøvetaking og Klargjøring

NADAL® Mononucleosis Test kan utføres ved hjelp av helblod

(fra venepunksjon eller fingerstikk), serum eller plasma.

Å samle fullblod ved venepunksjon fra helblodsprøver:

Samle blodprøver med antikoagulanter (natrium eller litium

heparin, kalium- eller natrium-EDTA, natriumoksalat,

natriumsitrat) ved å følge standard laboratorieprosedyrer.

Å samle fullblod ved fingerstikk fra helblodsprøver:

 Vask pasientens hånd med såpe og varmt vann eller rengjør

den med en spritserviett. Tillat å tørke.

 Masser hånden uten å berøre stikkstedet ved å gni ned

hånden mot fingertuppen av ringfinger eller midtre finger.

 Punkter huden med en steril lansett. Fjern den første

dråpen blod.

 Gni forsiktig hånden fra håndleddet gjennom håndflaten til

fingeren for å danne en avrundet dråpe blod over

stikkstedet.

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Separer serum eller plasma fra blod ved sentrifugering så

snart som mulig for å unngå hemolyse. Bruk bare klare og

ikke-hemolytiske prøver.

Testing bør utføres umiddelbart etter prøvetaking. Ikke

etterlat prøver i romtemperatur ved lengre perioder av

gangen. Serum- og plasmaprøver kan lagres ved 2-8°C i opp til

3 dager. For langtidslagring skal prøvene holdes under -20°C.

Fullblod samlet ved venepunksjon bør oppbevares ved 2-8°C

hvis testen skal utføres innen 2 dager etter prøvetaking.

Fullblodsprøver skal ikke fryses. Fingerstikks helblod bør testes

umiddelbart. Ta med prøvene til romtemperatur før testing.

Frosne prøver må tines helt og blandes godt før testing. Prøver

må ikke fryses og tines gjentatte ganger. Hvis prøvene skal

sendes, bør de være pakket i samsvar med lokale forskrifter

for transport av etiologisk materiale.

9. Test Prosedyre

Ta med testene, buffer, prøve og/eller kontroller til

romtemperatur (15-30°C) før testing.

1. Fjern testkassetten fra den forseglede emballasjen og legg

den på et rent og jevnt underlag. Testkassetten bør brukes

umiddelbart etter åpning av emballasjen. Merk

testkassetten med pasient eller kontroll identifikasjon.

2. a) For serum eller plasmaprøver:

Hold dråperen vertikalt, tilsett

1 dråpe (ca. 25 μl) serum eller

plasma til prøvebrønnen (S) i

testkassetten.

b) For venepunksjon helblod

prøver:

Hold dråperen vertikalt, tilsett

2 dråpe (ca. 50 μl) serum eller

plasma til prøvebrønnen (S) i

testkassetten.

c) For fingerstikk helblodprøver:

Påfør ende av kapillarrøret til

blodet til det er fylt til omtrent

50 µL. Unngå luftbobler. Plasser

en utleveringspære på den

øverste enden av kapillærrøret, og

klem utleverings pære å

dispensere hele blodprøve til

prøvebrønnen (S) av

testkassetten.

3. Ved å holde bufferflasken

vertikalt, legg 1 dråpe (ca. 55 μl)

buffer til prøvebrønnen (S).

4. Start tidtakeren.

5. Vent til den/de fargede linjen(e)

vises. Les av resultatet etter 5

minutter. Ikke tolk resultatet etter

mer enn 10 minutter.

10. Tolkning av resultatet

Positiv:

To fargede streker kommer til syne på

membranen. En linje vises i

kontrollinjeområdet (C) og den andre

linje vises i testlinjeområdet (T).

Merk:

Fargeintensiteten på testlinje regionen (T) kan variere

avhengig av konsentrasjonen av anti-EBV-antistoffer som er

tilstede i prøven. Derfor bør alle nyanser av fargen i test linjen

region (T) vurderes positivt.

Negativ:

En farget linje kommer til syne i

kontrollinje regionen (C). Ingen åpen

farget linje vises i testlinje regionen (T).

Ugyldig:

Kontroll linjen (C) kommer ikke til syne.

Resulter fra tester hvor kontrollinjen

ikke kommer til syne etter

avlesningstiden, bør kastes. Gå gjennom

prosedyren og gjenta testen med en ny

testkassett. Hvis problemet vedvarer må

du slutte å bruke testsettet umiddelbart

og kontakte din forhandler.

Utilstrekkelig prøvevolum, feil driftsprosedyre eller utløpte

tester er de mest sannsynlige årsakene til manglende

kontrollinje.

11. Kvalitetskontroll

En intern prosedyrekontroll er inkludert i testkassetten:

En farget stripe i kontrollinjeområdet (C) er ansett som en

intern prosedyrekontroll. Det bekrefter tilstrekkelig

prøvevolum og riktig prosedyreteknikk.

Good laboratory practice (GLP) anbefaler bruk av

kontrollmateriale for å sikre tilfredsstillende testkitytelse.

Prosedyre for Ekstern Kvalitetskontroll Testing

1. Hold hver flaske vertikalt, legg til 1 dråpe (ca. 40 μL) positiv

eller negativ kontrollløsning til prøvebrønnen (S) på

testkassetten. Ved å holde bufferflasken vertikalt, legg 1

dråpe (ca. 55 μl) til prøvebrønnen (S).

2. Fortsett med steg 4 i 'Test Prosedyre'.

3. Hvis kontrollene ikke gir forventede resultater, må du ikke

bruke testresultatene. Gjenta testen eller kontakt din

forhandler.

12. Begrensninger

 NADAL® Mononucleosis Test er kun utviklet for in-vitro

diagnostisk bruk. Testen skal bare brukes for påvisning av

antistoffer til Epstein-Barr-virus i helblod, serum eller

plasmaprøver. Verken kvantitativ verdi eller økningsraten i

anti-EBV-antistoffene kan bestemmes ved denne kvalitative

testen.

 NADAL® Mononucleosis Test oppdager bare forekomsten av

anti-EBV-antistoffer i prøven og bør ikke brukes som eneste

kriterium for diagnostisering av infeksiøs mononu-

kleoseinfeksjon.

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 Som med alle diagnostiske tester, bør alle resultater

oppnådd med denne testen tolkes i sammenheng med

annen klinisk informasjon til legen.

 Hvis testresultatet er negativt og kliniske symptomer

vedvarer anbefales ytterligere testing ved bruk av andre

kliniske metoder. Et negativt resultat utelukker ikke på noe

tidspunkt muligheten for IM injeksjon.

13. Forventede Resultater

Infeksjon med Epstein-Barr-virus (EBV) under ungdom eller

ungt voksenliv forårsaker infeksiøs mononukleose (IM) hos

35% til 50% av rapporterte tilfeller. 1,5 Forekomsten av EBV-

assosiert IM i USA er estimert til 45 per 100.000 Og er høyest

hos unge og unge voksne - omtrent 2 av 1000. Det eksisterer

ikke noe sesongmønster av EBV infeksjon. Inkubasjonstiden er

10 til 60 dager er vanlig blant voksne, og en inkubasjonstid på

7 til 14 dager er vanlig blant barn og unge.

14. Ytelseskarakteristikk

Sensitivitet

NADAL® Mononucleosis Test blir evaluert med prøver

bekreftet positiv eller negativ av en ledende kommersielt

tilgjengelig lysbilde agglutinasjonstest. Agglutinationstesten

tjente som referansemetode for NADAL® Mononucleosis Test.

Resultatet viser at følsomheten av NADAL® Mononucleosis

Test er> 99,9% i forhold til agglutinasjonstesten.

Spesifisitet

NADAL® Mononucleosis Test bruker antigener som er svært

spesifikke for anti-EBV antistoffer i helblod, serum eller

plasma. Resultatene viser at spesifisiteten til NADAL®

Mononucleosis Test er 98,9% i forhold til lysagglutinationstest.

NADAL® Mononucleosis Test vs. lysbilde agglutinasjonstest

Agglutinasjonstest

NADAL®

Mononucleosis

Test

Positiv Negativ Total

Positiv 60 1 61

Negativ 0 89 89

Total 60 90 150

Relativ sensitivitet:>99,9% (95,1% - 100%)*

Relativ spesifisitet:98,9% (94% - 99,9%)*

Total overenstemmelse: 99,3% (96,3% - 99,9%)*

*95% Konfidensintervall

Substanser som kan påvirke

Negative og positive plasma- og serumprøver (ELISA-

bekreftet) ble kontrolert med analyttene ved

konsentrasjonene som er oppført nedenfor og testet i tre

eksemplarer.

Analyte Konsentrasjon

Ascorbic syre 20 mg/ml

Hemoglobin 1000 mg/dl

Gentisin syre 20 mg/dl

Oxalic syre 60 mg/dl

Bilirubin 1000 mg/dl

Urea syre 20 mg/ml

Acetaminophen 20 mg/dl

Acetylsalicylic syre 20 mg/dl

Metanol 10%

Analyte Konsentrasjon

Kreatin 200 mg/dl

Albumin 2000 mg/dl

Koffein 20 mg/dl

Analysen viser ingen uoverstemmelse med bruk av NADAL®

Mononucleosis Test. Det var ingen åpenbare forskjeller blant

resultatene som ble oppnådd med tre ulike lot.

Presisjon

Inter- og intra-lot variabilitet

Tre uavhengige deler av NADAL® Mononucleosis Test ble

testet med negative, så vel som svake, mellomsvake og

tydelige positive serum- og plasmaprøver i 10-trinns

bestemmelser. Alle resultat stemte overrens med

forventningene. Ingen avvikende resultat ble oppnådd mellom

de forskjellige partiene.

Kryssreaktivitet

Prøver, positive for de følgende parametere ble testet med

NADAL® Mononucleosis Test:

RF HCV

HbsAg TB

HbeAg HIV

HbeAb Syfilis

HbcAb

Ingen kryssreaktivitet ble observert, noe som tyder på at

NADAL® Mononucleosis Test har en høy grad av spesifisitet for

humaneanti-EBV-antistoffer.

15. Referanser

1. Hickey SM, Strasburger VC. What Every Pediatrician Should Know About Infectious

Mononucleosis In Adolescents. Pediatr Clin North Am. 1997;44(6):1541-56.

2. Omori M. Mononucleosis http://www.emedicine.com/EMERG/topic309.htm

3. Linde A. Diagnosis of Epstein-Barr-Virus-related diseases. Scand J Infect Dis Suppl.

1996; 100:83-8.

4. Papesch M, Watkins R. Epstein-Barr-Virus infectious mononucleosis. Clin

Otolaryngol. 2001; 26(1):3-8.

5. CDC National Center for Infectious Diseases. EBV & IM:

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Rev. 1, 2019-07-04 KD

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medical device

Dispositif médical de

diagnosticc in vitro

Producto sanitario

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in vitro

Dispositivo medico-

diagnostico in vitro

Tylko do diagnostyki in

vitro

Temperaturbegrenzung Temperature

limitation

Limites de

température Límite de temperatura Limiti di temperatura Temperatura

przechowywania

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Diagnostický

zdravotnický

prostředek in vitro

In vitro -

diagnostiikkaan

tarkoitettu

lääkinnällinen laite

Medicinteknisk

produkt avsedd för

in vitro-diagnostik

Medisch

hulpmiddel voor

in-vitrodiagnostiek

Medicinsk udstyr til

in vitro-diagnostik

In-vitro diagnostic

medisinsk enhet

Limites de

temperatura Teplotní omezení Lämpötilarajat Temperatur-

begränsning Temperatuurlimiet Temperatur-

begrænsning

Temperatur

begrensning

Código do lote Kód šarže Eräkoodi Satsnummer Code van de partij Batchkode Merking

Não reutilizar Pro jednorázové

použití Kertakäyttöinen Får inte

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